几种主要沉淀方法比较 方法 原理 优点 缺点 应用范围 集： 盆笼 1.沉淀法 蛋白质的 盐析作用 质混盐 是 晶 复性较好 2 有机溶 黯奎，界 楼作管避 無宥 7作、 质变成 白质、多 沉淀 辨力较 法 电常数 核酸物 本较高 茜芬 沉淀 等电点、热 3. 选择性 沉淀法 选挥性较 ,方法 应用范围 势集物 可逆 种类较 较窄 多 质的沉淀 沉淀作
几种主要沉淀方法比较
常用层析技术及应用 吸附层析 分配层析 凝胶过滤 (分子筛层析》 离子交换层析 亲和层析 聚焦层析
常用层析技术及应用 吸附层析 分配层析 凝胶过滤（分子筛层析） 离子交换层析 亲和层析 聚焦层析
吸附层析 (absorption chromatography) 原理：以吸附剂作为固定相，选择适当的溶剂作流动相。 由于各种物质的极性不同，被吸附剂吸附的程度和 在流动相中的溶解度不同。层析时，当流动相从固 定相上流过时，各组分也就不同程度地被溶解（解 吸)，然后又再被吸附、再溶解再吸附，从而以不 同速度随流动相向前移动。 载体：硅胶氧化铝羟基磷石灰 应用：分离纯化蛋白质、酶、氨基酸、核苷酸 等生化物质
吸附层析 （absorption chromatography） 原理： 载体 ： 硅胶 氧化铝 羟基磷石灰 应用：分离纯化蛋白质、酶、氨基酸、核苷酸 等生化物质 以吸附剂作为固定相，选择适当的溶剂作流动相。 由于各种物质的极性不同，被吸附剂吸附的程度和 在流动相中的溶解度不同。层析时，当流动相从固 定相上流过时，各组分也就不同程度地被溶解（解 吸），然后又再被吸附、再溶解再吸附，从而以不 同速度随流动相向前移动
分配层析 (distribuption chromatography> 原理： 分配层析实际上是一种连续抽提方式。如纸层析中 滤纸的结合水为固定相，以水饱和的有机溶剂为流 动相（展开剂）。当流动相沿滤纸经过样品点时， 样品点中的溶质在水和有机相中溶解度不同而不均 匀地分配在两相中，各种组分按其各自的分配系数 进行不断分配，从而使物质得到分离和纯化。 载体：纤维素硅藻土硅胶 应用：各种生化物质的分离鉴定
分 配 层 析 （distribuption chromatography） 原理： 载体 ：纤维素 硅藻土 硅胶 应用：各种生化物质的分离鉴定 分配层析实际上是一种连续抽提方式。如纸层析中 滤纸的结合水为固定相，以水饱和的有机溶剂为流 动相（展开剂）。当流动相沿滤纸经过样品点时， 样品点中的溶质在水和有机相中溶解度不同而不均 匀地分配在两相中，各种组分按其各自的分配系数 进行不断分配，从而使物质得到分离和纯化
30 管中蛋白质总量 物质) 物质☑ 有效分配系数(Kef) 某一物质在A相中的总量 10 某一物质在B相中的总量 逆流分溶原理示意图 管号 分溶曲线 溶剂 溶剂 B 64 64 总量 64 上相转移 64 32 上相转移 平衡后 32 总量 下相转移 64 64 1 转移 16 16 总量 16 16 12 32 32 8 16 转移 27 2 16 9 量 16 32 24 36 12 675 20.23 20.25 转移 3 4 12 2.25 6.73 6.75 总量 24 29 9 27 27 0.19 10.1 20.2 转移 4 2 0.06 3.4 6.8 5.1 总量 4 16 16 0.25 3.0 13.5 27 20.3 分溶管号 1 2 2 3 物质Y(Kd=1)的分配情况 物质ZKd=3)的分配情况
逆 流 分 溶 原 理 示 意 图 物质Y(Kd=1)的分配情况 溶剂 A 物质Z(Kd=3)的分配情况 溶剂 B 总量 总量 总量 总量 总量 总量 平衡后 转移 1 转移 2 转移 3 分溶管号 转移 4 上相转移 下相转移 上相转移 管 中 蛋 白 质 总 量 物质Y 物质Z 分溶曲线 管号 有效分配系数（Keff）= 某一物质在A相中的总量 某一物质在B相中的总量