实验三观赏植物产品采后乙烯释放特性测定 一、实验目的和要求 乙烯(ethylene)是植物内源激素之一,以气体形式存在,对植物生长发育的多个过程 有重要影响。准确测定乙烯释放量,对认识乙烯在植物抗逆生理、发育生理、开花生理中的 作用有者重要的意义。通过本试验,要求同学们能够了解气相色谱法测定乙烯生成量的基本 步骤,了解月季切花不同器官乙烯生成量的基本情况。 二、实验原理 气相色谱法测定乙烯具有灵敏度高、稳定性好等优点。色谱仪中的分离系统包括固定相 和流动相。由于固定相和流动相对各种物质的吸附或溶解能力不同,因此各种物质的分配系 数(或吸附能力)不一样。当含混合物的待测样(含乙烯的混合气)进入固定相以后,不断 通以流动相(通常为2或),待测物不断地再分配,最后,依照分配系数大小顺序依次 被分离,并进入检测系统得到检测。检测信号的大小反映出物质含量的多少,在记录仪上就 出现色谱图。要使待测物得到充分的分离,就需要一种合适的固定相。乙烯往往与乙炔、乙 烷难以分离,目前多用GD502作为固定相。 三、实验材料 月季切花 四、实验仪器和药品 乙烯标准气体,气相色谱仪(Shimadzu GC17A),数模转换器(Shimadzu CBM101), 电脑,空气压缩机,GC测气瓶和进样针。 五、实验步骤 上,材料处理:将取试验材料茎、叶、花(分成萼片、花瓣、雄蕊、雌蕊、子房和花托), 密闭于测气瓶中,25℃密封30min。 2.色谱仪启动启动步骤如下: 1)检测仪器各部件是否复位。若没有,需复位。 2)插上电源,依次打开电脑、色谱仪、数模转换器电源开关。 3)打开流动相(N2),然后打开仪器上的F1om健,将流速调至50 mL/min(管道1), 通气15min。 4)调节柱温至55℃,将进样口和检测器温度分别调至110℃和160℃(应先调节进 样口和检测器温度,待其温度达到要求后再升柱子的温度:检测器温度需大于进样口,并且 需在120℃以上)。 5)打开空气压缩机开关,调节适当的量程和衰减(range and attenuation),一般调至蜂 面积最小值为100,衰减为1
实验三 观赏植物产品采后乙烯释放特性测定 一、实验目的和要求 乙烯(ethylene)是植物内源激素之一,以气体形式存在,对植物生长发育的多个过程 有重要影响。准确测定乙烯释放量,对认识乙烯在植物抗逆生理、发育生理、开花生理中的 作用有着重要的意义。通过本试验,要求同学们能够了解气相色谱法测定乙烯生成量的基本 步骤,了解月季切花不同器官乙烯生成量的基本情况。 二、实验原理 气相色谱法测定乙烯具有灵敏度高、稳定性好等优点。色谱仪中的分离系统包括固定相 和流动相。由于固定相和流动相对各种物质的吸附或溶解能力不同,因此各种物质的分配系 数(或吸附能力)不一样。当含混合物的待测样(含乙烯的混合气)进入固定相以后,不断 通以流动相(通常为 N2 或 He),待测物不断地再分配,最后,依照分配系数大小顺序依次 被分离,并进入检测系统得到检测。检测信号的大小反映出物质含量的多少,在记录仪上就 出现色谱图。要使待测物得到充分的分离,就需要一种合适的固定相。乙烯往往与乙炔、乙 烷难以分离,目前多用 GD 502 作为固定相。 三、实验材料 月季切花 四、实验仪器和药品 乙烯标准气体,气相色谱仪( Shimadzu GC 17A ),数模转换器(Shimadzu CBM101), 电脑,空气压缩机,GC 测气瓶和进样针。 五、实验步骤 1. 材料处理:将取试验材料茎、叶、花(分成萼片、花瓣、雄蕊、雌蕊、子房和花托), 密闭于测气瓶中,25℃密封 30min。 2. 色谱仪启动 启动步骤如下: 1)检测仪器各部件是否复位。若没有,需复位。 2)插上电源,依次打开电脑、色谱仪、数模转换器电源开关。 3)打开流动相(N 2),然后打开仪器上的 Flow 键,将流速调至 50 mL/min (管道 1), 通气 15min。 4)调节柱温至 55 ℃,将进样口和检测器温度分别调至 110 ℃和 160 ℃(应先调节进 样口和检测器温度,待其温度达到要求后再升柱子的温度;检测器温度需大于进样口,并且 需在 120 ℃以上)。 5)打开空气压缩机开关,调节适当的量程和衰减(range and attenuation),一般调至峰 面积最小值为 100,衰减为 1
6)打开钢瓶氢气阀,调压力为1.0kgcm2(两管道一样),同时将空气压力调至0.5 kgcm2。 7)点火:通入空气和氢气数分钟后,按点火健,氢气即可在燃烧室燃烧,在点火并点 若时,可以看到基线向上移动。 8)条件选择:选择键打到2,并将空气压力调至10kgcm2,氢气调至0.5-0.7kgcm2之 间(两管道一样)。待基线稳定后即可正式测定。 3.测定 1)取一定浓度(uL,以空气作为稀释剂)、一定量(100-1000L)的标准乙烯进样, 并注意出峰时间。待乙烯峰至顶端时即为乙烯的保留时间,重复34次,得到平均值。该 平均值即作为样品中乙烯定性的依据之一。 2)取同样量的待测样品,注入色谱柱(进样)。待样品峰全部出完后,即可做下一个样 品。 3)定性: A外标法定性:样品中与标准乙烯保留时间相同的峰,即为样品乙烯峰。 B。内标法定性:在得到某一样品的色谱图后,向该样品中加入一定量的标准乙烯进样, 若某峰增高,该峰即为样品中乙烯峰。 4.关机步骤待得到所有样品色谱图后,可关机,关机步骤如下。 1)关掉氧气总阀。 2)关掉空气压缩机 3)将量程或衰减复位,选择键打到0F℉。 4)关掉电脑。 5)待、全部排完后,将所有阀复位。 6)关掉主机电源,并拔下插头。 样品中乙烯浓度一标峰 样品隆高 ×标样浓度 UL/L 单位鲜重样品乙烯生成速率.乙烯浓度×容器体积 密封时间x样品重童uL/(g*h)] 六、作业 1)根据实验结果绘制各器官乙烯生成量图。 2)气相色谱法测定乙烯含量过程中应注意些什么? 3)思考为何要先调节进样口和检测器温度,待其温度达到要求后再升柱子的温度:为 何检测器温度需大于进样口,并且需在120℃以上?
6)打开钢瓶氢气阀,调压力为 1.0 kg/ cm2(两管道一样),同时将空气压力调至 0.5 kg/cm 2 。 7)点火:通入空气和氢气数分钟后,按点火键 ,氢气即可在燃烧室燃烧,在点火并点 着时,可以看到基线向上移动。 8)条件选择:选择键打到 2,并将空气压力调至 10kg/cm2,氢气调至 0.5~0.7 kg/cm2 之 间(两管道一样)。待基线稳定后即可正式测定。 3. 测定 1)取一定浓度(μL/L,以空气作为稀释剂)、一定量(100~1000μL )的标准乙烯进样, 并注意出峰时间。待乙烯峰至顶端时即为乙烯的保留时间,重复 3~4 次,得到平均值。该 平均值即作为样品中乙烯定性的依据之一。 2)取同样量的待测样品,注入色谱柱(进样)。待样品峰全部出完后,即可做下一个样 品。 3)定性: A. 外标法定性:样品中与标准乙烯保留时间相同的峰,即为样品乙烯峰。 B. 内标法定性:在得到某一样品的色谱图后,向该样品中加入一定量的标准乙烯进样, 若某峰增高,该峰即为样品中乙烯峰。 4. 关机步骤 待得到所有样品色谱图后,可关机,关机步骤如下。 1)关掉氢气总阀。 2)关掉空气压缩机。 3)将量程或衰减复位,选择键打到 OFF 。 4)关掉电脑。 5)待 H2、N2 全部排完后,将所有阀复位。 6)关掉主机电源,并拔下插头。 ( μL/L ) [μL/ ( g * h )] 六、作业 1)根据实验结果绘制各器官乙烯生成量图。 2)气相色谱法测定乙烯含量过程中应注意些什么 ? 3)思考为何要先调节进样口和检测器温度,待其温度达到要求后再升柱子的温度;为 何检测器温度需大于进样口,并且需在 120℃以上?