第三部分补体及C反应蛋白测定一、总补体活性的测定(溶血实验):原理:溶血素(抗体)十绵羊红细胞(抗原)>抗原-抗体复合物→补体活化→绵羊红细胞溶解方法:CH5O操作程序表2单位2%CH50相应总补巴比妥缓1:20稀释溶血素体值(U/ml)冲液(ml)SRBC血清(ml)10.50.52000.101.4020.151.350.50.513330.50.51000.201.3040.50.5800.251.2550.301.200.50.566.760.350.51.150.557.17500.401.100.50.580.50.50.451.0544.490.50.5400.501.00100.50.51.50-
第三部分 补体及C反应蛋白测定 一、总补体活性的测定(溶血实验): 原理:溶血素(抗体)+绵羊红细胞 (抗原) →抗原-抗 体复合物→补体活化→绵羊红细胞溶解 方法:
HemolysisNohemolysis
结果计算:50%溶血最小稀释血清量(ml)测定管血清用量×50%溶血标准管OD值测定管OD值(与50%溶血管接近者)血清中补体含量(u/ml)X稀释倍数50%溶血最小稀释血清量
结果计算: 50%溶血最小稀释血清量(ml) = 血清中补体含量(u/ml) = 稀释倍数 测定管血清用量50%溶血标准管OD值 测定管OD值(与50%溶血管接近者) 50%溶血最小稀释血清量
参考值:30~40U/ml临床意义:1.CH50+一一念急、慢性肾小球肾炎、系统性红斑狼疮、自身免疫性溶血性贫血等2.CH50个急性炎症、恶性肿瘤
参考值:30 ~40 U/ml 临床意义: 1. CH50↓—— 急、慢性肾小球肾炎、系统性红斑 狼疮、自身免疫性溶血性贫血等 2. CH50↑—— 急性炎症、恶性肿瘤
二、C3测定方法:(同CRP)1单向扩散法2免疫比浊法:标准:标准血清(+PEG-NaF溶液)稀释>十抗人C3血清→孵育→测OD492值→>制标准曲线待测:血清(+PEG-NaF)稀释>十抗人C3血清孵育→测OD492值→根据标准曲线求C3含量参考值:1.14±0.27g/L临床意义:C3含量降低,常见于反复感染,急性肾小球肾炎、免疫复合物病和膜增生性肾小球肾炎
二、C3测定 方法: 1 单向扩散法(同CRP) 2 免疫比浊法: 标准: 标准血清(+PEG-NaF溶液)稀释 → +抗人 C3血清 →孵育→测OD492值→制标准曲线 待测: 血清( +PEG-NaF)稀释 → +抗人C3血清 → 孵育→测OD492值 → 根据标准曲线求C3含量 参考值:1.14±0.27g/L 临床意义:C3含量降低,常见于反复感染,急性肾 小球肾炎、免疫复合物病和膜增生性肾小球肾炎