第三节细胞培养、细胞工程与显微操作技术 ●细胞的培养 ●细胞工程 ☑
一、光学显微镜技术(light microscopy) ●普通复式光学显微镜技术 ●荧光显微镜技术(Fluorescence Microscopy) ●邀光共焦扫描显微镜技术(Laser Confocal Microscopy) ●相差显微镜(phase-contrast microscope) ●微分王涉显微镜 (differential interference contrast microscope,DIC) ●录像增差显微镜技术(video-enhance microscopy) ☒
二、电子显微镜技术 ●电子显微镜的基本知识 ◆电镜与光镜的比较 ◆电镜与光镜光路图比较 ◆电子显微镜的基本构造 。主要电镜制样技术 ◆负染色技术 ◆冰冻蚀刻技术 ◆超薄切片技术 ◆电镜三维重构技术 ●扫描电镜(Scanning electron microscope,SEM) SPM(Scanning probe microscope) ☑
三、扫描遂道显微镜 Scanning Probe Microscope,SPM (80年代发展起来的检测样品微观结构的仪器) 包括:STM、AFM、磁力显微镜、摩擦力显微镜等 原理:扫描探针与样品接触或达到很近距离时,即产生彼此间相互作用力,如 量子力学中的隧道效应(隧道电流)、原子间作用力、磁力、摩擦力等, 并在计算机显示出来,从而反映出样品表面形貌信息、电特性或磁特性等。 ◆装置:扫描的压电陶瓷,逼近装置,电子学反馈控制系统和数据采集、处理、显示 系统。 ◆特点:(1)可对晶体或非晶体成像,无需复杂计算,且分辨本领高。 (侧分辨率为0.1~0.2nm,纵分辨率可达0.01nm); (2)可实时得到样品表面三维图象,可测量厚度信息: (3)可在真空、大气、液体等多种条件下工作;非破坏性测量。 (4)可连续成像,进行动态观察 ◆用途:纳米生物学研究领域中的重要工具,在原子水平上揭示样本表面的结构
普通复式光学显微镜技术 光镜样本制作 分辨率是指区分开两个质点间的最小距离 0.61入 D=N.Sina./2 ☑