含区5淫紐论》 第一章导论 第二章基因操作的工具酶 第三章基因克隆的载体 第四章基因克隆的策略 第五章克隆基因的表达 第六章基因工程的基本技术
《基因工程概论》 第一章 导 论 第二章 基因操作的工具酶 第三章 基因克隆的载体 第四章 基因克隆的策略 第五章 克隆基因的表达 第六章 基因工程的基本技术
第四章基因克隆的策略 引言 第一节目的基因的获得 第二节重组体的构建及细菌转化 第三节重组克隆的筛选和鉴定
第四章 基因克隆的策略 引 言 第一节 目的基因的获得 第二节 重组体的构建及细菌转化 第三节 重组克隆的筛选和鉴定
引言 基因克隆的本质是把某一目标DNA片段通过无性 的方式进行扩增和表达,而这一过程往往是通过载体 和寄主细胞来实现的。 般而言,基因克隆包括四部分工作:1、目标 DNA片段的获得;2、克隆载体的构建;3、寄主细胞 的转化;4、重组体克隆的选择和鉴定。 目前,以大肠杆菌为寄主,以质粒和噬菌体等为 载体的基因克隆体系已经相当的成熟,本章将以这种 克隆模式为主体对基因克隆的策略展开讨论和分析
引 言 基因克隆的本质是把某一目标DNA片段通过无性 的方式进行扩增和表达，而这一过程往往是通过载体 和寄主细胞来实现的。 一般而言，基因克隆包括四部分工作：1、目标 DNA片段的获得；2、克隆载体的构建；3、寄主细胞 的转化；4、重组体克隆的选择和鉴定。 目前，以大肠杆菌为寄主，以质粒和噬菌体等为 载体的基因克隆体系已经相当的成熟，本章将以这种 克隆模式为主体对基因克隆的策略展开讨论和分析
大肠杆菌作为寄主进行DNA克隆的实骀方豪 NA片段限制性内 双链DNA 化学法 的获得 切酶消化 机械切割 的合成 直接合成 载体构建 同聚物 粘性末端 平末端 加接头造成 加尾 连接 连接 粘性末端 细菌转化重组噬菌体重组质粒 体外包装 DNA转染 的转化 进行转导 ●●●●●● ●●●●●●● 重组体 的鉴定:表型鉴定 核酸杂交 免疫学分析酶切鉴定·
大肠杆菌作为寄主进行DNA克隆的实验方案 DNA片段 的获得 载体构建 细菌转化 重组体 的鉴定 限制性内 切酶消化 机械切割 双链cDNA 的合成 化学法 直接合成 同聚物 加尾 粘性末端 连接 平末端 连接 加接头造成 粘性末端 重组噬菌体 DNA转染 重组质粒 的转化 体外包装 进行转导 表型鉴定 核酸杂交 免疫学分析 酶切鉴定
第四章基因克隆的策略 引言 第一节目的基因的获得 第二节重组体的构建及细菌转化 第三节重组克隆的筛选和鉴定
第四章 基因克隆的策略 引 言 第一节 目的基因的获得 第二节 重组体的构建及细菌转化 第三节 重组克隆的筛选和鉴定