第三类(|型)限制性内切醢也有专· 的识别顺序,但不是对称的回文顺序,在识 别顺序旁边几个核苷酸对的固定位置上切 割双链。但这几个核苷酸对不是特异性的。 因此,这种限制性内切酶切割后产生的 定长度DNA片段,具有各种单链末端。因此 不能应用于基因克隆
第三类( III型)限制性内切酶也有专一 的识别顺序,但不是对称的回文顺序,在识 别顺序旁边几个核苷酸对的固定位置上切 割双链。但这几个核苷酸对不是特异性的。 因此,这种限制性内切酶切割后产生的一 定长度DNA片段,具有各种单链末端。因此 不能应用于基因克隆
3)同裂酶和同尾酶: 同裂酶 有时两种限制性内切酶的识别核苷酸顺 序和切割位置都相同,其差别只在于当 识别顺序中有甲基化的核苷酸时,一种 限制性內切酶可以切割,另一种则不能。 例如Hpa和Msp|的识别顺序都是 5…G0GG.3,如果其中有5-甲 基胞嘧啶,则只有Hpa川|能够切割。这 些有相同切点的酶称为同裂醢(同切醢 或异源同工醢)
同裂酶: 有时两种限制性内切酶的识别核苷酸顺 序和切割位置都相同,其差别只在于当 识别顺序中有甲基化的核苷酸时,一种 限制性内切酶可以切割,另一种则不能。 例如HpaⅡ和MspⅠ的识别顺序都是 5’……G’CG_G……3’,如果其中有5’-甲 基胞嘧啶,则只有HpaⅡ能够切割。这 些有相同切点的酶称为同裂酶(同切酶 或异源同工酶)。 3) 同裂酶和同尾酶:
同尾酶: 有时两种酶切割序列不完全相同,但却能 产生相同的粘性末端,这类酶被称为同尾 醢,可以通过DNA连接酶将这类末端连接 起来,但原来的酶切位点将被破坏,有时 可能会产生一个新的酶切位点。如Xba1、 №he1、Spe1以及Sty切割的DNA序列不同, 但均给出相同的“CTAG”粘性末端。这些 粘性末端连接后,以上的酶将不能再切割, 但却产生了一个新的4核苷酸的酶切位点, 即Bfa的酶切位点
有时两种酶切割序列不完全相同,但却能 产生相同的粘性末端,这类酶被称为同尾 酶,可以通过DNA连接酶将这类末端连接 起来,但原来的酶切位点将被破坏,有时 可能会产生一个新的酶切位点。如Xba1、 Nhe1、Spe1以及Styl切割的DNA序列不同, 但均给出相同的“CTAG”粘性末端。这些 粘性末端连接后,以上的酶将不能再切割, 但却产生了一个新的4核苷酸的酶切位点, 即 Bfa1的酶切位点。 同尾酶: