第十四章基因的表达与调控
第十四章 基因的表达与调控 第一节 原核基因转录的启动与终止
启动子 启动子( promoter):转录的起始和链的选择信号的DN A核苷酸顺序就称为启动子,这个位点也是RNA聚合酶 的结合起点。 启动子的结构:1975年 Pribnow采用保护法先后测定 了包括T4噬菌体及Ecol在内的46个不同来源基因的R NA聚合酶的保护区域,发现发现保护区段长度为 41~4bp,范围在-20~+20之间,分析这一序列发现在-1 0区有一保守顺序: TA 402411254293014617/46 898950656510037% 这一顺序称为-10区或 pribnow顺序( pribnow box)
一、启动子 启动子（promoter）：转录的起始和链的选择信号的ＤＮ Ａ核苷酸顺序就称为启动子，这个位点也是ＲＮＡ聚合酶 的结合起点。 •启动子的结构：１９７５年Pribnow采用保护法先后测定 了包括Ｔ４噬菌体及E.coli在内的46个不同来源基因的Ｒ ＮＡ聚合酶的保护区域，发现发现保护区段长度为 41~44bp，范围在-20~+20之间，分析这一序列发现在－１ ０区有一保守顺序： T40A41T25A29A30T46G17/46 89 89 50 65 65 100 37% 这一顺序称为-10区或pribnow顺序（pribnow box)
附:保护法:将DNA与RNA聚合酶结合后,加入 DNase l水解后得到的不被水解的保护片段。 Shal用保护法得到的DNA片段提纯后,加入 RNA聚合酶发现RNA聚合酶不能与DNA片段结合, 说明在被保护的41~44bp的DNA区段外还有与RNA 聚合酶结合有关的序列。因此他采用较温和的核酸 外切酶(S1核酸酶)及足迹法进行分析,发现被 保护的区域有60bp(-40~+20),在-35区还有一段 保守序列: 381373542729A26/46 858381616952 这一序列称为35区或 sextama顺序( Sextama box)
附：保护法：将DNA与RNA聚合酶结合后，加入 DNase I水解后得到的不被水解的保护片段。 Shall利用保护法得到的DNA片段提纯后，加入 RNA聚合酶发现RNA聚合酶不能与DNA片段结合， 说明在被保护的41~44bp的DNA区段外还有与RNA 聚合酶结合有关的序列。因此他采用较温和的核酸 外切酶（S1核酸酶）及足迹法进行分析，发现被 保护的区域有60bp（-40~+20），在-35区还有一段 保守序列： T38T37G35A27C29A26/46 85 83 81 61 69 52 % 这一序列称为-35区或sextama顺序（Sextama box)
附:足迹法( foot printing):用于分析蛋白质与 DNA结合的一种常用方法 10 (a)32p ↓↓↓↓↓↓4↓ 加入蛋白质X 1 (b) 加人 DNase I 凝胶电冰 放射自显影 10 B
附：足迹法（foot printing）：用于分析蛋白质与 DNA结合的一种常用方法
Std 蛋白质结合位点1 Oe 蛋白质结合位点2 * std 从左到右蛋白质浓度增加
蛋白质结合位点1 蛋白质结合位点2 从左到右蛋白质浓度增加