5影响盐析的因素 盐饱和度的影响:不同的蛋白质,其结构和性质不同, 盐析时所需的饱和度也就不同。 蛋白质浓度的影响:一般常将蛋白质浓度控制在 2~3%为宜。 pH的影响:进行盐析时的pH,要选择在被盐析 的蛋白质的pl附近。 温度的影响:蛋白质的盐析一般在室温下进行
5 影响盐析的因素 盐饱和度的影响:不同的蛋白质,其结构和性质不同, 盐析时所需的饱和度也就不同。 蛋白质浓度的影响:一般常将蛋白质浓度控制在 2~3%为宜。 pH的影响:进行盐析时的pH,要选择在被盐析 的蛋白质的pI附近。 温度的影响:蛋白质的盐析一般在室温下进行
四、盐析操作(以硫酸铵为例) 1.操作方式 盐析时,将盐加入到溶液中有两种方式: (1)加硫酸铵的饱和溶液 在实验室和小规模生产中溶液体积不大 时,或硫酸铵浓度不需太高时,可采用 这种方式。 2-S1 V=Vo 1-S2
四、盐析操作(以硫酸铵为例) 2 2 1 0 1 S S S V V − − = 盐析时,将盐加入到溶液中有两种方式: 在实验室和小规模生产中溶液体积不大 时,或硫酸铵浓度不需太高时,可采用 这种方式。 1. 操作方式 (1)加硫酸铵的饱和溶液
(2)直接加固体硫酸铵 在工业生产溶液体积较大时,或需要达 到较高的硫酸铵饱和度时,可采用这种 方式。为达到所需的饱和度,应加入固 体硫酸胺的量,可查表或由下式计算而 得: X、 G(S2-S1) 1-AS2
(2)直接加固体硫酸铵 2 2 1 1 AS G(S S ) X − − = 在工业生产溶液体积较大时,或需要达 到较高的硫酸铵饱和度时,可采用这种 方式。为达到所需的饱和度,应加入固 体硫酸胺的量,可查表或由下式计算而 得:
思考 ▣实验室用蒸骝水配制500l100%的饱和硫酸铵溶 液,需加硫酸铵多少克?配制溶液的摩尔浓度为 多少?
思 考 实验室用蒸馏水配制500ml 100%的饱和硫酸铵溶 液,需加硫酸铵多少克?配制溶液的摩尔浓度为 多少?
2.操作注意事顶 ()加固体硫酸铵时,必须注意表中的温度。 (2)分段盐析时,要考虑到每次分段后蛋白质 浓度的变化。 (3)盐析条件如pH、温度和硫酸铵的纯度都必须 严格控制。 (4)盐析后一般要放置0.5~1h。 (⑤)盐析过程中,搅拌必须规则和温和。 (6)反应至少应在50mmol/L缓冲溶液中进行
2. 操作注意事项 (1)加固体硫酸铵时,必须注意表中的温度。 (2)分段盐析时,要考虑到每次分段后蛋白质 浓度的变化。 (3) 盐析条件如pH、温度和硫酸铵的纯度都必须 严格控制。 (5) 盐析过程中,搅拌必须规则和温和。 (6) 反应至少应在50mmol/L缓冲溶液中进行。 (4) 盐析后一般要放置0.5~1h