3、限制性内切核酸酶的基本特征 由宿主控制的限制与修饰作用 >Lurva和Human(l952)以及Bertani和Weigle (1953)发现了噬菌体λ的限制作用,即用一种 噬菌体在一种宿主细胞中生长良好,但在另一 种宿主细胞中生长很差,其原因在于它的DNA 受到后一种宿主的“限制”。由此发现了限制 修饰系统
Lurva和Human(1952)以及Bertani和Weigle (1953)发现了噬菌体λ的限制作用,即用一种 λ噬菌体在一种宿主细胞中生长良好,但在另一 种宿主细胞中生长很差,其原因在于它的DNA 受到后一种宿主的“限制” 。由此发现了限制- 修饰系统。 3、限制性内切核酸酶的基本特征 由宿主控制的限制与修饰作用
A(B) 4×10一4 大肠杆菌B 大肠杆菌K 10 E.O.P成斑率 efficiency of plating 50年代初发现了由寄主控制的限伟制和修饰现象
50年代初发现了由寄主控制的限制和修饰现象 (B) (K) 大肠杆菌B 大肠杆菌K 1 1 4×10 — 4 10 — 4 E.O.P 成斑率 efficiency of plating
3、限制性内切核酸酶的基本特征 由宿主控制的限制与修饰作用 >限制和修饰系统中的限制作用即指一定类型的 细菌可以通过限制酶的作用,破坏入侵的噬菌 体DNA,导致噬菌体的寄主幅度受到限制;而 寄主本身的DNA,由于在合成后通过甲基化酶 的作用得以甲基化,使DNA得以修饰,从而免 遭自身限制性酶的破坏
限制和修饰系统中的限制作用即指一定类型的 细菌可以通过限制酶的作用,破坏入侵的噬菌 体DNA,导致噬菌体的寄主幅度受到限制;而 寄主本身的DNA,由于在合成后通过甲基化酶 的作用得以甲基化,使DNA得以修饰,从而免 遭自身限制性酶的破坏。 3、限制性内切核酸酶的基本特征 由宿主控制的限制与修饰作用
II型限制性核酸内切酶 人 种类:从各种不同的微生物中已经分离到的第 二型限制性核酸内切酶就有2300多种以上。 识别序列:可以识别230种以上的DNA序列。 >应用:这些发现与开发的II类限制性核酸内切 酶都已成为生物技术应用中的重要工具酶
II型限制性核酸内切酶 种类:从各种不同的微生物中已经分离到的第 二型限制性核酸内切酶就有2300多种以上。 识别序列:可以识别230种以上的DNA序列。 应用:这些发现与开发的II类限制性核酸内切 酶 都已成为生物技术应用中的重要工具酶
型酶识别序列特点 >绝大多数的Ⅱ型限制性核酸内切酶都有严格的 识别特定核苷酸的序列。 >识别的核苷酸序列一般在4一8个碱基对,最常 见的是4个或6个核苷酸,少数也有识别5个核 苷酸以及7个、9个、10个和11个核苷酸的。 >大多数识别位点具有180度旋转对称的结构形 式,即这些核苷酸对的顺序是回文结构
II型酶识别序列特点 绝大多数的II型限制性核酸内切酶都有严格的 识别特定核苷酸的序列。 识别的核苷酸序列一般在4~8个碱基对,最常 见的是4个或6个核苷酸,少数也有识别5个核 苷酸以及7个、9个、10个和11个核苷酸的。 大多数识别位点具有180度旋转对称的结构形 式,即这些核苷酸对的顺序是回文结构