琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段
琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段
琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段1实验目的2实验原理3仪器与试剂4实验步骤5注意事BIOIECHYourcornpanyslogan
Your company slogan 琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段 1 实验目的 2 实验原理 3 仪器与试剂 4 实验步骤 5 注意事项
1.实验目的学习用琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度、浓度、构型及其相对分子质量大小的方法。Yourcornoainysloaar
Your company slogan 1.实验目的 ❖ 学习用琼脂糖凝胶电泳检测DNA 的纯度、浓度、构型及其相对分子质量 大小的方法
2.实验原理琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、鉴定和纯化DNA片段的标准方法。该技术操作简便快捷，可以分辨用其他方法（如密度梯度离心法）无法分离的DNA片段。用低浓度的嵌入式荧光染料溴乙锭（EB）染色，在紫外光下可以检出1~1Ong的DNA条带，从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。聚丙烯酰胺凝胶电泳分离1kb以下的小片段DNA效果较好，其至可以分辨相差1bp的DNA片段。聚丙烯酰胺凝胶电泳速率快，容量相对较大，采用垂直装置进行电泳，但制备和操作比琼脂糖凝胶电泳困难，常用于核酸的序列测定。琼脂糖凝胶电泳的分瓣率比聚丙烯酰胺凝胶电泳低，伯其分离范围广，不同浓度的琼脂糖凝胶电泳可分离DNA片段的范围为200bp~50kb，通常在水平装置上进行，操作简便。Yourcornpanysloca
Your company slogan 2.实验原理 text1 text2 text3 琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、鉴定和纯 化DNA片段的标准方法。该技术操作简便快捷，可以分辨用其他 方法（如密度梯度离心法）无法分离的DNA片段。用低浓度的嵌 入式荧光染料溴乙锭（EB）染色，在紫外光下可以检出1~10ng的 DNA条带，从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。聚丙烯酰胺凝 胶电泳分离1kb以下的小片段DNA效果较好，甚至可以分辨相差 1bp的DNA片段。聚丙烯酰胺凝胶电泳速率快，容量相对较大，采 用垂直装置进行电泳，但制备和操作比琼脂糖凝胶电泳困难，常 用于核酸的序列测定。琼脂糖凝胶电泳的分辨率比聚丙烯酰胺凝 胶电泳低，但其分离范围广，不同浓度的琼脂糖凝胶电泳可分离 DNA片段的范围为200bp~50kb，通常在水平装置上进行，操作简 便
3.仪器与试剂（1）0.5×TBE电泳缓冲液：54g(1)天平Tris、27.5g硼酸、3.72g二水合EDTA二钠盐，用水定容至1000mL。使用(2)电炉时稀释10倍。（2）EB溶液：称取EB溶于无菌水中(3)制胶槽母液浓度1mg/mL4℃避光保存。（3）相对分子质量标准（100bp，（4）电泳仪DNA标准物）(5）电泳槽（4）6×点样缓冲液（0.25%溴酚蓝，400g/蔗糖）(6)荧光成像仪（5）琼脂糖(7)移液枪（6）扩增好的毛囊DNA样品Yourcornpanyslogan
Your company slogan 3.仪器与试剂 （1）天平 （2）电炉 （3）制胶槽 （4）电泳仪 （5）电泳槽 （6）荧光成像仪 （7）移液枪 仪器 text2 试剂 （1）0.5 × TBE 电泳缓冲液：54g Tris、27.5g硼酸、3.72g二水合EDTA 二钠盐，用水定容至1000mL。使用 时稀释10倍。 （2）EB溶液：称取EB溶于无菌水中， 母液浓度1mg/mL，4℃避光保存。 （3）相对分子质量标准（100bp， DNA标准物） （4）6 × 点样缓冲液（0.25%溴酚 蓝，400g/L蔗糖） （5）琼脂糖 （6）扩增好的毛囊DNA样品