第二节常用电泳方法 三、凝胶电泳 由区带电泳中派生出的一种用凝胶物质作支持物 进行电泳的方式。 凝胶电泳中的琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶 电泳是普通电泳中应用最多 的两种形式。 目前，这种办法被广泛 用来测定蛋白质的分子量。 凝胶电泳图
第二节 常用电泳方法 三、凝胶电泳 由区带电泳中派生出的一种用凝胶物质作支持物 进行电泳的方式。 凝胶电泳中的琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶 电泳是普通电泳中应用最多 的两种形式。 目前，这种办法被广泛 用来测定蛋白质的分子量。 凝胶电泳图
第二节常用电泳方法 四、等电聚焦电泳 1。等电聚焦电泳过程 一种利用有pH值梯度的介质， 分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。 在一个稳定连续的线性pH梯度的溶液（两性载体电 解质)中进行分离，每一种被 净电荷 分离的两性物质都移向与它的等 电点相一致的pH位置，在那里不 再移动（称为聚焦） 。 货白质样品 蛋白质样品A 净电荷与PH的关系曲线
第二节 常用电泳方法 四、等电聚焦电泳 1．等电聚焦电泳过程 一种利用有pH值梯度的介质， 分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。 在一个稳定连续的线性pH梯度的溶液（两性载体电 解质）中进行分离，每一种被 分离的两性物质都移向与它的等 电点相一致的pH位置，在那里不 再移动（称为聚焦）。 净电荷与PH的关系曲线
第二节常用电泳方法 2.等电聚焦电泳的特点 ①使用两性载体电解质，在电极之间形成稳定、 连续、线性的H梯度；②由于“聚焦效应”，即使很 小的样品也能获得清晰、鲜明的区带界面；③电泳速 度快：④分辨率高；⑤加入样品的位置可任意选择；⑥ 可用于测定蛋白质类物质的等电点：⑦适用于中、大 分子量（如蛋白质、肽类、同工酶等）生物组分的分 离分析
第二节 常用电泳方法 2．等电聚焦电泳的特点 ①使用两性载体电解质，在电极之间形成稳定、 连续、线性的pH梯度；②由于“聚焦效应”，即使很 小的样品也能获得清晰、鲜明的区带界面；③电泳速 度快;④分辨率高;⑤加入样品的位置可任意选择；⑥ 可用于测定蛋白质类物质的等电点;⑦适用于中、大 分子量（如蛋白质、肽类、同工酶等）生物组分的分 离分析
第二节常用电泳方法 五、等速电泳 采用两种不同浓度的电解质，一种为前导电解质， 充满整个毛细管柱；另一种为尾随电解质，置于一端 的电泳槽中。前导电解质的迁移率高于任何样品组分 尾随电解质则低于任何样品组分，被分离的组分按其 不同的迁移率夹在中 样品 间，在强电场的作用下，各被 尾随电解质 前导电解质 分离组分在前导电解质与尾随 电解质之间的空隙中移动，实 ④ 现分离。 等速电泳示意图
第二节 常用电泳方法 五、等速电泳 采用两种不同浓度的电解质，一种为前导电解质， 充满整个毛细管柱；另一种为尾随电解质，置于一端 的电泳槽中。前导电解质的迁移率高于任何样品组分， 尾随电解质则低于任何样品组分，被分离的组分按其 不同的迁移率夹在中 间，在强电场的作用下，各被 分离组分在前导电解质与尾随 电解质之间的空隙中移动，实 现分离。 等速电泳示意图
第二节常用电泳方法 六、双向凝胶电泳（二维电泳） 第一向采用等电聚焦 根据复杂的蛋白质成分中 各个蛋白质的PI的不同，将蛋白质进行分离。 第二向采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶 电泳 (SDS-PAGE)就是按蛋 白质分子量的大小使其在垂直 方向进行分离。其结果不再是 条带状，而是呈现为斑点状。 双向凝胶电泳仪
第二节 常用电泳方法 六、双向凝胶电泳（二维电泳） 第一向采用等电聚焦 根据复杂的蛋白质成分中 各个蛋白质的PI的不同，将蛋白质进行分离。 第二向采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶 电泳 （SDS-PAGE）就是按蛋 白质分子量的大小使其在垂直 方向进行分离。其结果不再是 条带状，而是呈现为斑点状。 双向凝胶电泳仪