基因工程制药基本环节 获得目的基因构建重组DNA_构建筛选基因 工程菌/细胞 上游阶段 培养工程菌/细胞 产物分离纯化 (发酵) 下游阶段 半成品制备与检定 成品制备与检定
微生物与生化药学教研室 基因工程制药基本环节 构建重组DNA 培养工程菌/细胞 （发酵） 构建筛选基因 工程菌/细胞 产物分离纯化 半成品制备与检定 成品制备与检定 上游阶段 下游阶段 获得目的基因
上游技术 基因工程菌(细胞)的构建
微生物与生化药学教研室 上游技术 基因工程菌（细胞）的构建
基因工程菌的构建与筛选 分子工具 宿主细胞 的DNA 单菌落 载体 98 内可消化 內切消化 DNA片段 载体 克隆筛选 连接 c.。 转化 载体 基因工程菌 DNA重组技术 重組DM(分子克隆)
微生物与生化药学教研室 基因工程菌的构建与筛选 DNA重组技术 （分子克隆） 分子工具 宿主细胞
利用基因重组细胞系生产重组蛋白药物流程 质粒载体 匚 Target gene 转染 target细胞 N14 筛选重组子 转化至E.coi 质粒提取 Prepare asmid DNA collect vir 病毒载体 Lyse cells 抗性筛选 重组蛋白 大规模细 重组细胞 Extract Protoin Extract mRNA 功能分析 胞培养 andor 收集产物,纯 重组细胞鉴定 化重组蛋白
微生物与生化药学教研室 利用基因重组细胞系生产重组蛋白药物流程 Target gene 质粒提取 筛选重组子 转染target细胞 抗性筛选 重组细胞 重组细胞鉴定 重组蛋白 功能分析 收集产物，纯 化重组蛋白 质粒载体 病毒载体 大规模细 胞培养
基因工程菌的构建与筛选 (一)目的基因 Target gene 在基因工程的设计和操作中,被用于基因组重组,改变 受体细胞形状和获得预期表达产物的基因。 Target gene selection 对某种疾病有预防,治疗或诊断作用的蛋白质或基因。 目的基因的表达产物应具有较大的经济效益和社会效益, 如特效药物,疫苗,或诊断试剂,而不能是有害产物 设计:活性,表达量,表达形式,抗原性,热源,生产成 本等考虑
微生物与生化药学教研室 （一） 目的基因 Target gene： 在基因工程的设计和操作中，被用于基因组重组，改变 受体细胞形状和获得预期表达产物的基因。 Target gene selection： 对某种疾病有预防，治疗或诊断作用的蛋白质或基因。 目的基因的表达产物应具有较大的经济效益和社会效益， 如特效药物，疫苗，或诊断试剂，而不能是有害产物。 设计：活性，表达量，表达形式，抗原性，热源，生产成 本等考虑。 基因工程菌的构建与筛选