实验六植物DNA的提取与定量分析
实验六 植物DNA的提取与定量分析
一、实验目的，掌握植物DNA的提取方法掌握DNA浓度、质量分析技术
一、实验目的 l 掌握植物DNA的提取方法. l 掌握DNA浓度、质量分析技术
Ol二、实验原理DNA提取是分子遗传学、分子生物学研究的基本操作，高质量DNA是进行后续各种实验的基础！M细胞破碎抽提去杂质沉淀核酸-
二、实验原理 l DNA提取是分子遗传学、分子生物学研究的基本操作，高 质量DNA是进行后续各种实验的基础！ 细胞破碎 → 抽提去杂质 → 沉淀核酸
1.细胞破碎方法机械方法：研磨法、超声波处理法、匀浆法；化学试剂法：用SDS、CTAB处理细胞酶解法：溶菌酶等，破坏细胞壁
• 机械方法： 研磨法、超声波处理法、匀浆法； • 化学试剂法：用SDS、CTAB处理细胞； • 酶解法： 溶菌酶等，破坏细胞壁。 1.细胞破碎方法
兰CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）：一种阳离子去污剂，可溶解细胞膜，且与DNA形成复合物。高盐溶液（0.7mol/LNaCI）中可溶，低盐浓度时（0.3mol/LNaCI）从溶液中沉淀。通过离心就可将CTAB与核酸的复合物同蛋白、多糖类物质分开，然后将CTAB与核酸的复合物沉淀溶解于高盐溶液中，再加入乙醇使核酸沉淀，CTAB能溶解于乙醇中
u CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）：一种阳离子去污剂，可溶 解细胞膜，且与DNA形成复合物。高盐溶液（0.7mol/L NaCl）中 可溶，低盐浓度时（0.3mol/L NaCl）从溶液中沉淀。 u 通过离心就可将CTAB与核酸的复合物同蛋白、多糖类物质分 开，然后将CTAB与核酸的复合物沉淀溶解于高盐溶液中，再 加入乙醇使核酸沉淀，CTAB能溶解于乙醇中