质粒DNA的tra基因 (指令) E.C/)产生菌毛 宿主与受体细胞结合 (迁移) 遗传物在细胞之间转移 大肠杆菌接合( conjunction)
大肠杆菌接合（conjunction） 质粒DNA的tra基因 E.Coli产生菌毛 宿主与受体细胞结合 遗传物在细胞之间转移 （指令） （迁移）
(7)携带特殊的遗传标记 野生型的质粒DNA上往往携带一个或多个遗传标 记基因,这使得寄主生物产生正常生长非必需的 附加性状,包括: 物质抗性抗生素、重金属离子、毒性阴离子、 有机物 物质合成抗生素、细菌毒素、有机碱 这些标记基因对DNA重组分子的筛选具有重要意义
（7）携带特殊的遗传标记 野生型的质粒DNA上往往携带一个或多个遗传标 记基因，这使得寄主生物产生正常生长非必需的 附加性状，包括： 物质抗性 抗生素、重金属离子、毒性阴离子、 有机物 物质合成 抗生素、细菌毒素、有机碱 这些标记基因对DNA重组分子的筛选具有重要意义
遗传标记基因 定义:在基因工程中使用与选择重组体DNA转化细 胞的基因 标记基因的作用 1.指示外源DNA分子(载体或重组分子)是否进入 宿主细胞 2.指示外源DNA分子是否插入载体分子形成了重组 子
定义:在基因工程中使用与选择重组体DNA转化细 胞的基因 1. 指示外源DNA分子（载体或重组分子）是否进入 宿主细胞 2. 指示外源DNA分子是否插入载体分子形成了重组 子 遗传标记基因 标记基因的作用
标记基因的种类 1.抗性标记基因(可直接用于选择转化子) a.抗生素抗性基因:Apr,Tcr,cm,Kanr,G418r Hygr,Neo b.重金属抗性基因:Cur,Znr,Gd C.代谢抗性基因:TK,抗除草剂基因 2.营养标记基因(可直接用于选择转化子 主要是参与氨基酸,核苷酸及其他必需营养物合成酶类 的基因,这类基因在酵母转化中使用最频繁,如TRP1, URA3,LEU2,H|S4等。 3.生化标记基因 其表达产物可催化某些易检测的生化反应,如lacZ, GUS CAT 4.噬菌斑
1. 抗性标记基因（可直接用于选择转化子） a. 抗生素抗性基因: Apr ，Tcr ，Cmr ，Kanr ，G418r ， Hygr ，Neor b. 重金属抗性基因: Cur ，Znr ，Cdr c. 代谢抗性基因: TK，抗除草剂基因 2. 营养标记基因（可直接用于选择转化子） 主要是参与氨基酸，核苷酸及其他必需营养物合成酶类 的基因， 这类基因在酵母转化中使用最频繁，如TRP1， URA3，LEU2，HIS4等。 3. 生化标记基因 其表达产物可催化某些易检测的生化反应，如lacZ， GUS，CAT 4. 噬菌斑 标记基因的种类
若干抗菌素的作用方式及其抗性机理 抗菌素名称 作用方式 抗性机理 氨苄青霉素(Amp)这是一种青霉素的衍生物,它通过干氨苄青霉素抗性基因(ba或amp3),编码的一种周 扰细菌胞壁合成之末端反应而杀质酶,即B内酰胺酶,可特异地切割氨苄青霉素 死生长的细胞 的B-内酰胺环,从而使之失去杀菌的效力 氯霉素(Cml) 这是一种抑菌剂,它通过同核糖体氯霉素抗性基因(an或cm)编码的乙酰转移酶, 50s亚基的结合作用,干扰细胞蛋它特异地使氯霉素乙酰化而失活 白质的合成,并阻止肽键的形成 卡那霉素(Kan)这是一种杀菌剂,它通过同70s核糖卡那霉素的抗性基因(kan或kan)编码的氨基糖 体的结合作用,导致mRNA发生苷磷酸转移酶,可对卡那霉素进行修饰,从而阻 错读( misreading 止其同核糖体之间发生相互作用 链霉素(Sm) 这是一种杀菌剂,它通过同核糖体的链霉素抗性基因(st或sr)编码的一种特异性酶 30s亚基的结合作用,导致mRNA可对链霉素进行修饰从而抑制其同核糖体30s 发生错译 亚基的结合 四环素(Tet) 这是一种抑菌剂,它通过同核糖体四环素抗性基因(et或t)编码的一种特异性的 30S亚基之间的结合作用,阻止细蛋白质,可对细菌的膜结构进行修饰,从而阻止 菌蛋白质的合成 四环素通过细胞膜从培养基中转运到细胞内