五、基因组学 测序方法: ◎克隆连续序列法( (clone contig): 将基因组DNA切割成长度为01~1Mb的大片段 克隆到YAC或BAC载体上啼分别测定单个克隆的序列 再装配连接成连续的DNA分子。 定向鸟枪射击法( directed shotgun) 以基因组图谱中标记为依据→测序装配和构建 不同DNA片段的序列
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五、基因组学 基因组图谱根据构建的途径,可分为两种: ◎遗传图谱 根据遗传性状(如已知基因位点、 功能未知的DNA标记、可鉴别的表型}目 性状)的分离比例啼将其定位在基因组非 中,构建相应的连锁图谱。 ◎物理图谱: 将各种标记直接定位在基因库中 的某一点上。 12/95
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五、基因组学 ()、遗传图谱的构建 图谱标记:可用基因或DNA作为可鉴别的标记 marker)。 (1).基因标记:基因控制性状的表现,利用可鉴别的形态、 生化等表型性状作标记根据连锁交换原理来分析基因 之间的连锁关系和遗传距离啼绘制连锁图谱 缺点:基因数目有限、所构建遗传图谱不详细、标记间 的遗传距离较大。 m豪是 砾,◆最 从争普只 色体性状在95 13/95
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五、基因组学 2).DNA4标记 每种生物DNA具有稳定性。 ∴DNA本身可作为构建遗传图谱的标记,主要有以下3种 类型: ①.限制性内切酶多态性: 限制性内切酶能识别和切割特异核苷酸序列,DNA 序列能或不能被某一酶酶切,实际上相当于一对等位基因 的差异。 14/95
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五、基因组学 RFLP DNA DNA orph 2 RE RE Probe P P 如一对同源染色体二个 DNA分子,一个具有某种酶 的酶切位点,另一个无此位 点啼酶切后形成的DNA片段 长度就会有差异,即多态性 ab吉b (RLP)啼根据该等位基因的 di D o at dDd dd 遗传,将RLP作为标记定位 在基因组的某一位置上 122221212222121222 15/95
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