乳液PCR扩增 Emulsion PCr 8 hours Anneal sstDNA to an excess of Emulsify beads and PCr Clonal amplification occurs Break microreactors and DNA capture beads reagents in water-in-oil inside microreactors nrich for DNA-positive microreactors bead sstDNA library Bead-amplified sstDNA library
乳液PCR扩增
感/重亚硫酸盐处理后的焦磷酸测序 G GTC AGTGAC/mcG BIsulfite conversion ATP Ppi+APS←PPi dNTP 1 GGTUAGTGAU/mCG Sulphurylase ACTGTA PCR amplification Luciferin Oxyluciferin C Apyrase GGTTAGTGAT/CG Luciferase Pyrosequencing analysis ATP
重亚硫酸盐处理后的焦磷酸测序
焦磷酸测序甲基化含量 GGTC AGTGAC/mcG C 21% 19%21% 21%19916%23% Bisulfite conversion GGTUAGTGAU/mCG U C 44 47%43% 41%44%41% 48% GGTTAGTGAT/CG Pyrosequencing analysis CGTGGTCTGATC TG T G T G T C G
焦磷酸测序甲基化含量
重亚硫酸盐测序分析内容 1.重亚硫酸盐测序序列与参考序列的比对 2.深度与覆盖度分析 3.计数G碱基的甲基化水平 4.全基因组甲基化数据分布趋势分析 5.全基因组甲基化分布图谱 6.差异甲基化区域(DMR)分析
重亚硫酸盐测序分析内容 1.重亚硫酸盐测序序列与参考序列的比对 2.深度与覆盖度分析 3.计数C碱基的甲基化水平 4.全基因组甲基化数据分布趋势分析 5.全基因组甲基化分布图谱 6.差异甲基化区域（DMR）分析