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凝胶过滤层析法分离血红蛋白 化学生物学实验
1.实验目的初步了解凝胶过滤层析法的简单原理及应用初步掌握应用凝胶过滤法分离蛋白质
1.实验目的 初步了解凝胶过滤层析 法的简单原理及应用 初步掌握应用凝胶过滤 法分离蛋白质
2.实验原理层析法是利用混合物中各组分物理经学性质的差别（如吸附力、溶解度、分子形状、大小和极性等），使各组分以不同的程度分布在两相中，从而使各组分以不同的速度随流动相向前流动而达到分离的目的。层析法可分为多种类型，包括分配层析，离子交换层析，凝胶过滤层析，亲和层析等。分配层析凝胶过滤层析层析法离子交换层析亲和层析
2.实验原理 层析法是利用混合物中各组分物理经学性质的差别（如吸 附力、溶解度、分子形状、大小和极性等），使各组分以 不同的程度分布在两相中，从而使各组分以不同的速度随 流动相向前流动而达到分离的目的。层析法可分为多种类 型，包括分配层析，离子交换层析，凝胶过滤层析，亲和 层析等。 层析法 分配层析 离子交换层析 凝胶过滤层析 亲和层析
2.实验原理由于理化性质分步收集流出液，差异，与两相与固定相相互待分离混合发生相互作用可得到样品中所作用力越弱的物(A、B)（吸附、溶解、组分，随流动含的各单一组分，随流动相通结合等）的能相移动时受到从而达到将各组力不同，在两的阻滞作用小,过固定相分分离的目的相中的分配移动速度快（含量对比）不同
2.实验原理 待分离混合 物（A、B） 随流动相通 过固定相 由于理化性质 差异，与两相 发生相互作用 （吸附、溶解、 结合等）的能 力不同，在两 相中的分配 （含量对比） 不同 与固定相相互 作用力越弱的 组分，随流动 相移动时受到 的阻滞作用小， 移动速度快 分步收集流出液， 可得到样品中所 含的各单一组分， 从而达到将各组 分分离的目的
2.实验原理凝胶过滤层析，主要根据混合物中分子的大小及形状不同，在通过凝胶（固定相）时，分子的扩散速率各异而达到分离的目的。凝胶颗粒具有多孔性的网状结构，小分子可以进入凝胶颗粒内部，流程长而移动速率慢（阻滞作用大）：而大分子则被排除在外，沿凝胶间空隙随（流动相）流动，流动短而移动速率快（阻滞作用小），比小分子物质先流出层析床，所以凝胶过滤层析又称为排阻层析，分子筛层析，凝胶过滤法操作简例，且操作条件温和，不易引起生物样品变性失活，分离效果好，故广泛应用于蛋白质、酶、核酸的分离提纯（包括脱盐、浓盐及分子量的测定等）
凝胶过滤层析，主要根据混合物中分子的大小及形 状不同，在通过凝胶（固定相）时，分子的扩散速 率各异而达到分离的目的。凝胶颗粒具有多孔性的 网状结构，小分子可以进入凝胶颗粒内部，流程长 而移动速率慢（阻滞作用大）；而大分子则被排除 在外，沿凝胶间空隙随（流动相）流动，流动短而 移动速率快（阻滞作用小），比小分子物质先流出 层析床，所以凝胶过滤层析又称为排阻层析，分子 筛层析，凝胶过滤法操作简例，且操作条件温和， 不易引起生物样品变性失活，分离效果好，故广泛 应用于蛋白质、酶、核酸的分离提纯（包括脱盐、 浓盐及分子量的测定等） 2.实验原理