服中外原DNA这种方法是受二价金属离子能促进细胞吸收外源将DNA加到细中加入氰化钙DNA的启发而发展起来的。DNA悦淀当核酸以磷酸钙一DNA共添加新鲜培养液沉淀物的形式在时,细胞摄取DNA的能力显著加强但转移效率较低,仅有除去DNA溶液特养1%~5%的外源DNA可以进入受体细胞核中,大约仅有1%的DNA可以在细转移培养签定筛选胞中稳定表达。磷酸钙一DNA共沉淀法基因转移技术
磷酸钙—DNA共沉淀法基因转移技术 这种方法是受二价金属离 子能促进细胞吸收外源 DNA的启发而发展起来的。 当核酸以磷酸钙—DNA共 沉淀物的形式在时,细胞 摄取DNA的能力显著加强。 但转移效率较低,仅有 1%~5%的外源DNA可以 进入受体细胞核中,大约 仅有1%的DNA可以在细 胞中稳定表达
脂质溶液将需要转移的外源DNA外源DNA混台脂质双层或RNA包裹于脂质体内:DNA被包裹囍进脂质体内由于脂质体具有磷脂双层加人细愿中结构,与细胞膜类似,因脂质体站到细表上此可以与受体细胞膜融合,核脂重双民点项膜融合从而将外源DNA转入宿DNA进入细胞主细胞。这种方法转基因外源基因的衣达效率高。核中的DNA脂质载体包埋法
脂质载体包埋法 将需要转移的外源DNA 或RNA包裹于脂质体内, 由于脂质体具有磷脂双层 结构,与细胞膜类似,因 此可以与受体细胞膜融合, 从而将外源DNA转入宿 主细胞。这种方法转基因 效率高
转染包装细惑系外源DNA包装反转录我体DNA组更表达病毒蛋白、收体RNA被包装皮感染性病毒粒子体RNA福福分离病击数子福RNARAA达择感兴趣的细惠逆转录牌作用双链DNADNA环化外课基因整合表达细胞DNA外源基因表达载体DNA稳定地整合到色体DNA上病毒介导的生物学方法
病毒介导的生物学方法
第二节转基因动物的方法
第二节 转基因动物的方法
·反转录病毒法基因显微注射法胚胎干细胞移植法
•反转录病毒法 •基因显微注射法 •胚胎干细胞移植法