实验夕 大蒜细胞S0D的提取分 高与活性测定
实 验 六 大蒜细胞SOD酶的提取分 离与活性测定
在生命科学高度发展的今天,蛋白质 酶和核酸等生物大分子的结构与功能的 研究是探求生命奥秘的中心课题,而生 物大分子结构与功能的研究,必须首先 解决生物大分子的制备问题,有能够达 到足够纯度的生物大分子的制备工作为 前题,结构与功能的研究就无从谈起 然而生物大分子的分离纯化与制备是 件十分细致而困难的工作
在生命科学高度发展的今天，蛋白质、 酶和核酸等生物大分子的结构与功能的 研究是探求生命奥秘的中心课题，而生 物大分子结构与功能的研究，必须首先 解决生物大分子的制备问题，有能够达 到足够纯度的生物大分子的制备工作为 前题，结构与功能的研究就无从谈起。 然而生物大分子的分离纯化与制备是一 件十分细致而困难的工作
与化学产品的分离制备相比较,生物大分子的制 备有以下主要特点: (1)生物材料的组成极其复杂,常常包含有数百种 乃至几千种化合物。 2)许多生物大分子在生物材料中的含量极微,分 离纯化的步骤繁多,流程长 (3许多生物大分子一日离开了生物体内的环境时 就极易失活,因此分离过程中如何防止其失活,就 是生物大分子提取制备最困难之处 (4)生物大分子的制备几乎都是在溶液中进行的, 温度、pH值、离子强度等各种参数对溶液中各种 组成的综合影响,很难准确估计和判断。(影响因 素多)
◼ 与化学产品的分离制备相比较，生物大分子的制 备有以下主要特点： ◼ ⑴生物材料的组成极其复杂，常常包含有数百种 乃至几千种化合物。 ◼ ⑵许多生物大分子在生物材料中的含量极微，分 离纯化的步骤繁多，流程长。 ◼ ⑶许多生物大分子一旦离开了生物体内的环境时 就极易失活，因此分离过程中如何防止其失活，就 是生物大分子提取制备最困难之处。 ◼ ⑷生物大分子的制备几乎都是在溶液中进行的， 温度、pH值、离子强度等各种参数对溶液中各种 组成的综合影响，很难准确估计和判断。(影响因 素多 )
生物大分子的制备通常可按以下步骤进行 通过文献调研和预备性实验,掌握生物大分子目 的产物的物理化学性质。 口根据实验目的,建立相应的可靠的分析测定、及 制备方法,这是制备生物大分子的关键。 生物材料的破碎和预处理。 分离纯化方案的选择和探索,这是最困难的过 程 生物大分子制备物的均一性(即纯度)的鉴定 产物的浓缩,干燥和倮存
◼ 生物大分子的制备通常可按以下步骤进行： ◼ 通过文献调研和预备性实验，掌握生物大分子目 的产物的物理化学性质。 ◼ 根据实验目的，建立相应的可靠的分析测定、及 制备方法，这是制备生物大分子的关键。 生物材料的破碎和预处理。 分离纯化方案的选择和探索，这是最困难的过 程。 生物大分子制备物的均一性（即纯度）的鉴定。 产物的浓缩，干燥和保存
大蒜SO的提取及活性测定 试验目的: (1)掌握SOD酶的提取、分离、检测一般步骤 (2)了解酶在提取过程中的两个参数:回收率、纯 化倍数。 (3)掌握离心机的使用。 实验原理P64, 邻苯三酚在碱性条件下可迅速自氧化释放出O2生 成带色的中间产物,在420nm有最大吸收峰。邻苯 三酚自氧化产生的中间产物在40s-3min这段时间, 生成物与时间有较好的线性关系 颜色深→SOD逐渐增多→颜色浅,即酶活力越大, 颜色越浅
大蒜SOD的提取及活性测定 ◼ 试验目的： （1）掌握SOD酶的提取、分离、检测一般步骤。 （2）了解酶在提取过程中的两个参数：回收率、纯 化倍数。 （3）掌握离心机的使用。 ◼ 实验原理:P64, 邻苯三酚在碱性条件下可迅速自氧化,释放出O2 - ,生 成带色的中间产物,在420nm有最大吸收峰。邻苯 三酚自氧化产生的中间产物在40s-3min这段时间， 生成物与时间有较好的线性关系。 颜色深→SOD逐渐增多→颜色浅，即酶活力越大， 颜色越浅