第十一章 二PHCE基本原理 basic principles of PHCE 高效毛细管电泳 二、电渗现象与电渗流 electroosmosis and electroosmotic 分析法 flow high performance capillary 三、影响电渗流的因素 factors influenced electroosmosis electrophoresis,HPCE 四、淌度 第二节 mobility 高效毛细管电泳理论 五、PHCE中的参数与关系 基础 parameters and relation in HPCE basic theory of HPCE 六、影响分离效率的因素 factors influenced separation efficiency 下一页 15:36:59
15:36:59 第十一章 高效毛细管电泳 分析法 一、PHCE基本原理 basic principles of PHCE 二、电渗现象与电渗流 electroosmosis and electroosmotic flow 三、影响电渗流的因素 factors influenced electroosmosis 四、淌度 mobility 五、PHCE中的参数与关系 式 parameters and relation in HPCE 六、影响分离效率的因素 factors influenced separation efficiency 第二节 高效毛细管电泳理论 基础 high performance capillary electrophoresis,HPCE basic theory of HPCE
高效毛细管电泳(HPCE)基本原理 basic principles of PHCE 电泳是指带电离子在电场中的定向移动,不同离子具有 不同的迁移速度,迁移速度与哪些因素有关? 当带电离子以速度V在电场中移动时,受到大小相等、 方向相反的电场推动力和平动摩擦阻力的作用。 电场力:Fe=qE 阻力:F=fy 故: qE=f加 9一离子所带的有效电荷: E一电场强度; y一离子在电场中的迁移速度; f一平动摩擦系数(对于球形离子:f=6π;y一离子的表观液态动力 学半径;一介质的粘度:】 1536:59
15:36:59 一、高效毛细管电泳(HPCE)基本原理 basic principles of PHCE 电泳是指带电离子在电场中的定向移动,不同离子具有 不同的迁移速度,迁移速度与哪些因素有关? 当带电离子以速度ν 在电场中移动时,受到大小相等、 方向相反的电场推动力和平动摩擦阻力的作用。 电场力:FE = qE 阻 力:F = fν 故: qE = fν q—离子所带的有效电荷; E —电场强度; ν—离子在电场中的迁移速度; f —平动摩擦系数( 对于球形离子:f =6πηγ;γ —离子的表观液态动力 学半径;η —介质的粘度; )
所以,迁移速度: E (球形离子) 6n yn 物质离子在电场中差速迁移是电泳分离的基础。 淌度:单位电场强度下的平均电泳速度。 6n yn Buffer 1536:59
15:36:59 所以,迁移速度: E q f qE 6π = = (球形离子) 物质离子在电场中差速迁移是电泳分离的基础。 淌度μ :单位电场强度下的平均电泳速度。 6π q E = =
二、电渗现象与电渗流 electroosmosis and electroosmotic flow 1.电渗流现象 当固体与液体接触时,固体表面由于某种原因带一种电 荷,则因静电引力使其周围液体带有相反电荷,在液-固界 面形成双电层,二者之间存在电位差。 当液体两端施加电压时, 毛细首电冰中的 电潜流 就会发生液体相对于固体表面 的移动,这种液体相对于固体 表面的移动的现象叫电渗现象。 电渗现象中整体移动着的 液体叫电渗流(electroosmotic f1ow,简称EOF) 。 1536:59
15:36:59 二、电渗现象与电渗流 electroosmosis and electroosmotic flow 1.电渗流现象 当固体与液体接触时,固体表面由于某种原因带一种电 荷,则因静电引力使其周围液体带有相反电荷,在液-固界 面形成双电层,二者之间存在电位差。 当液体两端施加电压时, 就会发生液体相对于固体表面 的移动,这种液体相对于固体 表面的移动的现象叫电渗现象。 电渗现象中整体移动着的 液体叫电渗流(electroosmotic flow ,简称EOF)
2.HPCE中的电渗现象与电渗流 石英毛细管柱,内充液pH>3时,表面电离成-Si0,管 内壁带负电荷,形成双电层。 在高电场的作用下,带正电荷的溶液表面及扩散层向阴 极移动,由于这些阳离子实际上是溶剂化的,故将引起柱中 的溶液整体向负极移动,速度V电渗流。 毛细营电泳中的 电渗流 /nm 吸附层紧密层 扩散层 15:36:59
15:36:59 2.HPCE中的电渗现象与电渗流 石英毛细管柱,内充液pH>3时,表面电离成-SiO-,管 内壁带负电荷,形成双电层。 在高电场的作用下,带正电荷的溶液表面及扩散层向阴 极移动,由于这些阳离子实际上是溶剂化的,故将引起柱中 的溶液整体向负极移动,速度ν电渗流