82凝胶色谱 821高效液相色谱 (3)离子交换色谱 通常是用离子交换树脂作为固定相。一般是样品离子与固 定相离子进行可逆交换。由于各组分离子的交换能力不同,从 而达到色谱分离。 离子交换色谱广泛用于氨基酸、蛋白质的分析,也适用于 某些无机物的分离和分析。 (4)凝胶色谱法 凝胶色谱法的固定相采用凝胶状多孔性填充剂,是根据样 品中各种分子流体力学体积的不同来进行分离的 16
16 8.2 凝胶色谱 ❖ 8.2.1 高效液相色谱 (3) 离子交换色谱 通常是用离子交换树脂作为固定相。一般是样品离子与固 定相离子进行可逆交换。由于各组分离子的交换能力不同，从 而达到色谱分离。 离子交换色谱广泛用于氨基酸、蛋白质的分析，也适用于 某些无机物的分离和分析。 (4) 凝胶色谱法 凝胶色谱法的固定相采用凝胶状多孔性填充剂，是根据样 品中各种分子流体力学体积的不同来进行分离的
82凝胶色谱 821高效液相色谱 比凝胶孔径大的分子完全不能进入孔内,随流动相沿凝 胶颗粒间流出柱外,而较小的分子则可或多或少地进入孔内。 因此大分子流程短,保留值小;小分子流程长,保留值大。 凝胶色谱的特点是样品的保留体积不会超出色谱柱中溶剂的 总量,因而保留值的范围是可以推测的,这样可以每隔一定 时间连续进样而不会造成谱峰的重叠,提高了仪器的使用率。 当然伴随着的缺点是柱容量较小。常用的凝胶如表8-3所示。 17
17 8.2 凝胶色谱 ❖ 8.2.1 高效液相色谱 比凝胶孔径大的分子完全不能进入孔内，随流动相沿凝 胶颗粒间流出柱外，而较小的分子则可或多或少地进入孔内。 因此大分子流程短，保留值小；小分子流程长，保留值大。 凝胶色谱的特点是样品的保留体积不会超出色谱柱中溶剂的 总量，因而保留值的范围是可以推测的，这样可以每隔一定 时间连续进样而不会造成谱峰的重叠，提高了仪器的使用率。 当然伴随着的缺点是柱容量较小。常用的凝胶如表8-3所示
82凝胶色谱 821高效液相色谱 表8-3凝胶色谱固定相分类 凝胶类型 凝胶名称 耐压性 流动相 软质 交联葡聚糖凝胶 水 有机胶 交联聚丙烯酰胺凝胶 常压 半硬质 有机胶 高交联聚苯乙烯 较高压 有机溶剂 硬质 多孔硅胶 无机胶 多孔玻珠 高压 凝胶色谱还有一些其它的名称 如排除色谱( exclusion chromatography), 凝胶过滤色谱( gel filtration chromatography), 凝胶渗透色谱( gel permeation chromatography,GPC。18
18 8.2 凝胶色谱 ❖ 8.2.1 高效液相色谱 凝胶色谱还有一些其它的名称， 如排除色谱(exclusion chromatography)， 凝胶过滤色谱(gel filtration chromatography)， 凝胶渗透色谱(gel permeation chromatography，GPC)
82凝胶色谱 821高效液相色谱 聚苯乙稀类、凝胶 不溶于水 凝胶渗透色谱 多孔玻璃 多孔硅胶 2000 溶于水 葡聚糖凝胶 凝胶过滤色谱 聚丙烯既胺凝胶 多孔玻璃 凝胶过滤色谱葡聚糖凝胶(小孔) 多孔性强碱阴离子树脂 酸性物→阴离子交换剂 分子意范围 溶于水「高子交换色谐 强碱性薄膜离子交换剂 多孔性强酸阳高子交换剂 碱性物→阳离子交换刑 强酸性薄膜离子交换剂 「分配色谱}一水/异辛烷/乙醇(含水固定相 <2000 表8-4凝胶色谱方法选择 19
19 8.2 凝胶色谱 ❖ 8.2.1 高效液相色谱 表8-4 凝胶色谱方法选择
82凝胶色谱 821高效液相色谱 分子量范围 [凝胶渗选色谱上一兼乙烯二乙婚苯共聚凝胶 不溶 多孔硅胶 k200于水异构体分离及一[吸附色谱}硅胶 稳足化合物 膜氧化铝珠 R,氧二丙腈/已烷 极性物 化学键合醚/环 不同类型化合物 〔正相分配)戊烷异丙醇 分配色谱 同系类、不稳定 乙二醇/庚烷 化合物 角鲨烷/水-甲醇 非极性物 化学键合十八碳 (反相分配)烷/水异丙醇 聚烃/水-乙腈 表8-4凝胶色谱方法选择 20
20 8.2 凝胶色谱 ❖ 8.2.1 高效液相色谱 表8-4 凝胶色谱方法选择