SOD测定方法直接法:脉冲辐射分解法、电子顺磁共振波法、核磁共振法羟胺间接法(化学法):邻苯三酚自氧化法、细胞色素C还原法、法、黄嘌呤氧化酶-NBT法、肾上腺素法等。免疫法:放射免疫法、化学发光免疫分析法、ELISA法等。因为超氧阴离子自由基寿命短,不稳定,不易直接测定SOD活性,[因而采用间接法测定常用有3种:(NBT法)氮蓝四唑光化还原法邻苯三酚自氧化法化学发光法
SOD测定方法 直接法:脉冲辐射分解法、电子顺磁共振波法、核磁共振法。 间接法(化学法):邻苯三酚自氧化法、细胞色素C还原法、羟胺 法、黄嘌呤氧化酶-NBT法、肾上腺素法等。 免疫法:放射免疫法、化学发光免疫分析法、ELISA法等。 因为超氧阴离子自由基寿命短,不稳定,不易直接测定SOD活 性,因而采用间接法测定。 常用有3种:氮蓝四唑光化还原法 (NBT法) 邻苯三酚自氧化法 化学发光法
NBT法测定SOD酶活性的原理在有氧化物质存在下,核黄素可被光还原,还原的核黄素极易再氧化产生氧自由基,氧自由基可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腺,甲在560nm处有最大吸收值。SOD可清除氧自由基,从而抑制甲形成光还原反应后,反应液蓝色愈深,说明酶活性愈低;反之,酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小酶单位/样品量:
在有氧化物质存在下,核黄素可被光还原,还原的核黄 素极易再氧化产生氧自由基,氧自由基可将氮蓝四唑还 原为蓝色的甲腙,甲腙在560nm处有最大吸收值。SOD 可清除氧自由基,从而抑制甲腙形成。 光还原反应后,反应液蓝色愈深,说明酶活性愈低;反 之,酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。 酶单位/样品量 = NBT法测定SOD酶活性的原理