根的插条,如不定根已露出表皮,不要硬插,需挖穴轻理,以防伤根。4.4.6插后管理扦插后到插条下部生根,上部发芽、展叶,新生的扦插苗能独立生长时为成活期。此阶段关键是水分管理,尤其绿枝插最好有喷雾条件。苗圃地扦插要灌足底水,成活期根据情及时补水。浇水后及时中耕松土。插后覆膜是一项有效的保水措施。苗木独立生长后,除继续保证水分外,还要追肥,中耕除草。在苗木进入硬化期,苗干木质化时要停止浇水施肥,以免苗木徒长。4.5压条繁殖压条(layerage)繁殖是在枝条不与母株分离的情况下,将枝梢部分埋于土中,或包裹在能发根的基质中,促进枝梢生根,然后再与母株分离成独立植株的繁殖方法。这称方法不仅适用于托插易活的园艺植物,对于托插难于生根的树种、品种也可采用:因为新植株在生根前,其养分、水分和激素等均可由母株提供,且新梢埋人土中又有黄化作用,故较易生根。其缺点是繁殖系数低。果树上应用较多,花卉中仅有一些温室花木类采用高压繁殖。采用一些方法可以促进压条生根,如刻伤、环剥、绑缚、扭枝、黄化处理、生长调节剂处理等。压条方法有直立压条、曲枝压条和空中压条。4.5.1直立压条直立压条又称垂直压条或培土压条。苹果和梨的矮化砧、石榴、无花果、木槿、玉兰、夹竹桃、樱花等,均可采用直立压条法繁殖。现以苹果矮化砧的压条繁殖为例说明如下:第1年春天,栽矮化砧自根苗,按2m行距开沟做垄,沟深、宽均为30-40cm,垒高30-50cm。定植当年因长势较弱,粗度不足时,可不进行培土压条。第2年春天,腋芽萌动前或开始萌动时,母株上的枝条留2cm左右剪截,促使基部发生萌。当新梢长到15一20cm时,进行第1次培土,培土高度约10cm,宽约25cm。培土前要先灌水,并在行间撤施腐熟有机肥和磷肥。培土时对过于密集的萌新梢进行适当分散,使之通风透光。培土后注意保持土堆湿润。约1个月后新梢长到40cm时第2次培土,培土高约20cm,宽约40cm。一般培土后20d左右生根。入冬前即可分株起苗。起苗时先扒开土堆,自每根萌基部,靠近母株处留2cm短桩剪截,未生根萌葉梢也同时短截、起苗后盖土。翌年扒开培土,继续进行繁殖。直立压条法培土简单,建圃初期繁殖系数较低,以后随母株年龄的增长,繁殖系数会相应提高。4.5.2曲枝压条21
21 根的插条,如不定根已露出表皮,不要硬插,需挖穴轻埋,以防伤根。 4.4.6 插后管理 扦插后到插条下部生根,上部发芽、展叶,新生的扦插苗能独立生长时为成活期。此阶段 关键是水分管理,尤其绿枝扦插最好有喷雾条件。苗圃地扦插要灌足底水,成活期根据墒情及 时补水。浇水后及时中耕松土。插后覆膜 是一项有效的保水措施。苗木独立生长后,除继续 保证水分外,还要追肥,中 耕除草。在苗木进入硬化期,苗干木质化时要停止浇水施肥,以免苗木徒长。 4.5 压条繁殖 压条(1ayerage)繁殖是在枝条不与母株分离的情况下,将枝梢部分埋于土中,或包裹在能发 根的基质中,促进枝梢生根,然后再与母株分离成独立植株的繁殖方法。这称方法不仅适用于 扦插易活的园艺植物,对于扦插难于生根的树种、品种也可采用;因为新植株在生根前,其养 分、水分和激素等均可由母株提供,且新梢埋人土中又有黄化作用,故较易生根。其缺点是繁 殖系数低。果树上应用较多,花卉中仅有一些温室花木类采用高压繁殖。 采用一些方法可以促进压条生根,如刻伤、环剥、绑缚、扭枝、黄化处理、生长调节剂处 理等。压条方法有直立压条、曲枝压条和空中压条。 4.5.1 直立压条 直立压条又称垂直压条或培土压条。苹果和梨的矮化砧、石榴、无花果、木槿、玉兰、夹 竹桃、樱花等,均可采用直立压条法繁殖。现以苹果矮化砧的压条繁殖为例说明如下: 第 1 年春天,栽矮化砧自根苗,按 2m 行距开沟做垄,沟深、宽均为 30-40cm,垄高 30-50cm。 定植当年因长势较弱,粗度不足时,可不进行培土压条。 第 2 年春天,腋芽萌动前或开始萌动时,母株上的枝条留 2cm 左右剪截,促使基部发生萌 蘖。当新梢长到 15—20cm 时,进行第 1 次培土,培土高度约 10cm,宽约 25cm。培土前要先 灌水,并在行间撤施腐熟有机肥和磷肥。培土时对过于密集的萌蘖新梢进行适当分散,使之通 风透光。培土后注意保持土堆湿润。约 1 个月后新梢长到 40cm 时第 2 次培土,培土高约 20cm, 宽约 40cm。一般培土后 20d 左右生根。入冬前即可分株起苗。起苗时先扒开土堆,自每根萌蘖 基部,靠近母株处留 2cm 短桩剪截,未生根萌蘖梢也同时短截、起苗后盖土。翌年扒开培土, 继续进行繁殖。 直立压条法培土简单,建圃初期繁殖系数较低,以后随母株年龄的增长,繁殖系数会相应 提高。 4.5.2 曲枝压条
葡萄、猕猴桃、醋栗、穗状醋栗、树莓、苹果、梨和樱桃等果树以及西府海棠、丁香等观赏树木,均可采用此法繁殖。可在春季萌芽前进行,也可在生长季节枝条已半木质化时进行。由于曲枝方法不同又分水平压条法、普通压条法和先端压条法。(1)水平压条法采用水平压条时,母株按行距1.5m,株距30-50cm定植。定植时顺行向与沟底呈45角倾斜栽植。定植当年即可压条。压条时将枝条呈水平状态压入5cm左右的浅沟,用枝权固定,上覆浅王。待新梢生长至15一20cm时第1次培土。培土高约10cm,宽约20cm。1个月左右后,新梢长到25一30cm时,第2次培土,培土高15一20cm,宽约30cm。枝条基部未压人士内的芽处于优势地位,应及时抹去强旺萌。至秋季落叶后分株,靠近母株基部的地方,应保留一两株,供来年再次水平压条用。水平压条在母株定植当年即可用来繁殖,且初期繁殖系数较高,但须用枝权,比较费工。(2)普通压条有些藤本果树如葡萄可采用普通压条法繁殖。即从供压条母株中选靠近地面的1年生枝条在其附近挖沟,沟与母株的距离以能将枝条的中下部弯压在沟内为宜,沟的深度与宽度,一般为15一20cm。沟挖好以后,将待压枝条的中部弯曲压入沟底,用带有分权的枝棍将其固定。固定之前先在弯曲处进行环剥,以利生根。环剥宽度以枝蔓粗度的1/10左右为宜。枝蔓在中段压入土中后,其项端要露出沟外,在弯曲部分填土压平,使枝蔓理入土的部分生根,露在地面的部分则继续生长。秋末冬初将生根枝条与母株剪离,即成一独立植株。(3)先端压条法果树中的黑树莓、紫树莓、花卉中的刺梅、迎春花等,其枝条既能长梢又能在梢基部生根。通常在早春将枝条上部剪截,促发较多新梢,与夏季新梢尖端停止生长时,将先端压入土中。如果压入过早,新梢不能形成顶芽而继续生长:压入太晚则根系生长差。压条生根后,即可在距地面10cm处剪离母体,成为独立的新植株。4.5.3空中压条通称高压法,在我国古代,早已用此法繁殖石榴、葡萄、柑橘、荔枝、龙眼、人心果、树菠萝等,所以又叫中国压条法。此法技术简单,成活率高,但对母株损伤太重。空中压条在整个生长季节都可进行,但以春季和雨季为好。办法是选充实的二三年生枝条在适宜部位进行环剥,环剥后用5000mg/L的吲哚丁酸或萘乙酸涂抹伤口,以利伤口愈合生根,再于环剥处敷以保湿生根基质,用塑料薄膜包紧。两三个月后即可生根。待发根后即可剪离母体而成为1个新的独立的植株。22
22 葡萄、猕猴桃、醋栗、穗状醋栗、树莓、苹果、梨和樱桃等果树以及西府海棠、丁香等观 赏树木,均可采用此法繁殖。可在春季萌芽前进行,也可在生长季节枝条已半木质化时进行。 由于曲枝方法不同又分水平压条法、普通压条法和先端压条法。 (1) 水平压条法 采用水平压条时,母株按行距 1.5m,株距 30-50cm 定植。定植时顺行向与沟底呈 45°角 倾斜栽植。定植当年即可压条。压条时将枝条呈水平状态压入 5cm 左右的浅沟,用枝杈固定, 上覆浅土。待新梢生长至 15—20cm 时第 1 次培土。培土高约 10cm,宽约 20cm。1 个月左右后, 新梢长到 25—30cm 时,第 2 次培土,培土高 15—20cm,宽约 30cm。枝条基部未压人士内的 芽处于优势地位,应及时抹去强旺萌蘖。至秋季落叶后分株,靠近母株基部的地方,应保留一 两株,供来年再次水平压条用。 水平压条在母株定植当年即可用来繁殖,且初期繁殖系数较高,但须用枝杈,比较费工。 (2) 普通压条 有些藤本果树如葡萄可采用普通压条法繁殖。即从供压条母株中选靠近地面的 1 年生枝条, 在其附近挖沟,沟与母株的距离以能将枝条的中下部弯压在沟内为宜,沟的深度与宽度,一般 为 15—20cm。沟挖好以后,将待压枝条的中部弯曲压入沟底,用带有分权的枝棍将其固定。固 定之前先在弯曲处进行环剥,以利生根。环剥宽度以枝蔓粗度的 1/10 左右为宜。枝蔓在中段压 入土中后,其顶端要露出沟外,在弯曲部分填土压平,使枝蔓埋入土的部分生根,露在地面的 部分则继续生长。秋末冬初将生根枝条与母株剪离,即成一独立植株。 (3)先端压条法 果树中的黑树莓、紫树莓、花卉中的刺梅、迎春花等,其枝条既能长梢又能在梢基部生根。 通常在早春将枝条上部剪截,促发较多新梢,与夏季新梢尖端停止生长时,将先端压入土中。 如果压入过早,新梢不能形成顶芽而继续生长;压入太晚则根系生长差。压条生根后,即可在 距地面 10cm 处剪离母体,成为独立的新植株。 4.5.3 空中压条 通称高压法,在我国古代,早已用此法繁殖石榴、葡萄、柑橘、荔枝、龙眼、人心果、树 菠萝等,所以又叫中国压条法。此法技术简单,成活率高,但对母株损伤太重。 空中压条在整个生长季节都可进行,但以春季和雨季为好。办法是选充实的二三年生枝条, 在适宜部位进行环剥,环剥后用 5000mg/L 的吲哚丁酸或萘乙酸涂抹伤口,以利伤口愈合生根, 再于环剥处敷以保湿生根基质,用塑料薄膜包紧。两三个月后即可生根。待发根后即可剪离母 体而成为 1 个新的独立的植株
4.6分生繁殖分生繁殖是利用特殊营养器官来完成的,即人为地将植物体分生出来的幼植体(吸芽、珠芽、根等),或者植物营养器官的一部分(变态茎等)进行分离或分割,脱离母体而形成若干独立植株的办法。这些变态的植物器官主要功能是贮存营养,如一些多年生草本植物,生长季末期地上部死亡,而植株却以休眠状态在地下继续生存,来年有芽的肉质器官再形成新的茎叶。其第2个功能是繁殖。凡新的植株自然和母株分开的,称作分离(分株);凡人为将其与母株割开的,称为分割。此法繁殖的新植株,容易成活,成苗较快,繁殖简便,但繁殖系数低。4.6.1变态茎繁殖(1)匍匍茎与走茎由短缩的茎部或由叶轴的基部长出长蔓,蔓上有节,节部可以生根发芽,产生幼小植株,分离栽植即可成新植株。节间较短,横走地面的为匍匍茎(stolon),多见于草坪植物如狗牙根野牛草等。草莓是典型的以葡葡茎繁殖的果树。节间较长不贴地面的为走茎(runner),如虎耳草、吊兰等。(2)藥枝有些植物根上可以不定芽,萌发成根苗,与母株分离后可成新株。如山楂、枣、杜梨、海棠、树莓、石榴、樱桃、萱草、玉、蜀葵、一枝黄花等。生产上通常在春秋季节,利用自然根葉进行分株繁殖。为促使多发根,可人工处理,一般于休眠期或发芽前,将母株树冠外围部分骨干根切断或创伤,刺激产生不定芽。生长期保证肥水,使根苗旺盛生长发根,秋季或来年春与母体截离。(3)吸芽(offsets)吸芽是某些植物根际或地上茎叶腋间自然发生的短缩、肥厚呈莲座状短枝。吸芽的下部可自然生根,故可分离而成新株。菠萝的地上茎叶腋间能抽生吸芽:多浆植物中的芦荟、景天、拟石莲花等常在根际处着生吸芽。(4)珠芽(bulblets)及零余子(tubercle)珠芽为某些植物所具有的特殊形式的芽,生于叶腋间,如卷丹。零余子是某些植物的生于花序中的特殊形式的芽,呈鳞茎状(如观赏葱类)或块茎状(如薯类)。珠芽及零余子脱离母株后自然落地即可生根。(5)鳞茎(bulbs)有短缩而扁盘状的鳞茎盘,肥厚多肉的鳞叶着生在鳞茎盘上,鳞叶之间可发生腋芽,每年可从腋芽中形成1个至数个子鳞茎并从老鳞茎旁分离开。如百合、水仙、风信子、郁金香、大23
23 4.6 分生繁殖 分生繁殖是利用特殊营养器官来完成的,即人为地将植物体分生出来的幼植体(吸芽、珠 芽、根蘖等),或者植物营养器官的一部分(变态茎等)进行分离或分割,脱离母体而形成若干 独立植株的办法。这些变态的植物器官主要功能是贮存营养,如一些多年生草本植物,生长季 末期地上部死亡,而植株却以休眠状态在地下继续生存,来年有芽的肉质器官再形成新的茎叶。 其第 2 个功能是繁殖。凡新的植株自然和母株分开的,称作分离(分株);凡人为将其与母株割 开的,称为分割。此法繁殖的新植株,容易成活,成苗较快,繁殖简便,但繁殖系数低。 4.6.1 变态茎繁殖 (1)匍匍茎与走茎 由短缩的茎部或由叶轴的基部长出长蔓,蔓上有节,节部可以生根发芽,产生幼小植株, 分离栽植即可成新植株。节间较短,横走地面的为匍匍茎(stolon),多见于草坪植物如狗牙根、 野牛草等。草莓是典型的以匍匍茎繁殖的果树。节间较长不贴地面的为走茎(runner),如虎耳 草、吊兰等。 (2)蘖枝 有些植物根上可以不定芽,萌发成根蘖苗,与母株分离后可成新株。如山楂、枣、杜梨、 海棠、树莓、石榴、樱桃、萱草、玉簪、蜀葵、一枝黄花等。生产上通常在春秋季节,利用自 然根蘖进行分株繁殖。为促使多发根蘖,可人工处理,一般于休眠期或发芽前,将母株树冠外 围部分骨干根切断或创伤,刺激产生不定芽。生长期保证肥水,使根蘖苗旺盛生长发根,秋季 或来年春与母体截离。 (3)吸芽(offsets) 吸芽是某些植物根际或地上茎叶腋间自然发生的短缩、肥厚呈莲座状短枝。吸芽的下部可 自然生根,故可分离而成新株。菠萝的地上茎叶腋间能抽生吸芽;多浆植物中的芦荟、景天、 拟石莲花等常在根际处着生吸芽。 (4)珠芽(bulb lets)及零余子(tubercle) 珠芽为某些植物所具有的特殊形式的芽,生于叶腋间,如卷丹。零余子是某些植物的生于 花序中的特殊形式的芽,呈鳞茎状(如观赏葱类)或块茎状(如薯蓣类)。珠芽及零余子脱离母 株后自然落地即可生根。 (5)鳞茎(bulbs) 有短缩而扁盘状的鳞茎盘,肥厚多肉的鳞叶着生在鳞茎盘上,鳞叶之间可发生腋芽,每年 可从腋芽中形成 1 个至数个子鳞茎并从老鳞茎旁分离开。如百合、水仙、风信子、郁金香、大
蒜、韭菜等可用此法繁殖。(6)球茎(corms)短缩肥厚近球状的地下茎,茎上有节和节间,节上有干膜状的鳞片叶和腋芽供繁殖用时,可分离新球和子球,或切块繁殖。如唐菖蒲、荸荠、慈菇可用此法。(7)根茎(rhizome)在地下水平生长的圆柱形的茎,有节和节间,节上有小而退化的鳞片叶,叶腋中有腋芽,由此发育为地上枝,并产生不定根。具根茎的植物可将根茎切成数段进行繁殖。一般于春季发芽之前进行分植。莲、毒尾、美人蕉、香蒲、紫苑等多用此法繁殖。(8)块茎(tuber)形状不一,多近于块状,肉质,项端有芽眼,根系自块茎底部发生。繁殖方法有整个块茎繁殖如山药、秋海棠的小块茎,可于秋季采下,贮藏到每2年春季种植。亦可将块茎分割繁殖,如马铃薯、菊芋等,切成25-50g的种块,每块带一个或几个芽或芽眼。种块不宜过小,否则会因营养不足影响新植株的扎根和生长。4.6.2变态根繁殖块根(tuberousroots)由不定根(营养繁殖的植株)或侧根(实生繁殖植株)经过增粗生长而形成的肉质贮藏根。在块根上易发生不定芽,可以用于繁殖。既可用整个块根如大丽花的繁殖:也可将块根切块繁殖。4.7组织培养及无病毒种苗繁殖4.7.1组织培养的类型与应用植物的组织培养(tissueculture)是指通过无菌操作,把植物体的器官、组织或细胞(即外植体)接种于人工配制的培养基上,在人工控制的环境条件下培养,使之生长、发育成植株的技术与方法。由于培养物是脱离植物母体,在试管中进行培养,所以也叫离体培养。(1)植物组织培养的类型按其外植体来源及特性不同,植物组织培养可分为:(a)植株培养:幼苗及较大的完整植株的培养;(b)胎胚培养:包括原胚和成熟胚培养,即胚、胚乳、胚珠、珠心、子房培养及试管受精等;(c)器官培养:包括根、茎、叶、花及果实等构成植物体的各种器官的离体培养;(d)愈伤组织培养:从植物各个部分来的离体材料,增殖而形成的愈伤组织的培养;(e)组织培养:构成植物体的各种组织的离体培养,如分生组织、输导组织、薄壁组织等离体组织的培养;(f)细胞培养:包括单细胞、多细胞或悬浮细胞的培养:(g)原生质体培养。(2)植物组织培养的应用领域24
24 蒜、韭菜等可用此法繁殖。 (6)球茎(corms) 短缩肥厚近球状的地下茎,茎上有节和节间,节上有干膜状的鳞片叶和腋芽供繁殖用时, 可分离新球和子球,或切块繁殖。如唐菖蒲、荸荠、慈菇可用此法。 (7)根茎(rhizome) 在地下水平生长的圆柱形的茎,有节和节间,节上有小而退化的鳞片叶,叶腋中有腋芽, 由此发育为地上枝,并产生不定根。具根茎的植物可将根茎切成数段进行繁殖。一般于春季发 芽之前进行分植。莲、毒尾、美人蕉、香蒲、紫苑等多用此法繁殖。 (8)块茎(tuber) 形状不一,多近于块状,肉质,顶端有芽眼,根系自块茎底部发生。繁殖方法有整个块茎 繁殖如山药、秋海棠的小块茎,可于秋季采下,贮藏到每 2 年春季种植。亦可将块茎分割繁殖, 如马铃薯、菊芋等,切成 25-50g 的种块,每块带一个或几个芽或芽眼。种块不宜过小,否则会 因营养不足影响新植株的扎根和生长。 4.6.2 变态根繁殖 块根(tuberous roots)由不定根(营养繁殖的植株)或侧根(实生繁殖植株)经过增粗生 长而形成的肉质贮藏根。在块根上易发生不定芽,可以用于繁殖。既可用整个块根如大丽花的 繁殖;也可将块根切块繁殖。 4.7 组织培养及无病毒种苗繁殖 4.7.1 组织培养的类型与应用 植物的组织培养(tissue culture)是指通过无菌操作,把植物体的器官、组织或细胞(即外 植体)接种于人工配制的培养基上,在人工控制的环境条件下培养,使之生长、发育成植株的 技术与方法。由于培养物是脱离植物母体,在试管中进行培养,所以也叫离体培养。 (1)植物组织培养的类型 按其外植体来源及特性不同,植物组织培养可分为:(a)植株培养;幼苗及较大的完整植 株的培养;(b)胎胚培养:包括原胚和成熟胚培养,即胚、胚乳、胚珠、珠心、子房培养及试管 受精等;(c)器官培养:包括根、茎、叶、花及果实等构成植物体的各种器官的离体培养;(d) 愈伤组织培养:从植物各个部分来的离体材料,增殖而形成的愈伤组织的培养;(e)组织培养: 构成植物体的各种组织的离体培养,如分生组织、输导组织、薄壁组织等离体组织的培养;(f) 细胞培养:包括单细胞、多细胞或悬浮细胞的培养;(g)原生质体培养。 (2)植物组织培养的应用领域
近看来,随着组织培养技术的不断发展,其应用的范围也日益广泛。它的应用领域主要有以下几个方面:(a)无性系的快速大量繁殖。如采用茎尖培养的方法,1个兰花的茎尖1年内可育成400万个橘球茎,1个草莓茎尖1年内可育出成苗3000万株。目前,兰花、马铃薯、相橘、香蕉、菠萝、香石竹、马蹄莲、玉馨等多种园艺植物,均已采用组织培养进行快速繁殖;(b)培育无病毒苗木;(c)繁殖材料的长距离寄送和无性系材料的长期贮藏:(d)细胞次生代谢物的生产,并应用于生物制药工业;(e)细胞工程和基因工程等生物技术育种:(f)遗传学和生物学基础理论的研究。4.7.2茎尖与茎段的培养茎尖和茎段都是器官培养的1种方式,器官培养还包括块茎、球茎、叶片、子叶、花序、花瓣、子房、花托、果实、种子等的培养,而茎尖和茎段是园艺植物离体培养中最常采用的材料之一。茎尖的培养含义比较广泛,包括小到仅0.1~1.0mm的茎尖分生组织,大到几十毫米的茎尖或更大芽的培养。茎段培养是利用茎段可产生愈伤组织并能不断地继代培养,用以研究植物的生长与发育,脱分化与再分化,遗传变异与育种。(1)培养过程第一阶段:建立无菌材料即外植体。第二阶段:外植体的增殖,即茎尖增殖新梢的过程。第三阶段:离体茎的生根和炼苗。第四阶段:小苗移植驯化,入土小植株迅速生长发育。(2)培养方法和程度①无菌培养物建立的准备a母本植株的管理:母体植株的管理要从2个方面来考虑。首先,通过管理措施,防止母株感菌并发病;其次,控制外植体的生理状况。通过人为措施,保持每株健壮、生长。b.外植体的选择:茎尖培养应在旺盛生长的植株上取外植体,未萌发的侧芽生长点和顶端芽均是常用的。大小从1~5mm茎尖分生组织到数厘米的茎尖。c.外植体的消毒:将采到的茎尖切成0.5~1cm长,并将大叶除去。休眠芽先剥除鳞片。茎尖的消毒是在流水中冲洗2~4h后,在70%的酒精中浸渍极短时间,然后用0.1%次氯酸钠溶液表面消毒5min,再用无菌水冲洗。对于这些消毒方法,在工作中应灵活运用,以便适应具体的实验体系。d组织的分离:在剖取茎在时,要把茎芽置于解剖镜下,1手用1把镊子将其按住,另一手用解剖针将叶片的叶原基去掉,使生长点露出来,通常切下顶端0.1~0.2mm(含一两个叶原25
25 近看来,随着组织培养技术的不断发展,其应用的范围也日益广泛。它的应用领域主要有 以下几个方面:(a)无性系的快速大量繁殖。如采用茎尖培养的方法,1 个兰花的茎尖 1 年内 可育成 400 万个橘球茎,1 个草莓茎尖 1 年内可育出成苗 3000 万株。目前,兰花、马铃薯、柑 橘、香蕉、菠萝、香石竹、马蹄莲、玉簪等多种园艺植物,均已采用组织培养进行快速繁殖; (b)培育无病毒苗木;(c)繁殖材料的长距离寄送和无性系材料的长期贮藏;(d)细胞次生代谢物的 生产,并应用于生物制药工业;(e)细胞工程和基因工程等生物技术育种;(f)遗传学和生物学基 础理论的研究。 4.7.2 茎尖与茎段的培养 茎尖和茎段都是器官培养的 1 种方式,器官培养还包括块茎、球茎、叶片、子叶、花序、 花瓣、子房、花托、果实、种子等的培养,而茎尖和茎段是园艺植物离体培养中最常采用的材 料之一。茎尖的培养含义比较广泛,包括小到仅 0.1~1.0mm 的茎尖分生组织,大到几十毫米的 茎尖或更大芽的培养。茎段培养是利用茎段可产生愈伤组织并能不断地继代培养,用以研究植 物的生长与发育,脱分化与再分化,遗传变异与育种。 (1)培养过程 第一阶段:建立无菌材料即外植体。 第二阶段:外植体的增殖,即茎尖增殖新梢的过程。 第三阶段:离体茎的生根和炼苗。 第四阶段:小苗移植驯化,入土小植株迅速生长发育。 (2)培养方法和程度 ① 无菌培养物建立的准备 a. 母本植株的管理:母体植株的管理要从 2 个方面来考虑。首先,通过管理措施,防止母 株感菌并发病;其次,控制外植体的生理状况。通过人为措施,保持每株健壮、生长。 b. 外植体的选择:茎尖培养应在旺盛生长的植株上取外植体,未萌发的侧芽生长点和顶端 芽均是常用的。大小从 1~5mm 茎尖分生组织到数厘米的茎尖。 c.外植体的消毒:将采到的茎尖切成 0.5~1cm 长,并将大叶除去。休眠芽先剥除鳞片。茎 尖的消毒是在流水中冲洗 2~4h 后,在 70%的酒精中浸渍极短时间,然后用 0.1%次氯酸钠溶液 表面消毒 5min,再用无菌水冲洗。对于这些消毒方法,在工作中应灵活运用,以便适应具体的 实验体系。 d. 组织的分离:在剖取茎在时,要把茎芽置于解剖镜下,1 手用 1 把镊子将其按住,另一 手用解剖针将叶片的叶原基去掉,使生长点露出来,通常切下顶端 0.1~0.2mm(含一两个叶原