4.2.3 盐析法 口1概念:是指利用蛋白质和酶等生物分子 在浓盐溶液中溶解度的差异,通过向处理 溶液中引入一定数量的中性盐,使不同溶 解度的生物分子先后凝聚而从溶液中析出, 从而达到分离目的的一种方法
4.2.3 盐析法 1 概念:是指利用蛋白质和酶等生物分子 在浓盐溶液中溶解度的差异,通过向处理 溶液中引入一定数量的中性盐,使不同溶 解度的生物分子先后凝聚而从溶液中析出, 从而达到分离目的的一种方法
2优缺点及应用领域 优点:盐析是一个可逆的过程,经济、安全、操 作简便、不易引起蛋白质变性、应用范围广等优 点 ▣缺点:盐析法分辨率不高,因此适合于生化物质 的粗提纯阶段,应和其它方法交替使用。 口 领域:常用于蛋白质、酶、多肽、多糖、核酸等 物质的分离纯化
2 优缺点及应用领域 优点:盐析是一个可逆的过程,经济、安全、操 作简便、不易引起蛋白质变性、应用范围广等优 点 缺点:盐析法分辨率不高,因此适合于生化物质 的粗提纯阶段,应和其它方法交替使用。 领域:常用于蛋白质、酶、多肽、多糖、核酸等 物质的分离纯化
H OH- OH- H+ 时<pl,带正电荷, 在等电点状态的蛋 pH>p以,带负电荷、 又有水膜,是稳定的 白质,水膜米脱,是 又有水膜,是稳定的 亲水胶体 不稳定的亲水胶体 亲水胶体 中性盐 中性盐 中性盐 破坏水膜 酸坏水膜 破坏水城 中性盐中和其电横 中性盐中和其电荷 S0i等 NH或Na+等 蛋白质沉淀 盐析沉淀的原理
盐析沉淀的原理
3 盐析法的原理 (蛋白质) 1)中性盐离子破坏蛋白质表面水膜 。 2)中性盐离子中和蛋白质表面电荷
3 盐析法的原理 (蛋白质) 1)中性盐离子破坏蛋白质表面水膜 。 2)中性盐离子中和蛋白质表面电荷
4盐析常用的盐 常用的盐析用盐主要有硫酸铵、硫酸镁、硫 酸钠、磷酸二氢钠等。实际应用中以硫酸铵 最为常用。 因为硫酸铵具有: ①盐析能力强。 ②溶解度大且受温度影响小。 ③不易使蛋白质变性。 ④价格低
4 盐析常用的盐 常用的盐析用盐主要有硫酸铵、硫酸镁、硫 酸钠、磷酸二氢钠等。实际应用中以硫酸铵 最为常用。 因为硫酸铵具有: ②溶解度大且受温度影响小。 ③不易使蛋白质变性。 ④价格低 ①盐析能力强