学习醋酸纤维薄膜电泳的操作,了解电泳技术的一般原理。2、实验主要内容[1] 浸泡。[2]点样。[3] 电泳。[4]染色。[5] 漂洗。3、实验仪器设备醋酸纤维薄膜,常压电泳仪,点样器,玻璃板,镊子,培养皿等。实验6、酶的特性1、实验目的要求加深对酶的性质的认识。2、实验主要内容[1]温度对酶活力的影响。[2] pH对酶活力的影响。[3] 酶的激活剂与抑制剂。[4] 酶的专一性。3、实验仪器设备[]试剂:2%蔗糖:1%淀粉溶液(含0.3%氯化钠):本乃狄(Benedict)试剂。5%三氯醋酸溶液;1mmol/L苯甲胖溶液:1%酪蛋白溶液:0.1mol/L硼酸缓冲液[2]材料:唾液淀粉酶溶液;蔗糖酶溶液:胰蛋白酶溶液。[3]仪器试管1.5×15cm(×19):移液管1mL(×7),2mL(×3),5mL(×5):量筒100mL(×1),恒温水浴:冰浴(0℃):白瓷板:胶头滴管:实验7、维生素C的定量测定1、实验目的要求[1]学习维生素C定量测定法的原理和方法。[2]进一步熟悉、掌握微量滴定法的基本操作技术。2、实验主要内容[]制备样品。[2] 滴定。[3] 计算结果。3、实验仪器设备微量滴定管,漏斗,容量瓶,天平等。实验8、总糖的测定一葱酮比色法1、实验目的要求[1]学习蕙酮比色定糖法的原理和方法。[2]学习721分光光度计的原理和操作方法。2、实验主要内容[]制作标准曲线。[2]测定样品的含糖量。[3] 计算。3、实验仪器设备-11-
- 11 - 学习醋酸纤维薄膜电泳的操作,了解电泳技术的一般原理。 2、实验主要内容 [1] 浸泡。 [2] 点样。 [3] 电泳。 [4] 染色。 [5] 漂洗。 3、实验仪器设备 醋酸纤维薄膜,常压电泳仪,点样器,玻璃板,镊子,培养皿等。 实验 6、酶的特性 1、实验目的要求 加深对酶的性质的认识。 2、实验主要内容 [1] 温度对酶活力的影响。 [2] pH 对酶活力的影响。 [3] 酶的激活剂与抑制剂。 [4] 酶的专一性。 3、实验仪器设备 [1] 试剂:2%蔗糖;1%淀粉溶液(含 0.3%氯化钠);本乃狄(Benedict)试剂。5%三氯醋酸溶液; 1mmol/L 苯甲脒溶液;1%酪蛋白溶液;0.1mol/L 硼酸缓冲液 [2] 材料:唾液淀粉酶溶液;蔗糖酶溶液;胰蛋白酶溶液。 [3] 仪器 试管 1.5×15cm(×19);移液管 1mL(×7),2mL(×3),5mL(×5);量筒 100mL(×1), 恒温水浴;冰浴(0℃);白瓷板;胶头滴管; 实验 7、维生素 C 的定量测定 1、实验目的要求 [1] 学习维生素 C 定量测定法的原理和方法。 [2] 进一步熟悉、掌握微量滴定法的基本操作技术。 2、实验主要内容 [1] 制备样品。 [2] 滴定。 [3] 计算结果。 3、实验仪器设备 微量滴定管,漏斗,容量瓶,天平等。 实验 8、总糖的测定-蒽酮比色法 1、实验目的要求 [1] 学习蒽酮比色定糖法的原理和方法。 [2] 学习 721 分光光度计的原理和操作方法。 2、实验主要内容 [1] 制作标准曲线。 [2] 测定样品的含糖量。 [3] 计算。 3、实验仪器设备
721分光光度计,水浴锅等实验9、粗脂肪的提取及定量测定1、实验目的要求[]]学习和掌握索氏提取器提取脂肪的原理和方法。[2]学习和掌握用重量分析法对粗脂肪进行定量测定。2、实验主要内容[1]样品处理[2] 抽提[3] 计算3、实验仪器设备索氏提取器(50mL):分析天平:烘箱:电加热板:脱脂滤纸:脱脂棉:镀子。实验10、醇母核糖核酸的分高及组分鉴定1、实验目的要求[1]了解并掌握稀碱法提取RNA的原理和方法。[2]了解核酸的组分并掌握其鉴定方法。2、实验主要内容[]酵母RNA提取[2] RNA组份鉴定3、实验仪器设备移液管,量筒:滴管:水浴锅:离心机等。实验11、醋酸纤维薄膜电泳分高和核苷酸1、实验目的要求[1]学习核糖核酸碱水解的原理和方法。[2] 掌握核糖核苷酸的醋酸纤维薄膜电泳的原理和方法。2、实验主要内容[]RNA的碱水解。[2] 点样。[3]电泳。[4]观察,记录并分析。3、实验仪器设备点样器:水浴锅:离心机,电泳仪,电泳槽,紫外分析灯等。实验12、脂肪酸的β一氧化1、实验目的要求了解脂肪酸的β-氧化作用。2、实验主要内容[1] 肝糜制备。[2]恒温水浴保温。[3]沉淀蛋白质。[4]酮体的测定。[5] 计算。3、实验仪器设备滴定管:水浴锅:漏斗,剪刀,镊子,锥形瓶等。【成绩考核方式】- 12 -
- 12 - 721 分光光度计,水浴锅等 实验 9、粗脂肪的提取及定量测定 1、实验目的要求 [1] 学习和掌握索氏提取器提取脂肪的原理和方法。 [2] 学习和掌握用重量分析法对粗脂肪进行定量测定。 2、实验主要内容 [1] 样品处理 [2] 抽提 [3] 计算 3、实验仪器设备 索氏提取器(50mL); 分析天平;烘箱;电加热板;脱脂滤纸;脱脂棉;镊子。 实验 10、酵母核糖核酸的分离及组分鉴定 1、实验目的要求 [1] 了解并掌握稀碱法提取 RNA 的原理和方法。 [2] 了解核酸的组分并掌握其鉴定方法。 2、实验主要内容 [1] 酵母 RNA 提取 [2] RNA 组份鉴定 3、实验仪器设备 移液管; 量筒; 滴管;水浴锅;离心机等。 实验 11、醋酸纤维薄膜电泳分离和核苷酸 1、实验目的要求 [1] 学习核糖核酸碱水解的原理和方法。 [2] 掌握核糖核苷酸的醋酸纤维薄膜电泳的原理和方法。 2、实验主要内容 [1] RNA 的碱水解。 [2] 点样。 [3] 电泳。 [4] 观察,记录并分析。 3、实验仪器设备 点样器;水浴锅;离心机,电泳仪,电泳槽,紫外分析灯等。 实验 12、脂肪酸的 β-氧化 1、实验目的要求 了解脂肪酸的 β-氧化作用。 2、实验主要内容 [1] 肝糜制备。 [2] 恒温水浴保温。 [3] 沉淀蛋白质。 [4] 酮体的测定。 [5] 计算。 3、实验仪器设备 滴定管;水浴锅;漏斗,剪刀,镊子,锥形瓶等。 【成绩考核方式】
实验成绩评定的内容包括实验操作、完成实验报告的情况(数量和质量)、考勤、预习与课堂提问以及交流讨论。对迟交实验报告者,按规定扣分:对抄装实验报告者,除给予批评教育外,以缺交实验报告论处。缺交实验报告达全学期实验报告量的四分之一以上者,或实验课考勤无故旷课达3次以上者(含3次),取消其考试资格。【教材与参考书目】指定教材:王秀奇,秦淑媛,高天慧等编,《基础生物化学实验》第二版,高等教育出版社,1999,6。参考书目:1、郑集等主编,《生物化学》,高等教育出版社,第三版。2、聂剑初等主编,《生物化学简明教程》,高等教育出版社,第二版。3、王镜岩等主编,《生物化学》上、下册,高等教育出版社,第三版,4、Garrt,《生物化学》(影印版),高等教育出版社,第二版。5、陈钧辉,陶力,李俊等编,《生物化学实验》第三版,科学出版社,2003,4。(编制:刘霞/审核:张向前)-13 -
- 13 - 实验成绩评定的内容包括实验操作、完成实验报告的情况(数量和质量)、考勤、预习与课堂提问以及交流 讨论。对迟交实验报告者,按规定扣分;对抄袭实验报告者,除给予批评教育外,以缺交实验报告论处。缺交实 验报告达全学期实验报告量的四分之一以上者,或实验课考勤无故旷课达 3 次以上者(含 3 次),取消其考试资 格。 【教材与参考书目】 指定教材: 王秀奇,秦淑媛,高天慧等编,《基础生物化学实验》第二版,高等教育出版社,1999,6。 参考书目: 1、郑集等主编,《生物化学》,高等教育出版社,第三版。 2、聂剑初等主编,《生物化学简明教程》,高等教育出版社,第二版。 3、王镜岩等主编,《生物化学》上、下册,高等教育出版社,第三版。 4、Garrtt,《生物化学》(影印版),高等教育出版社,第二版。 5、陈钧辉,陶力,李俊等编,《生物化学实验》第三版,科学出版社,2003,4。 ( 编制:刘霞 / 审核: 张向前 )
3、《微生物学》实验教学大纲【课程名称】微生物学(Microbiology)【课程编码】SWZX0120【适用专业】生物技术【课时】136学时【学分】1.0【实验教学时间安排】序课时实验名称实验类型备注号13设计培养基的配制、灭菌以及环境中徽生物的检测演示+指导学生实验(综合)环境、土壤以及人体内外微生物的分离、纯化与接种2设计3演示+指导学生实验(综合)培养33显微镜的使用、细菌的单染色及革兰氏染色验证演示+指导学生实验43验证细菌特殊结构观察及显微测微技术演示+指导学生实验3验证演示+指导学生实验放线菌、霉菌形态观察6验证3酵母菌形态观察及显微计数技术演示+指导学生实验7细菌鉴定中常用的生理生化反应验证3演示+指导学生实验8设计3演示+指导学生实验(综合)噬菌体的分离与纯化9验证3环境因素对微生物的影响演示+指导学生实验10设计3水质的细菌学检测演示+指导学生实验(综合)11设计3实验技能综合测试(I)指导学生实验(综合)12设计3实验技能综合测试(II)指导学生实验(综合)36合计【教学(实验)内容要点】实验一培养基的配制、灭菌以及环境中微生物的检测1、实验目的要求(1)掌握培养基的配置的一般方法与步骤、高压灭菌法,了解灭菌原理及操作步骤(2)通过检测环境中的微生物,建立无菌概念。(3)学习平板的接种、培养法。(4)已知菌的培养,识别四大类微生物的菌落特征。2、实验主要内容(1)培养基制备(肉膏蛋白陈培养基)。(2)高压蒸汽灭菌。(3)平板接种与培养。(4)培养物、菌落的观察:细菌(大肠杆菌、枯草杆菌、金黄葡萄球菌):真菌(酿酒酵母、热带假丝酵母、青霉、黑曲霉):放线菌:灰色链霉菌。(5)初步判断未知菌的类别3、实验仪器设备(1)电炉、铝锅、天平、药品、酸度计、菌落计数仪等等,纱布、棉花。(2)高压灭菌锅(立式或手提式)、隔水式培养箱(25℃、30℃、37℃)、显微摄影仪、干燥箱、紫外灯、超净工作台、消毒设备等等。实验二环境、土壤以及人体内外微生物的分离、纯化与接种培养-14 -
- 14 - 3、《微生物学》实验教学大纲 【课程名称】 微生物学(Microbiology) 【课程编码】 SWZX0120 【适用专业】 生物技术 【课 时】 36 学时 【学 分】 1.0 【实验教学时间安排】 序 号 实验名称 实验类型 课时 备注 1 培养基的配制、灭菌以及环境中微生物的检测 设计 3 演示+指导学生实验(综合) 2 环境、土壤以及人体内外微生物的分离、纯化与接种 培养 设计 3 演示+指导学生实验(综合) 3 显微镜的使用、细菌的单染色及革兰氏染色 验证 3 演示+指导学生实验 4 细菌特殊结构观察及显微测微技术 验证 3 演示+指导学生实验 5 放线菌、霉菌形态观察 验证 3 演示+指导学生实验 6 酵母菌形态观察及显微计数技术 验证 3 演示+指导学生实验 7 细菌鉴定中常用的生理生化反应 验证 3 演示+指导学生实验 8 噬菌体的分离与纯化 设计 3 演示+指导学生实验(综合) 9 环境因素对微生物的影响 验证 3 演示+指导学生实验 10 水质的细菌学检测 设计 3 演示+指导学生实验(综合) 11 实验技能综合测试(Ⅰ) 设计 3 指导学生实验(综合) 12 实验技能综合测试(Ⅱ) 设计 3 指导学生实验(综合) 合 计 36 【教学(实验)内容要点】 实验一 培养基的配制、灭菌以及环境中微生物的检测 1、实验目的要求 ⑴ 掌握培养基的配置的一般方法与步骤、高压灭菌法,了解灭菌原理及操作步骤 ⑵ 通过检测环境中的微生物,建立无菌概念。 ⑶ 学习平板的接种、培养法。 ⑷ 已知菌的培养,识别四大类微生物的菌落特征。 2、实验主要内容 ⑴ 培养基制备(肉膏蛋白胨培养基)。 ⑵ 高压蒸汽灭菌。 ⑶ 平板接种与培养。 ⑷ 培养物、菌落的观察:细菌(大肠杆菌、枯草杆菌、金黄葡萄球菌);真菌(酿酒酵母、热带假丝酵母、 青霉、黑曲霉);放线菌;灰色链霉菌。 ⑸ 初步判断未知菌的类别 3、实验仪器设备 ⑴ 电炉、铝锅、天平、药品、酸度计、菌落计数仪等等,纱布、棉花。 ⑵ 高压灭菌锅(立式或手提式)、隔水式培养箱(25℃、30℃、37℃)、显微摄影仪、干燥箱、紫外灯、超 净工作台、消毒设备等等。 实验二 环境、土壤以及人体内外微生物的分离、纯化与接种培养
1、实验目的要求(1)掌握微生物分离、纯化的基本方法。(2)掌握无菌操作的基本方法。2、实验主要内容(1)学习倾倒平板的基本方法。(2)掌握划线分离、稀释分离的基本方法和操作要点。(3)掌握平板培养的基本方法。3、实验仪器设备(1)超净工作台。(2)培养箱、冰箱。实验三显微镜的使用、细菌的单染色及革兰氏染色1、实验目的要求(1)掌握显微镜油镜头的使用方法。(2)细菌的制片技术。(3)细菌的单染、复染色技术。2、实验主要内容(1)显微镜油镜头的使用。(2)学习细菌制片技术。(3)细菌染色(单染色法(美兰)、复染色法(革兰氏染色))与观察。3、实验仪器设备(1)显微镜(倒置、荧光等)、。(2)超净工作台等。实验四细菌特殊结构观察及显微测微技术1、实验目的要求(1)掌握细菌芽孢、鞭毛以及荚膜的染色方法。(2)观察细菌三种特殊结构的形态。(3)掌握显微镜测微尺的使用方法。2、实验主要内容(1)细菌芽孢、鞭毛以及荚膜的染色方法。(2)镜下观察细菌三种特殊结构的形态。(3)用显微镜测微尺测量微生物的大小。3、实验仪器设备(1)显微镜(倒置、荧光等)、。(2)显微镜测微尺等。实验五放线菌、馨菌形态观察1、实验目的要求(1)掌握放线菌以及霉菌水浸片的制作方法。(2)显微镜下观察放线菌、霉菌的基本形态。2、实验主要内容(1)制作放线菌以及霉菌水浸片。(2)显微镜下观察形态。3、实验仪器设备(1)显微镜等。-15 -
- 15 - 1、实验目的要求 ⑴ 掌握微生物分离、纯化的基本方法。 ⑵ 掌握无菌操作的基本方法。 2、实验主要内容 ⑴ 学习倾倒平板的基本方法。 ⑵ 掌握划线分离、稀释分离的基本方法和操作要点。 ⑶ 掌握平板培养的基本方法。 3、实验仪器设备 ⑴ 超净工作台。 ⑵ 培养箱、冰箱。 实验三 显微镜的使用、细菌的单染色及革兰氏染色 1、实验目的要求 ⑴ 掌握显微镜油镜头的使用方法。 ⑵ 细菌的制片技术。 ⑶ 细菌的单染、复染色技术。 2、实验主要内容 ⑴ 显微镜油镜头的使用。 ⑵ 学习细菌制片技术。 ⑶ 细菌染色{单染色法(美兰)、复染色法(革兰氏染色)}与观察。 3、实验仪器设备 ⑴ 显微镜(倒置、荧光等)、。 ⑵ 超净工作台等。 实验四 细菌特殊结构观察及显微测微技术 1、实验目的要求 ⑴ 掌握细菌芽孢、鞭毛以及荚膜的染色方法。 ⑵ 观察细菌三种特殊结构的形态。 ⑶ 掌握显微镜测微尺的使用方法。 2、实验主要内容 ⑴ 细菌芽孢、鞭毛以及荚膜的染色方法。 ⑵ 镜下观察细菌三种特殊结构的形态。 ⑶ 用显微镜测微尺测量微生物的大小。 3、实验仪器设备 ⑴ 显微镜(倒置、荧光等)、。 ⑵ 显微镜测微尺等。 实验五 放线菌、霉菌形态观察 1、实验目的要求 ⑴ 掌握放线菌以及霉菌水浸片的制作方法。 ⑵ 显微镜下观察放线菌、霉菌的基本形态。 2、实验主要内容 ⑴ 制作放线菌以及霉菌水浸片。 ⑵ 显微镜下观察形态。 3、实验仪器设备 ⑴ 显微镜等