College of Life science 酶工程 第二节酶的提取 酶的提取是指在一定的条件下,用适当的溶 剂处理含酶原料,使酶充分溶解到溶剂中的 过程,也称作酶的抽提。 酶提取时首先应根据酶的结构和溶解性质, 选择适当的溶剂。酶都能溶解于水,可用水 或稀酸、稀碱、稀盐溶液等进行提取。有些 酶与脂质结合或含有较多的非极性基团,则 可用有机溶剂提取。为了提高酶的提取率并 防止酶的变性失活,在提取过程中要注意控 制好温度、pH值等提取条件。 根据酶提取时所采用的溶剂或溶液的不同,生 酶的提取方法主要有盐溶液提取、酸溶液提科 )取、碱溶液提取和有机溶剂提取等。 学 院
第二节 酶的提取 • 酶的提取是指在一定的条件下，用适当的溶 剂处理含酶原料，使酶充分溶解到溶剂中的 过程，也称作酶的抽提。 • 酶提取时首先应根据酶的结构和溶解性质， 选择适当的溶剂。酶都能溶解于水，可用水 或稀酸、稀碱、稀盐溶液等进行提取。有些 酶与脂质结合或含有较多的非极性基团，则 可用有机溶剂提取。为了提高酶的提取率并 防止酶的变性失活，在提取过程中要注意控 制好温度、pH 值等提取条件。 • 根据酶提取时所采用的溶剂或溶液的不同， 酶的提取方法主要有盐溶液提取、酸溶液提 取、碱溶液提取和有机溶剂提取等
College of Life Scie 酶工程 盐溶液提取 大多数蛋白类酶(P酶)都溶于水,而且 在低浓度的盐存在的条件下,酶的溶解度 增加,这称为盐溶现象,所以一般采用稀 盐溶液进行酶的提取。例如,固体发酵生 产的麸曲中的淀粉酶、蛋白酶等胞外酶, 用0.14moL的氯化钠溶液或 0.02~0.05moL的磷酸缓冲液提取;枯草 杄菌碱性磷酸酶用0.1mo儿L氯化镁溶液 提取等。有少数酶,如霉菌脂肪酶,用清 水提取的效果较好 核酸类酶(R-酶)的提取,一般是在细胞生 破碎后,用0.14mo_的氯化钠溶液提取 命 科 得到核糖核蛋白提取液,再进一步与蛋白学 质等杂质分离,而得到酶RNA。 学 院
1.盐溶液提取 – 大多数蛋白类酶（P-酶）都溶于水，而且 在低浓度的盐存在的条件下，酶的溶解度 增加，这称为盐溶现象，所以一般采用稀 盐溶液进行酶的提取。例如，固体发酵生 产的麸曲中的淀粉酶、蛋白酶等胞外酶， 用 0.14mol/L 的氯化钠溶液或 0.02~0.05mol/L 的磷酸缓冲液提取；枯草 杆菌碱性磷酸酶用 0.1mol/L 氯化镁溶液 提取等。有少数酶，如霉菌脂肪酶，用清 水提取的效果较好。 – 核酸类酶（R-酶）的提取，一般是在细胞 破碎后，用 0.14mol/L 的氯化钠溶液提取， 得到核糖核蛋白提取液，再进一步与蛋白 质等杂质分离，而得到酶 RNA
College of Life Science 酶工程 2酸溶液提取 有些酶在酸性条件下溶解度较大,且稳定 性较好,宜用酸溶液提取。例如,胰蛋白 酶可用0.12moL的硫酸溶液提取。 3碱溶液提取 有些在碱性条件下溶解度较大且稳定性较 好的酶,应采用碱溶液提取。例如,细菌 L-天冬酰胺酶可用pH11~12的碱溶液碱性生 提取。 科
2.酸溶液提取 – 有些酶在酸性条件下溶解度较大，且稳定 性较好，宜用酸溶液提取。例如，胰蛋白 酶可用 0.12mol/L 的硫酸溶液提取。 3.碱溶液提取 – 有些在碱性条件下溶解度较大且稳定性较 好的酶，应采用碱溶液提取。例如，细菌 L-天冬酰胺酶可用 pH11~12的碱溶液碱性 提取
College of Life Scie 4.有机溶剂提取 有些与脂质结合牢固或含有较多非极性基 团的P酶,可以采用与水可混溶的丁醇 等有机溶剂提取。 例如,琥珀酸脱氢酶、胆碱酯酶等的提取。 在R-酶的提取中,经常采用苯酚水溶液。 一般是在细胞破碎、制成匀浆后,加入等 体积的90%苯酚水溶液,振荡一段时间, 结果DNA和蛋白质沉淀于苯酚层,而 RNA溶解于水中。 生命科学学院
4.有机溶剂提取 – 有些与脂质结合牢固或含有较多非极性基 团的 P-酶，可以采用与水可混溶的丁醇 等有机溶剂提取。 – 例如，琥珀酸脱氢酶、胆碱酯酶等的提取。 – 在 R-酶的提取中，经常采用苯酚水溶液。 一般是在细胞破碎、制成匀浆后，加入等 体积的 90% 苯酚水溶液，振荡一段时间， 结果 DNA 和蛋白质沉淀于苯酚层，而 RNA 溶解于水中
College of Life Science 在酶提取过程中,为了防止酶变性失 活,温度不宜高,尤其是采用有机溶 剂提取时,温度应该控制在0~10°C。 有些酶对温度的耐受性较高,可在室 温或更高一些的温度条件下提取。为 了提高酶的溶解度,提取时pH值应该 避开酶的等电点。此外,还可加入某 些保护剂,以提高酶的稳定性 生命科学学院
• 在酶提取过程中，为了防止酶变性失 活，温度不宜高，尤其是采用有机溶 剂提取时，温度应该控制在 0~10℃ 。 有些酶对温度的耐受性较高，可在室 温或更高一些的温度条件下提取。为 了提高酶的溶解度，提取时 pH 值应该 避开酶的等电点。此外，还可加入某 些保护剂，以提高酶的稳定性