半保留复制 细菌 密度梯度离心 (含15N-DNA 普通培养基 Hea DNA (6N 第一代 普通培养基 Hybrid dNA (15N14N First-generation 第二代 同位素示踪 8 Hybr daughter molecules
一、半保留复制 第一代 第二代 (含15N-DNA) 普通培养基 普通培养基 细菌 同位素示踪 密度梯度离心
定义:以DNA双链中的一条链为模 板,按碱基互补配对原则,合成两 条与亲代完全相同的子代双螺旋 DNA。每一个双螺旋中,一条链来 自亲代,另一条链是新合成的,把 这种复制方式叫做半保留复制
• 定义:以DNA双链中的一条链为模 板,按碱基互补配对原则,合成两 条与亲代完全相同的子代双螺旋 DNA。 每一个双螺旋中,一条链来 自亲代,另一条链是新合成的,把 这种复制方式叫做半保留复制
(一)DNA复制体系 1模板: 2. dntp: datpdgtp dctp dAte
(一)DNA复制体系 1.模板: 2. dNTP:dATP,dGTP, dCTP, dTTP
3酶及蛋自质因子 拓扑异构酶 8单链结合蛋白 ○解链酶 引物酶及引发体 ○D聚合酶 ○DNA连接酶 灬引物 冈崎片段 领头链 随从链 3 第十章核酸的生物合成
第十章 核酸的生物合成 3.酶及蛋白质因子 拓扑异构酶 解链酶 单链结合蛋白 DNA聚合酶 引物酶及引发体 DNA连接酶 引物 领头链 随从链 冈崎片段 5′ 5 ′ 3 3′ ′ 5’ 3’
(1)DNA聚合酶 n daTP n2dGTP|DNA聚合酶 DNA+(n, +n+n +n) PPi n,dCTP Mg 2+ naTTO 以模板DNA为指导 遵循碱基互补配对原则 DNA合成起始需引物(提供3-OH) DNA合成方向是5→3
• 以模板DNA为指导 • 遵循碱基互补配对原则 • DNA合成起始需引物(提供3’-OH ) • DNA合成方向是5’ → 3’ n1dATP n2dGTP n3dCTP n4dTTP DNA聚合酶 DNA+(n1+n2+n3+n4)PPi Mg2+ (1)DNA聚合酶