硅基质材料(树脂)纯化质粒DNA DNA分子中的磷酸二酯键骨架在盐溶液的作用下脱水,使 得暴露的磷酸基团吸附硅胶。双链DNA分子一旦被硅胶吸 附,一般的洗液不能将其洗脱下来,只有水溶性的缓冲液, 如TE或水重新水化后,DNA才能从层析柱上定量回收
6 硅基质材料(树脂）纯化质粒DNA DNA分子中的磷酸二酯键骨架在盐溶液的作用下脱水，使 得暴露的磷酸基团吸附硅胶。双链DNA分子一旦被硅胶吸 附，一般的洗液不能将其洗脱下来，只有水溶性的缓冲液， 如TE或水重新水化后，DNA才能从层析柱上定量回收
2.质粒DNA的限制性内切酶酶切 c-myc基因片段4.8kb BamH I+XbaI双酶切(酶切完全时) 琼脂糖凝胶电泳凝胶中2条区带 Sv-c-mvc 8.3kb 35 kb pSV2载体片段 Bamh I Xba l 48 Bkb c-myc目的基因片段 pSV2载体片段 3.5kb
7 2. 质粒DNA的限制性内切酶酶切 BamH I + Xba I双酶切（酶切完全时） 琼脂糖凝胶电泳凝胶中2条区带 3.5kb pSV2载体片段 4.8kb c-myc 目的基因片段 pSV-c-myc 8.3kb BamH I Xba I c-myc基因片段4.8 kb pSV2载体片段 3.5kb
3.琼脂糖凝胶电泳 琼脂糖——海藻中提取的线状高聚物 加热融化成清澈、透明的溶液 凝固后成凝胶
8 琼脂糖——海藻中提取的线状高聚物 加热融化成清澈、透明的溶液 凝固后成凝胶 3. 琼脂糖凝胶电泳
表51不同类型琼脂的慢质 瑯丽糖类型 凝结温度代 熔化温度/℃ 商品名 标准琼盟糖 low EEO 35~38 ShaKen LE (Bo Whittaker) 从 Gelidium app分离 groMe LE (USB) Low EEO Agrose(Stratagene) Molecular Biology Certified Grade 标准欢糖 low EEO 40~42 SeaKem hgt【 Bowhittakey) 从 gracilari分寫 Agrose HGT (USB) 高强度麻脂糖 Fastlane(Bio Whittaker) (Bio-Rad) 修饰的低烙点/凝点球脂糖 低熔点 25-35 35 65 NuSieve(BioWhittaker) 超低熔点 sPrep(BioWhittaker) 低黏性低爆点球脚糖 InCert(Biowhittaker) 38 NuSieve 3:1(BioWhittaker) 9
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