第八章植物基因工程体及其构建 ◆第一节植物基因工程敢体种类 ◆第二节根癌农杆菌T质粒的结构与功能 ◆第三节T质粒基因转化机理 ◆四节T质粒的改造及敢体构建 ◆第五节常用选择标记和报告基因
第八章 植物基因工程载体及其构建 第一节 植物基因工程载体种类 第二节 根癌农杆菌Ti质粒的结构与功能 第三节 Ti质粒基因转化机理 第四节 Ti质粒的改造及载体构建 第五节 常用选择标记和报告基因
植物基因转化系统 ●1载体转化系统(T质粒转化载体、Ri质粒转化载 体、病毒转化载体) ●2.DNA直接导入转化系统(原生质体、基因枪) ●3.种质转化系统(花粉管通道法、生殖细胞浸泡法、 胚囊子房注射法)。 载体转化系统是目前植物基因工程中使用最多 机理最清楚、技术最成熟的、最重要的一种转化系统, 其中又以T质粒转化载体最为重要
植物基因转化系统 l 1.载体转化系统（Ti质粒转化载体、Ri质粒转化载 体、病毒转化载体） l 2. DNA直接导入转化系统（原生质体、基因枪） l 3.种质转化系统（花粉管通道法、生殖细胞浸泡法、 胚囊子房注射法）。 载体转化系统是目前植物基因工程中使用最多、 机理最清楚、技术最成熟的、最重要的一种转化系统, 其中又以Ti质粒转化载体最为重要
第一节植物基因工程载体种类 根据其功能和构建过程,可分为以下种类。 (1)目的基因克隆载体:其功能是保存和克隆目的基因。与 微生物基因工程相似,通常是由多拷贝的E.Coi小质粒为载 体 (2)中间克隆载体:是构建中间表达载体的基础质粒。是由 大肠杆菌质粒插入TDNA片段、目的基因和标记基因等构建 而成。 (3)中间表达载体:是含有植物特异启动子的中间载体。是 构建转化载体的质粒 (4)卸甲载体:是解除武装的T质粒或R质粒,是构建转化 载体的受体质粒。 (5)植物基因转化载体:是最后用于目的基因导人植物细胞 的载体,亦称工程载体。它是由中间表达载体和卸甲载体构 建而成
第一节 植物基因工程载体种类 根据其功能和构建过程，可分为以下种类。 （1）目的基因克隆载体：其功能是保存和克隆目的基因。与 微生物基因工程相似，通常是由多拷贝的E. Coli小质粒为载 体。 （2）中间克隆载体：是构建中间表达载体的基础质粒。是由 大肠杆菌质粒插入T-DNA片段、目的基因和标记基因等构建 而成。 （3）中间表达载体：是含有植物特异启动子的中间载体。是 构建转化载体的质粒。 （4）卸甲载体：是解除武装的Ti质粒或Ri质粒，是构建转化 载体的受体质粒。 （5）植物基因转化载体：是最后用于目的基因导人植物细胞 的载体，亦称工程载体。它是由中间表达载体和卸甲载体构 建而成
第二节根癌农杆菌T质粒的结构与功 工i质粒的遗传特性、结构及功能 ◆二、TDNA的基因结构与功能 Vi区操纵子的基因结构与功能
第二节 根癌农杆菌Ti质粒的结构与功能 一、Ti质粒的遗传特性、结构及功能 二、T-DNA的基因结构与功能 三、Vir区操纵子的基因结构与功能
T质粒的遗传特性、结构及功能 ◆1.质粒的遗传特性及类型 i质粒是根癟农杆菌染色体外的遗 传物质,为双股共价闭合的环状DNA分子, 其分子量为95~156×105D,约有200kb 组成。 根据其诱导的植物冠瘿瘤中所合成 的冠瘿碱种类不同,Ti质粒可以被分成四 种类型:章鱼碱型( octopine)、胭脂碱型 ( nopaline)、农杆碱型( agropine)和农 杆菌素碱型( agrocinopine)或称琥珀碱 型( succinamopIne)
一、Ti质粒的遗传特性、结构及功能 1. Ti质粒的遗传特性及类型 l Ti质粒是根癌农杆菌染色体外的遗 传物质，为双股共价闭合的环状DNA分子， 其分子量为95～156×106D, 约有200kb 组成。 l 根据其诱导的植物冠瘿瘤中所合成 的冠瘿碱种类不同，Ti质粒可以被分成四 种类型：章鱼碱型(octopine)、胭脂碱型 (nopaline)、农杆碱型（agropine）和农 杆菌素碱型（agrocinopine）或称琥珀碱 型(succinamopine)