反相柱(reversed phase column):填料是非极性的，官 能团为烷烃，例如：C18(0DS)、C8、C4等。 。在反相柱中Cl8(0 ctadecylsilyl,简称0DS),即十八烷 基硅烷键合硅胶填料，这种填料在反相色谱中发挥着极为 重要的作用，它可完成高效液相色谱70~80%的分析任务 。由于C18(0DS)是长链烷基键合相，有较高的碳含量和更 好的疏水性，对各种类型的生物大分子有更强的适应能力 ,因此在生物化学分析工作中应用的最为广泛，近年来， 为适应氨基酸、小肽等生物分子的分析任务，又发展了CH 、C3、C4等短链烷基键合相和大孔硅胶(20ペ40m)
反相柱（reversed phase column）：填料是非极性的，官 能团为烷烃，例如：C18(ODS)、C8、C4等。 在反相柱中C18（Octadecylsilyl，简称ODS），即十八烷 基硅烷键合硅胶填料，这种填料在反相色谱中发挥着极为 重要的作用，它可完成高效液相色谱70～80％的分析任务 。由于C18(ODS)是长链烷基键合相，有较高的碳含量和更 好的疏水性，对各种类型的生物大分子有更强的适应能力 ，因此在生物化学分析工作中应用的最为广泛，近年来， 为适应氨基酸、小肽等生物分子的分析任务，又发展了CH 、C3、C4等短链烷基键合相和大孔硅胶（20～40μm）
试剂 作用？ 。无水乙醇、抗坏血酸、氢氧化钾、无水硫酸钠 。乙醚、石油醚：沸程为30℃~60℃。 。pH试纸pH范围1~14) o 甲醇：色谱纯。 淀粉酶：活力单位≥100U/mg。 。2,6-二叔丁基对甲酚：简称BHT。 。标准品 。维生素A标准品、维生素E标准品
无水乙醇、抗坏血酸、氢氧化钾、无水硫酸钠 乙醚、石油醚:沸程为30℃~60℃。 pH 试纸(pH 范围1~14) 甲醇:色谱纯。 淀粉酶:活力单位≥100U/mg。 2,6-二叔丁基对甲酚:简称 BHT。 标准品 维生素 A标准品、维生素 E标准品 试剂 作用？
方法 。步骤： 样品皂化 提取 浓缩 色谱分析 目的、步骤 条件 方法、设备
步骤： 样品皂化 提取 浓缩 色谱分析 18 目的、步骤 方法 方法、设备 条件
试样制备 。将一定数量的样品按要求经过缩分、粉碎均质后，储存于 样品瓶中，避光冷藏，尽快测定。 。注意：使用的所有器皿不得含有氧化性物质；分液漏斗活 塞玻璃表面不得涂油；处理过程应避免紫外光照，尽可能避 光操作；提取过程应在通风柜中操作
试样制备 将一定数量的样品按要求经过缩分、粉碎均质后,储存于 样品瓶中,避光冷藏,尽快测定。 注意：使用的所有器皿不得含有氧化性物质;分液漏斗活 塞玻璃表面不得涂油;处理过程应避免紫 外光照,尽可能避 光操作;提取过程应在通风柜中操作
皂化 。1不含淀粉样品称取试样于150mL平底烧瓶中，再加入1.0g抗 坏血酸和0.1gBHT,混匀，加入30mL无水乙醇，加入 10mL~20mL氢氧化钾溶液，边加边振摇，混匀后于80℃恒温 水浴震荡皂化30min,皂化后立即用冷水冷却至室温。 。2含淀粉样品称取样品于150mL平底烧瓶中，加入0.5g1g淀 粉酶，放入60℃水浴避光恒温振荡30min后，取出，向酶解液中 加入1.0g抗坏血酸和0.1gBHT,混，加入30mL无水乙醇 ,10mL~20mL氢氧化钾溶液，边加边振摇，混匀后于80℃恒温 水浴振荡皂化30in,皂化后立即用冷水冷却至室温
皂化 1 不含淀粉样品称取试样于150mL 平底烧瓶中,再加入1.0g抗 坏血酸和0.1gBHT,混匀,加入30mL无水乙醇,加入 10mL~20mL氢氧化钾溶液,边加边振摇,混匀后于80 ℃恒温 水浴震荡皂化30min,皂化后立即用冷水冷却至室温。 2 含淀粉样品称取样品于150mL 平底烧瓶中,加入0.5g~1g淀 粉酶,放入60 ℃水浴避光恒温振荡30min后,取出,向酶解液中 加入1.0g抗坏血酸和0.1gBHT,混匀,加入30mL 无水乙醇 ,10mL~ 20mL氢氧化钾溶液,边加边振摇,混匀后于80℃恒温 水浴振荡皂化30min,皂化后立即用冷水冷却至室温