81概述 4814分子量分布的一般测定方法 (2)利用高聚物的溶解度与其分子量之间的依赖关系进行 分级。这是实验室中采用的比较方便的一种方法。在高分子溶 液中缓缓加入沉淀剂或逐步降低温度),大分子量的高聚物首 先析出,因此可分步加入沉淀剂使其分相。当达到平衡时,把 沉淀分离出来,再继续向溶液中加入沉淀剂,就可达到对高聚 物进行分级的目的。当然,也可采用逆过程即溶解分级或升温 分级来完成这一过程。 (3)上述两类方法操作繁琐也费时,实际上得到的数据都 是离散性数据,因此当前最好的方法是利用高分子流体力学体 积的不同测定分子量分布,即凝胶色谱法
11 8.1 概述 ❖ 8.1.4 分子量分布的一般测定方法 (2) 利用高聚物的溶解度与其分子量之间的依赖关系进行 分级。这是实验室中采用的比较方便的一种方法。在高分子溶 液中缓缓加入沉淀剂(或逐步降低温度)，大分子量的高聚物首 先析出，因此可分步加入沉淀剂使其分相。当达到平衡时，把 沉淀分离出来，再继续向溶液中加入沉淀剂，就可达到对高聚 物进行分级的目的。当然，也可采用逆过程即溶解分级或升温 分级来完成这一过程。 (3) 上述两类方法操作繁琐也费时，实际上得到的数据都 是离散性数据，因此当前最好的方法是利用高分子流体力学体 积的不同测定分子量分布，即凝胶色谱法
82凝胶色谱 821高效液相色谱 由第4章可知,用液体作为流动相的色谱称为液相色谱。经 典液相色谱不仅分离效率低、分析速度慢,而且操作也复杂。 到20世纪60年代,发展了粒度小于10um的高效固定相, 并使用了高压输液泵和自动记录的检测器,大大提高了液相 色谱的工作效率,这就是高效液相色谱( high performance liquid chromatography),也称高压液相色谱 (high pressure liquid chromatography, HPLC) 12
12 8.2 凝胶色谱 ❖ 8.2.1 高效液相色谱 由第4章可知，用液体作为流动相的色谱称为液相色谱。经 典液相色谱不仅分离效率低、分析速度慢，而且操作也复杂。 到20世纪60年代，发展了粒度小于10m的高效固定相， 并使用了高压输液泵和自动记录的检测器，大大提高了液相 色谱的工作效率，这就是高效液相色谱(high performance liquid chromatography)，也称高压液相色谱(high pressure liquid chromatography，HPLC)
82凝胶色谱 821高效液相色谱 液相色谱按其分离机理可分为4种类型,如图8-5所示。 (1)吸附色谱法 吸附色谱法的固定相为吸附剂, 界面卡定相 色谱分离过程是在吸附剂表面进 → 质 子动相 行的。与气相色谱不同,流动相 吸附 分配转移后的 (即溶剂)分子也与吸附剂表面发生 溶质分子 固定电荷 吸附作用。流动相的选择对分离 效果有很大的影响,一般采用梯 度淋洗来提高色谱分离效率。 了对离子 离子交换 排阻 图8-5液相色谱中几种分离类型图解13
13 8.2 凝胶色谱 ❖ 8.2.1 高效液相色谱 液相色谱按其分离机理可分为4种类型，如图8-5所示。 (1) 吸附色谱法 吸附色谱法的固定相为吸附剂， 色谱分离过程是在吸附剂表面进 行的。与气相色谱不同，流动相 (即溶剂)分子也与吸附剂表面发生 吸附作用。流动相的选择对分离 效果有很大的影响，一般采用梯 度淋洗来提高色谱分离效率
82凝胶色谱 821高效液相色谱 (2)分配色谱法 这种色谱法的流动相和固定相都是液体,样品分子在两个 液相之间很快达到平衡分配,利用各组分在两相中分配系数的 差异进行分离。故此法与萃取过程有些类同。 采用与GC中同样的方法,将固定液涂渍在多孔的载体表面 (但在使用中固定液易流失)。目前应用越来越广的是键合固定 相。在这种固定相中,固定液不是涂在载体表面,而是通过化 学反应在纯硅胶颗粒表面键合上某种有机基团。例如,利用氯 代十八烷基硅烷与硅胶表面OH基的反应就可以形成一烷基化 表面。硅胶表面的OH基团用SOH表示,反应如下 14
14 8.2 凝胶色谱 ❖ 8.2.1 高效液相色谱 (2) 分配色谱法 这种色谱法的流动相和固定相都是液体，样品分子在两个 液相之间很快达到平衡分配，利用各组分在两相中分配系数的 差异进行分离。故此法与萃取过程有些类同。 采用与GC中同样的方法，将固定液涂渍在多孔的载体表面 (但在使用中固定液易流失)。目前应用越来越广的是键合固定 相。在这种固定相中，固定液不是涂在载体表面，而是通过化 学反应在纯硅胶颗粒表面键合上某种有机基团。例如，利用氯 代十八烷基硅烷与硅胶表面OH基的反应就可以形成一烷基化 表面。硅胶表面的OH基团用SiOH表示，反应如下：
82凝胶色谱 821高效液相色谱 R R SiOH+CI-Si-R- Si(-Si--R R 这种固定液的优点是不易被流动相剥蚀。在分配色谱法 中,流动相可为纯溶剂,也可采用混合溶剂或进行梯度淋洗, 其极性应与固定液差别大,避免两者之间相溶。通常可分为 正相分配和反相分配,如表8-2所示。 表82分配色谱的分配类型 分配类型 流动相 固定相 被分析样品 正相分配 非极性 极性 极性 反相分配 极性 非极性 非极性 在反相分配中,流动相通常用水 15
15 8.2 凝胶色谱 ❖ 8.2.1 高效液相色谱 这种固定液的优点是不易被流动相剥蚀。在分配色谱法 中，流动相可为纯溶剂，也可采用混合溶剂或进行梯度淋洗， 其极性应与固定液差别大，避免两者之间相溶。通常可分为 正相分配和反相分配，如表8-2所示