实验室常用技术参数资料 核酸及蛋白质常用数据 1.核苷三磷酸的物理常数 1摩尔溶液(pH70)中λmax时的最大吸 合物 Amax(pH7.0) 收值 ATP 507 15400 CTP 483 9000 0.97 523 253 13700 UTP 15200 0.15 dCTP 467 271 9300 dGTP 507 253 13700 0.66 dTTP 267 9600 0.71 2.常用核酸的长度与分子量 核酸 核苷酸数 分子量 入DNA 48502(双链环状) 3.0×107 BR322 4363(双链) 28×10 28SrRNA 4800 23SrRNA 3700 12×10 8SrrNA 6.1×105 19SrRNA 1700 5SrRNA 36×104 tRNA(大肠杆菌) 2.5×104
实验室常用技术参数资料 一、核酸及蛋白质常用数据 1．核苷三磷酸的物理常数 化合物 分子 量 λmax(pH7.0) 1 摩尔溶液（pH7.0）中 λmax 时的最大吸 收值 OD280/OD260 ATP 507 259 15400 0.15 CTP 483 271 9000 0.97 GTP 523 253 13700 0.66 UTP 484 262 10000 0.38 dATP 494 259 15200 0.15 dCTP 467 271 9300 0.98 dGTP 507 253 13700 0.66 dTTP 482 267 9600 0.71 2．常用核酸的长度与分子量 核酸 核苷酸数 分子量 λDNA 48502（双链环状） 3.0×107 pBR322 4363（双链） 2.8×106 28SrRNA 4800 1.6×106 23SrRNA 3700 1.2×106 18SrRNA 1900 6.1×105 19SrRNA 1700 5.5×105 5SrRNA 120 3.6×104 tRNA（大肠杆菌） 75 2.5×104
3.常用核酸蛋白换算数据 (1)重量换算 g=10g (2)分光光度换算 1A260双链DNA=50ug/ml 1A260单链DNA=30pgml 1A26单链RNA=40pgml (3)DNA摩尔换算 lgg1 DObp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端 lug pBR322 DNA=0. 36pmol I pmol 1000bp DNA=0.66ug I pmol pBR322=2. 8ug lkb双链DNA(钠盐)=6.6×105道尔顿 lkb单链DNA(钠盐)=3.3×105道尔顿 lkb单链RNA(钠盐)=34×105道尔顿 (4)蛋白摩尔换算 l00pml分子量100,000蛋白质=10pg 100pmol分子量50,000蛋白质=5吗g
3．常用核酸蛋白换算数据 （1）重量换算 1μg=10-6 g 1pg=10-12g 1ng=10-9 g 1fg=10-15g （2）分光光度换算： 1A260 双链 DNA=50μg/ml 1A260 单链 DNA=30μg/ml 1A260 单链 RNA=40μg/ml （3）DNA 摩尔换算： 1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol 末端 1μg pBR322 DNA=0.36pmol 1pmol 1000bp DNA=0.66μg 1pmol pBR322=2.8μg 1kb 双链 DNA（钠盐）=6.6×105道尔顿 1kb 单链 DNA（钠盐）=3.3×105道尔顿 1kb 单链 RNA（钠盐）=3.4×105道尔顿 （4）蛋白摩尔换算： 100pmol 分子量 100，000 蛋白质=10μg 100pmol 分子量 50，000 蛋白质=5μg
100pmol分子量10,000蛋白质=1g 氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿 (5)蛋白质/DNA换算 lkb DNA=333个氨基酸编码容量=3.7×0MW蛋白质 10,000w蛋白质=270 bp dna 30,000W蛋白质=810 bp dNA 50,000MW蛋白质=1.35kb 100,000MW蛋白质=27 kb dNa 4.常用蛋白质分子量标准参照物 (1)高分子量标准参照 (2)中分子量标准参照 (3)低分子量标准参照 肌球蛋白 分子量 磷酸化酶B 门,400碳酸酐酶 肌球蛋白 212,000 牛血清白蛋白 66,200大豆腱蛋白酶21,500 B-半乳糖甘酶B16,000谷氨酶脱氢酶55,000抑制剂 磷酸化酶B 97,400 卵白蛋白 42,700马心肌球蛋白 16,900 牛血清白蛋白 6,200 醛缩酶 14,400 过氧化氢酶 57,000 碳酸酐酶 31,000肌球蛋白(F1) 8,100 醛缩酶 大豆睫蛋白酶 21,500肌球蛋白(F2)6,200 抑制剂 肌球蛋白(F3)2,500 溶菌酶 14,400
100pmol 分子量 10，000 蛋白质=1μg 氨基酸的平均分子量=126.7 道尔顿 （5）蛋白质/DNA 换算： 1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW 蛋白质 10，000MW 蛋白质=270bp DNA 30，000MW 蛋白质=810bp DNA 50，000MW 蛋白质=1.35kb 100，000MW 蛋白质=2.7kb DNA 4．常用蛋白质分子量标准参照物 （1）高分子量标准参照 （2）中分子量标准参照 （3）低分子量标准参照 肌球蛋白 分子量 磷酸化酶 B 97，400 碳酸酐酶 31，00 肌球蛋白 212，000 牛血清白蛋白 66，200 大豆脻蛋白酶 21，500 β-半乳糖甘酶 B 116，000 谷氨酶脱氢酶 55，000 抑制剂 磷酸化酶 B 97，400 卵白蛋白 42，700 马心肌球蛋白 16，900 牛血清白蛋白 66，200 醛缩酶 40，000 溶菌酶 14，400 过氧化氢酶` 57，000 碳酸酐酶 31，000 肌球蛋白（F1） 8，100 醛缩酶 40，000 大豆脻蛋白酶 21，500 肌球蛋白（F2） 6，200 抑制剂 肌球蛋白（F3） 2，500 溶菌酶 14，400
5.常用DNA分子量标准参照物 ADNA/HindIll 入 DNA/ECOR I Hind+EcoR I BR322/Haelll 2313 21227 587 655 5804 4361 5643 4268 3530 3530 2027 267 1584 213 1375 125 BR322/Hinf I oy174/Hinf I 174HaeⅢl x174/Tap I 1631 726 140 1353 713 l18 1078 872 327 413 3l1
5．常用 DNA 分子量标准参照物 λDNA/HindⅢ λDNA/EcoRⅠ λ/HindⅢ+EcoRⅠ pBR322/HaeⅢ 23130 21226 21227 587 123 9416 7421 5148 405 104 6557 5804 4973 504 89 4361 5643 4268 458 80 2322 4843 3530 434 64 2027 3530 2027 267 57 564 1904 234 51 125 1584 213 21 1375 192 18 974 184 11 831 124 7 564 125 续上表 pBR322/HinfⅠ φχ174/HinfⅠ φχ174/Hae Ⅲ φχ174/TapⅠ 1631 726 140 1353 2914 517 713 118 1078 1175 506 553 100 872 404 396 500 82 603 327 344 417 66 310 231 298 413 48 281 141 221 311 42 271 87
、常用缓冲液 1.分子克隆常用缓冲液 磷酸缓冲 (1)25℃下0.1moL磷酸钾缓冲液的配制 molL KHPOa(ml) I molL KH2PO4(m 91.5 13.2 19.2 27 619 49.7 2 71.7 80.2 90.8
220 249 40 234 54 154 200 24 194 33 75 151 118 20 72 二、常用缓冲液 1．分子克隆常用缓冲液 2．磷酸缓冲液 （1）25℃下 0.1mol/L 磷酸钾缓冲液的配制※ pH 1mol/L K2HPO4(ml) 1mol/L KH2PO4(ml) 5.8 8.5 91.5 6.0 13.2 86.8 6.2 19.2 80.8 6.4 27.8 72.2 6.6 38.1 61.9 6.8 49.7 50.3 7.0 61.5 38.5 7.2 71.7 28.3 7.4 80.2 19.8 7.6 86.6 13.4 7.8 90.8 9.2 8.0 94.0 6.2