差别标记: 底物或抑制剂存在 活性基团不与修饰剂作用 去除底物或抑制剂 原来被保护的基团带同位素标记 可直接得到蛋白质发挥功能作用的必需基团。 化学修饰 含同位素标记 的同样试剂
差别标记: 底物或抑制剂存在 活性基团不与修饰剂作用 去除底物或抑制剂 原来被保护的基团带同位素标记 可直接得到蛋白质发挥功能作用的必需基团。 化学修饰 含同位素标记 的同样试剂
2)专一性化学修饰(基团专一性修饰) 用专一性化学修饰剂修饰酶活性中心的某一 氨基酸残基的侧链基团。 3)亲和标记(位点专一性修饰) 采用的修饰试剂是根据底物的化学结构设计 合成的含有活泼反应基团的底物类似物。 作用机制:利用酶对底物的特殊亲和力将酶加以 修饰标记
2)专一性化学修饰(基团专一性修饰) 用专一性化学修饰剂修饰酶活性中心的某一 氨基酸残基的侧链基团。 3)亲和标记(位点专一性修饰) 采用的修饰试剂是根据底物的化学结构设计 合成的含有活泼反应基团的底物类似物。 作用机制:利用酶对底物的特殊亲和力将酶加以 修饰标记
化学修饰的专一性
化学修饰的专一性
Y Y Y X-Y Y Y X
Y Y Y X-Y Y Y X
亲和修饰剂: ①与S结构相似,与活性中心的氨基酸残基 亲和力大,而与活性中心以外的氨基酸 残基亲和力小。 ②具有活泼的化学基团(如卤素)可与活性 中心的基团形成稳定的共价键
亲和修饰剂: ①与S结构相似,与活性中心的氨基酸残基 亲和力大,而与活性中心以外的氨基酸 残基亲和力小。 ②具有活泼的化学基团(如卤素)可与活性 中心的基团形成稳定的共价键