肌糖元的酵解作用 实验目的 1.学习检定糖酵解作用的原理和方法 ■2.了解糖酵解作用在糖代谢过程中的地 位及生理意义
肌糖元的酵解作用 ◼ 实验目的 ◼ 1. 学习检定糖酵解作用的原理和方法 ◼ 2. 了解糖酵解作用在糖代谢过程中的地 位及生理意义
■实验原理 ■在动物、植物、微生物等许多生物机体內,糖 的无氧分解几乎都按完全相同的过程进行,本 实验以动物肌肉组织中肌糖元的酵解过程为例。 肌糖元的酵解作用,即肌糖元在缺氧的条件下 经过一系列的酶促反应最后转变成乳酸的过程。 肌肉组织中的肌糖元首先与磷酸化合而分解 经过己糖磷酸脂、丙糖磷酸脂、丙酮酸等一系 列中间产物,最后生成乳酸。该过程可综合在 下列反应式 1/n(CHOsn+H,o-2CH3CHOHCOOH 糖元 乳酸
◼ 实验原理 ◼ 在动物、植物、微生物等许多生物机体内，糖 的无氧分解几乎都按完全相同的过程进行，本 实验以动物肌肉组织中肌糖元的酵解过程为例。 肌糖元的酵解作用，即肌糖元在缺氧的条件下， 经过一系列的酶促反应最后转变成乳酸的过程。 肌肉组织中的肌糖元首先与磷酸化合而分解， 经过己糖磷酸脂、丙糖磷酸脂、丙酮酸等一系 列中间产物，最后生成乳酸。该过程可综合在 下列反应式： ◼ 1/n（C6H5O5）n ＋H2O→2CH3CHOHCOOH ◼ 糖元 乳酸
■肌糖元的酵解作用是糖类供给组织能量的一种 方式。当机体突然需要大量的能量,而又供氧 不足(如剧烈运动时),则糖元的酵解作用暂 时满足能量消耗的需要。在有氧条件下,组织 内糖元的酵解作用受到抑制,而有氧氧化则为 糖代谢的主要途径。 ■糖元酵解作用的实验,一般使用肌肉糜或肌肉 提取液。在用肌肉糜时,必须在无氧的条件下 进行;而肌肉提取液,则可在有氧条件下进行。 因为,催化酵解作用的酶系统全部存在于肌肉 提取液中,而催化呼吸作用(即三羧酸循环) 的酶系统,则集中在线粒体中,糖元可用淀粉 代替
◼ 肌糖元的酵解作用是糖类供给组织能量的一种 方式。当机体突然需要大量的能量，而又供氧 不足（如剧烈运动时），则糖元的酵解作用暂 时满足能量消耗的需要。在有氧条件下，组织 内糖元的酵解作用受到抑制，而有氧氧化则为 糖代谢的主要途径。 ◼ 糖元酵解作用的实验，一般使用肌肉糜或肌肉 提取液。在用肌肉糜时，必须在无氧的条件下 进行；而肌肉提取液，则可在有氧条件下进行。 因为，催化酵解作用的酶系统全部存在于肌肉 提取液中，而催化呼吸作用（即三羧酸循环） 的酶系统，则集中在线粒体中，糖元可用淀粉 代替
淀粉存在于绿色植物的多种组织中(种子、块 茎、干果)。 糖元是动物和细菌细胞内糖及其所反应的能源 的一种储存形式,其作用与淀粉在植物中的作 用一样,故有“动物淀粉”之称。 糖元或淀粉的酵解作用,可由乳酸的生成来观 察,在除去蛋白质与糖以后,乳酸可以与硫酸 共热变成乙醛,后者再与对羟基联苯反应产生 紫红色物质,根据颜色的显现而加以鉴定。 该法比较灵敏,每毫升溶液含15μg乳酸即产 生明显的颜色反应,若有大量糖类和蛋白质等 杂质存在,则严重干扰测定结果,因此,实验 中应尽量除净这些物质。另外,测定时所用的 仪器应严格地洗涤干净
◼ 淀粉存在于绿色植物的多种组织中（种子、块 茎、干果）。 ◼ 糖元是动物和细菌细胞内糖及其所反应的能源 的一种储存形式，其作用与淀粉在植物中的作 用一样，故有“动物淀粉”之称。 ◼ 糖元或淀粉的酵解作用，可由乳酸的生成来观 察，在除去蛋白质与糖以后，乳酸可以与硫酸 共热变成乙醛，后者再与对羟基联苯反应产生 紫红色物质，根据颜色的显现而加以鉴定。 ◼ 该法比较灵敏，每毫升溶液含1-5µg乳酸即产 生明显的颜色反应，若有大量糖类和蛋白质等 杂质存在，则严重干扰测定结果，因此，实验 中应尽量除净这些物质。另外，测定时所用的 仪器应严格地洗涤干净
试剂和器材 ■1.材料家兔的肌肉 ■2.试剂 ■(1)0.5%糖元溶液(或0.5%淀粉溶液)、液 体石蜡、15%偏磷酸溶液、氢氧化钙(粉末) 浓硫酸、饱和硫酸铜溶液。 (2)1/15mo磷酸二氢钾溶液(pH8.0) 1/15moL磷酸二氢钾溶液(pH7.4) (3)对羟基联苯试剂 ■3.器材 ■试管及试管架、移液管(5ml、2ml、1ml、 0.5ml)、滴管、量筒(10ml)、玻璃棒、恒 温水浴、小台秤、剪刀及镊子、研钵、冰浴、 表面皿、橡皮塞
◼ 试剂和器材 ◼ 1. 材料 家兔的肌肉 ◼ 2. 试剂 ◼ （1）0. 5%糖元溶液（或0.5%淀粉溶液）、液 体石蜡、15%偏磷酸溶液、氢氧化钙（粉末）、 浓硫酸、饱和硫酸铜溶液。 ◼ （2）1/15 mol/L磷酸二氢钾溶液（pH8.0） ◼ 1/15 mol/L磷酸二氢钾溶液（pH7.4） ◼ (3)对羟基联苯试剂； ◼ 3. 器材 ◼ 试管及试管架、移液管（5 ml、2 ml、1 ml、 0.5 ml）、滴管、量筒（10 ml）、玻璃棒、恒 温水浴、小台秤、剪刀及镊子、研钵、冰浴、 表面皿、橡皮塞