实验三 质粒DNA的酶切鉴定 及琼脂糖凝胶电泳
实验三 质粒DNA的酶切鉴定 及琼脂糖凝胶电泳
1.实验目的和要求 学习和掌握限制性内切酶的特性、酶 解和琼脂糖凝胶电泳的操作方法,并 理解限制性内切酶是DNA重组技术的 关键工具,琼脂糖凝胶电泳是分离鉴 定DNA片段的有效方法
1. 实验目的和要求 学习和掌握限制性内切酶的特性、酶 解和琼脂糖凝胶电泳的操作方法，并 理解限制性内切酶是DNA重组技术的 关键工具，琼脂糖凝胶电泳是分离鉴 定DNA片段的有效方法
2.相关基础知识 限制性核酸內切酶:是一类能识别双 链DNA分子特异性核酸序列的DNA水 解酶。是体外剪切基因片段的重要工 具,所以常常与核酸聚合酶、连接酶 以及末端修饰酶等一起称为工具酶。 限制性核酸内切酶不仅是DNA重组中 重要的工具,而且还可以用于基因组 酶切图谱的鉴定
2. 相关基础知识 限制性核酸内切酶：是一类能识别双 链DNA分子特异性核酸序列的DNA水 解酶。是体外剪切基因片段的重要工 具，所以常常与核酸聚合酶、连接酶 以及末端修饰酶等一起称为工具酶。 限制性核酸内切酶不仅是DNA重组中 重要的工具，而且还可以用于基因组 酶切图谱的鉴定
1)寄主控制的限制与修饰现象 2)核酸限制性内切酶的类型 3)核酸限制性内切酶的基本特性 4)同裂酶和同尾酶 5)核酸限制性内切酶的命名法 6)影响核酸限制性内切酶活性的因素
1) 寄主控制的限制与修饰现象 2) 核酸限制性内切酶的类型 3) 核酸限制性内切酶的基本特性 4) 同裂酶和同尾酶 5) 核酸限制性内切酶的命名法 6) 影响核酸限制性内切酶活性的因素
1寄主控制的限制与修饰现象 限制与修饰系统是细胞的一种防卫手段。各 种细菌都能合成一种或几种能够切割DNA双 链的核酸内切酶,它们以此来限制外源DNA 存在于自身细胞内,但合成这种酶的细胞自 身的DNA不受影响,因为这种细胞还合成了 种修饰酶,对自身的DNA进行了修饰,限 制性酶对修饰过的DNA不能起作用。这种现 象被称为寄主控制的限制与修饰现象
1) 寄主控制的限制与修饰现象 限制与修饰系统是细胞的一种防卫手段。 各 种细菌都能合成一种或几种能够切割DNA双 链的核酸内切酶，它们以此来限制外源DNA 存在于自身细胞内，但合成这种酶的细胞自 身的DNA不受影响，因为这种细胞还合成了 一种修饰酶，对自身的DNA进行了修饰，限 制性酶对修饰过的DNA不能起作用。这种现 象被称为寄主控制的限制与修饰现象