荧光显微镜技术(Fluorescence Microscopy) ●原理与应用 ◆直接荧光标记技术 ◆间接免疫荧光标记技术 ◆在光镜水平用于特异蛋白质 等生物大分子的定性定位： 如绿色荧光蛋白(GFP)的应用 回 ▣
激光共焦扫描显微镜技术 (Laser Scanning Confocal Microscopy) ◆原理 ◆应用： 排除焦平面以外光的干扰，增强 图像反差和提高分辨率(1.4一1.7) 可重构样品的三维结构。 ☑
◆相差显微镜(phase-contrast microscope) 将光程差或相位差转换成振幅差，可用于观察活细胞 ◆微分于涉显微镜(differential-interference microscope 偏振光经合成后，使样品中厚度上的微小区别转化成 明暗区别，增加了样品反差且具有立体感。适于研究 活细胞中较大的细胞器 ◆录像增差显微镜技术(video-enhance microscopy) 计算机辅助的DIC显微镜可在高分辨率下研究活 细胞中的颗粒及细胞器的运动 ☒
电镜与光镜的比较 显微镜分辨本领 光源 透镜 真空 成像原理 LM 200nm 可见光玻璃透镜 不要求真空 利用样品对光的吸收形 (400-700) 成明暗反差和颜色变化 100nm 紫外光 玻璃透镜 不要求真空 (约 200nm) TEM 0.1nm 电磁透镜 要求真空 利用样品对电子的散射 电子束 1.33x10-5 和透射形成明暗反差 (0.01-0.9 1.33x10-3Pa
电镜与光镜光路图比较 Lamp -Haad.1974 ▣