于展布，更容易浸入到灭菌的材料表面。但吐温加入后对材料的伤害也在增加，应注意吐温 的用量和灭菌时间，一般加入灭菌液的0.5%，即在100mL加入15滴。 最后一步是用无菌水漂洗，漂洗要求3min左右，视采用的消毒液种类，漂洗3~10次 左右。无菌水漂洗作用是免除消毒剂杀伤植物细胞的副作用
于展布，更容易浸入到灭菌的材料表面。但吐温加入后对材料的伤害也在增加，应注意吐温 的用量和灭菌时间，一般加入灭菌液的 0.5%，即在 100 mL 加入 15 滴。 最后一步是用无菌水漂洗，漂洗要求 3 min 左右，视采用的消毒液种类，漂洗 3～10 次 左右。无菌水漂洗作用是免除消毒剂杀伤植物细胞的副作用
延伸阅读3-2植物培养基成分 培养基犹如植物生长的土壤，是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地。培养基是 人工配制的，满足植物材料生长、繁殖或积累代谢产物的各类营养物质。在离体培养条件下， 不同种类植物对营养的要求不同，甚至同一种植物不同部位的组织以及不同培养阶段对营养 要求也不相同。筛选合适的培养基是植物组织培养极其重要的内容，是决定成败的关键因素 之一。大多数培养基的成分是由水、无机营养物、有机营养物质、生长调节物质和天然附加 物等五类物质组成。 ①水：一般用蒸馏水或去离子水配制培养基，煮沸过的自来水也可利用。 ②无机营养：无机营养包括大量和微量元素，对硝酸铵等用量较大的无机盐通常先按配 方表配成10倍的混合母液。植物必需的微量元素因用量小，常配成100倍或者1000倍的 母液。 ③有机营养：有机营养主要有糖、氨基酸和维生素。糖为培养物提供所需要的碳源，并 有调节渗透压的作用。常用的是2%~4%的蔗糖，有时也加入葡萄糖和果糖等。一般来说， 以蔗糖为碳源时，离体的双子叶植物的根长得较好，而以葡萄糖为碳源时，单子叶植物的根 长得较好。己知植物能够利用的其他形式的碳源有麦芽糖、半乳糖、甘露糖和乳糖，有的还 能利用淀粉。 维生素和氨基酸类的物质，主要有硫胺素（维生素B1)、吡哆素（维生素B6)、烟酸（维 生素B:)、泛酸（维生素B5)以及甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、肌醇和水解酪蛋白等。 ④天然附加物：培养时有时还加一些天然的有机物，如椰子乳、酵母提取物、玉米胚乳、 麦芽浸出物或番茄汁等。它们对愈伤组织的诱导和分化往往是有益的。 ⑤植物生长物质：常用的有生长素类和细胞分裂素两类。生长素类如2,4-D、萘乙酸、 BA、AA等被用于诱导细胞的分裂和根的分化。IAA易被光和酶氧化分解，所以加入的浓 度较高，常为130mg/L,NAA、2,4-D的浓度则以0.1~2mg/L为宜：细胞分裂素如激动 素、6苄基腺嘌呤、异戊烯基腺嘌呤、玉米素等可以促进细胞分裂和诱导愈伤组织或器官分 化不定芽。它们常用的浓度为0.01~1mgL。在初代培养中，一般都须加入激素类物质，但 随着继代培养次数的增加，加入量可逐代减少，最终常可做到“激素自养”。离体培养物的根 芽分化取决于生长素/细胞分裂素的比值（可参阅植物组织培养专业书刊）。吲哚乙酸以及酶 和维生素C等因在高温高压灭菌时易遭破坏，故使用时以过滤或抽滤灭菌为好。 培养基的配制方法有两种，一是直接称取法，即按照培养基的成分，逐一称取，溶解后
延伸阅读 3-2 植物培养基成分 培养基犹如植物生长的土壤，是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地。培养基是 人工配制的，满足植物材料生长、繁殖或积累代谢产物的各类营养物质。在离体培养条件下， 不同种类植物对营养的要求不同，甚至同一种植物不同部位的组织以及不同培养阶段对营养 要求也不相同。筛选合适的培养基是植物组织培养极其重要的内容，是决定成败的关键因素 之一。大多数培养基的成分是由水、无机营养物、有机营养物质、生长调节物质和天然附加 物等五类物质组成。 ①水：一般用蒸馏水或去离子水配制培养基，煮沸过的自来水也可利用。 ②无机营养：无机营养包括大量和微量元素，对硝酸铵等用量较大的无机盐通常先按配 方表配成 10 倍的混合母液。植物必需的微量元素因用量小，常配成 100 倍或者 1 000 倍的 母液。 ③有机营养：有机营养主要有糖、氨基酸和维生素。糖为培养物提供所需要的碳源，并 有调节渗透压的作用。常用的是 2％～4％的蔗糖，有时也加入葡萄糖和果糖等。一般来说， 以蔗糖为碳源时，离体的双子叶植物的根长得较好，而以葡萄糖为碳源时，单子叶植物的根 长得较好。已知植物能够利用的其他形式的碳源有麦芽糖、半乳糖、甘露糖和乳糖，有的还 能利用淀粉。 维生素和氨基酸类的物质，主要有硫胺素（维生素 B1）、吡哆素（维生素 B6）、烟酸（维 生素 B3）、泛酸（维生素 B5）以及甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、肌醇和水解酪蛋白等。 ④天然附加物：培养时有时还加一些天然的有机物，如椰子乳、酵母提取物、玉米胚乳、 麦芽浸出物或番茄汁等。它们对愈伤组织的诱导和分化往往是有益的。 ⑤植物生长物质：常用的有生长素类和细胞分裂素两类。生长素类如 2,4-D、萘乙酸、 IBA、IAA 等被用于诱导细胞的分裂和根的分化。IAA 易被光和酶氧化分解，所以加入的浓 度较高，常为 1～30 mg/L，NAA、2,4-D 的浓度则以 0.1～2 mg/L 为宜；细胞分裂素如激动 素、6-苄基腺嘌呤、异戊烯基腺嘌呤、玉米素等可以促进细胞分裂和诱导愈伤组织或器官分 化不定芽。它们常用的浓度为 0.01～1 mg/L。在初代培养中，一般都须加入激素类物质，但 随着继代培养次数的增加，加入量可逐代减少，最终常可做到“激素自养”。离体培养物的根 芽分化取决于生长素/细胞分裂素的比值（可参阅植物组织培养专业书刊）。吲哚乙酸以及酶 和维生素 C 等因在高温高压灭菌时易遭破坏，故使用时以过滤或抽滤灭菌为好。 培养基的配制方法有两种，一是直接称取法，即按照培养基的成分，逐一称取，溶解后