氯乙酸、苦味酸、磷钨酸、鞣酸等生物 碱沉淀试剂,能与蛋白质阳离子结合生成 不溶物,而使蛋白质发生不可逆沉淀。如 H3N- Pr-coo+Cl3C-COO→ [H2N-Pr-CO0-J0-C0-CCl3 Cu2、Hg2、Pb2、Ag等重金属阳离子, 能与蛋白质阴离子结合生成不溶物,使蛋 白质发生不可逆沉淀。例如: H2N-Pr-COO+Ag+→ H,N-Pr-COOAgl
•三氯乙酸、苦味酸、磷钨酸、鞣酸等生物 碱沉淀试剂，能与蛋白质阳离子结合生成 不溶物, 而使蛋白质发生不可逆沉淀。如： +H3N-Pr-COO- + Cl3C-COO- → [H2N-Pr-COO- ]O-CO-CCl3 ↓ •Cu2+ 、Hg2+ 、Pb2+ 、Ag+等重金属阳离子， 能与蛋白质阴离子结合生成不溶物，使蛋 白质发生不可逆沉淀。例如： H2N-Pr-COO- +Ag+ → H2N-Pr-COOAg↓
热原( Coagulation ·将接近于等电点附近的蛋白质溶液加热,可使蛋白 质发生凝固而沉淀。加热首先使蛋白质变性,有规则的 肽链结构被打开呈松散状不规则的结构,分子的不对称 性增加,疏水基团暴露,进而凝聚成凝胶状的蛋白块。 如煮熟的鸡蛋,蛋黄和蛋清都凝固。 ·蛋白质的变性、沉淀、凝固之间有密切的关系。但 蛋白质变性后并不一定沉淀,变性蛋白质只在等电点附 近才沉淀,沉淀的变性蛋白质也不一定凝固。如蛋白质 被强酸、强碱变性后由于蛋白质颗粒带有大量电荷,仍 溶于强酸或强减之中。但若将强碱或强酸溶液的υ调节 到pI,则变性蛋白质凝集成絮状沉淀物,若将此絮状物 加热,则分子间相互盘缠而变成较为坚固的凝块
加热凝固 (Coagulation) • 将接近于等电点附近的蛋白质溶液加热，可使蛋白 质发生凝固而沉淀。加热首先使蛋白质变性，有规则的 肽链结构被打开呈松散状不规则的结构，分子的不对称 性增加，疏水基团暴露，进而凝聚成凝胶状的蛋白块。 如煮熟的鸡蛋，蛋黄和蛋清都凝固。 • 蛋白质的变性、沉淀、凝固之间有密切的关系。但 蛋白质变性后并不一定沉淀，变性蛋白质只在等电点附 近才沉淀，沉淀的变性蛋白质也不一定凝固。如蛋白质 被强酸、强碱变性后由于蛋白质颗粒带有大量电荷，仍 溶于强酸或强减之中。但若将强碱或强酸溶液的pH调节 到pI，则变性蛋白质凝集成絮状沉淀物，若将此絮状物 加热，则分子间相互盘缠而变成较为坚固的凝块
蛋白质的紫外吸收 波长:280nm 引起紫外吸收的因素:主要是色氨酸 (Trp)和酪氨酸(Tyr)的共轭双键, Phe在紫外光下也有光吸收。 c可用于蛋白质的定量测定
蛋白质的紫外吸收 •波长：280 nm •引起紫外吸收的因素：主要是色氨酸 ( Trp）和酪氨酸（ Tyr)的共轭双键， Phe在紫外光下也有光吸收。 •可用于蛋白质的定量测定
800cm1(780nm 3,960cm1(2,526nm) 105 104 102 10 101 102 10 近红中 红外 远红外 核磁振 外 紫外 可见 红外 微波 Rado,T无线电波 内层电 子的跃 外层电子的跃迁 分子振动 分子转动 电磁转动 波长范围:200-400m
波长范围：200-400nm
40.000 20,000 10,000 5,000 T 2,00 P 1,000 T 500 200 z100 Phe 200 240260280300320 Wavelength (nm)