a b 调亡特异 核酸酶在 核小体随 机切割 DAPI染色显示凋亡细胞的染色质凝集 Con 16s 248a16s D八NA断裂原位末端标记法显示斑马 鱼胚胎发育过程中的细胞调 A B 凋亡细胞的典型特征 D八A
DAPI染色显示凋亡细胞的染色质凝集 凋亡细胞的典型特征——DNA梯状条带 DNA断裂原位末端标记法显示斑马 鱼胚胎发育过程中的细胞凋亡
1 234 567 细胞色素C诱导细胞凋亡: 1,0h;2,1h;3,2h;4,3h; 5,4 h;6,Control;7,Marker 0 60 0 20 0 200 400 600 A含量F1应-] 流式细胞仪测定凋亡细胞78
细胞色素C诱导细胞凋亡: 1,0 h; 2,1 h;3,2 h; 4,3 h; 5,4 h; 6,Control;7,Marker 流式细胞仪测定凋亡细胞
常用检测细胞凋亡的染料: 二乙酸荧光素(FDA),绿色荧光,活细胞染色。 Hoechst33342或33258,DAPI,吖啶橙(AO),半通 透,调亡和固定后的细胞荧光较强。 溴化乙啶(EB)、碘化丙啶(P)、放线菌素D(7 AAD),不通透,正常细胞拒染。 ·各种碱性染料。固定后染细胞核。 ·可用不同性质的染料对调亡细胞进行双染色。 D70
常用检测细胞凋亡的染料: • 二乙酸荧光素(FDA),绿色荧光,活细胞染色。 • Hoechst 33342或33258,DAPI,吖啶橙(AO),半通 透,凋亡和固定后的细胞荧光较强。 • 溴化乙啶(EB)、碘化丙啶(PI)、放线菌素D(7- AAD),不通透,正常细胞拒染。 • 各种碱性染料。固定后染细胞核。 • 可用不同性质的染料对凋亡细胞进行双染色
A B A:人类白血病T细胞经1微升喜树碱处理,磷脂酰丝氨酸(PS)外翻,早期凋亡特异性的特征 被荧光标记的Annex in一5(Ca2+依赖性磷脂结合蛋白)检测到(产生凋亡小体的黄色绿色细 胞)。晚期凋亡和坏死细胞被染色(橙红色细胞核)。细胞凋亡的发生伴有细胞膜磷脂 酰丝氨酸移位酶的激活,提示细胞膜膜脂双层的某些成分由胞浆面向细胞质面外翻,可能 是细胞调亡的早期征象。B:人白血病细胞株HL-60ceI1s(急性粒细胞白血病,p53缺陷) 被喜树碱诱导3小时。DNA段端被荧光标记的脱氧核苷酸末端转移酶标记。 D7a2008
A:人类白血病T细胞经1微升喜树碱处理,磷脂酰丝氨酸(PS)外翻,早期凋亡特异性的特征 被荧光标记的Annexin-5 (Ca2+依赖性磷脂结合蛋白)检测到(产生凋亡小体的黄色绿色细 胞)。晚期凋亡和坏死细胞被pi染色(橙红色细胞核)。细胞凋亡的发生伴有细胞膜磷脂 酰丝氨酸移位酶的激活,提示细胞膜膜脂双层的某些成分由胞浆面向细胞质面外翻,可能 是细胞凋亡的早期征象。B:人白血病细胞株HL-60 cells(急性粒细胞白血病,p53缺陷) 被喜树碱诱导3小时。DNA段端被荧光标记的脱氧核苷酸末端转移酶标记。 A B
4细胞凋亡的生理和病理学意义 (1)生理学意义 ①确保正常发育、生长:清除多余的、失去功能价值的细胞 (指趾间组织细胞); ②维持内环境稳定:清除受损突变细胞,自身反应细胞,衰 老细胞; ③发挥积极的防御功能:感染病毒细胞凋亡,阻止病毒复制 D7420
4 细胞凋亡的生理和病理学意义 (1)生理学意义 • ① 确保正常发育、生长:清除多余的、失去功能价值的细胞 (指趾间组织细胞); • ② 维持内环境稳定:清除受损突变细胞,自身反应细胞,衰 老细胞; • ③ 发挥积极的防御功能:感染病毒细胞凋亡,阻止病毒复制