3基因文库的分类 按照外源DNA片段的来源： ·基因组DNA文库：从生物组织细胞提取出全部DNA,用物理方 法或酶法将DNA降解成预期大小的片段，然后将这些片段与适当 的载体连接，转入受体细菌或细胞，这样每一个细胞接受了含有 一个基因组DNA片段与载体连接的重组DNA分子，而且可以繁殖 扩增，许多细胞一起组成一个含有基因组各DNA片段克隆的集合 体，就称为基因组DNA文库。 基因组文库本质是基因组DNA分割为一个个小片段与载体连接后 所构成的重组分子。完整的基因组文库包含该生物基因组DNA全 部的序列，能从这文库中钓取该生物的全部基因或DNA序列。 7
7 3 基因文库的分类 按照外源DNA片段的来源： ▪ 基因组DNA文库：从生物组织细胞提取出全部DNA，用物理方 法或酶法将DNA降解成预期大小的片段，然后将这些片段与适当 的载体连接，转入受体细菌或细胞，这样每一个细胞接受了含有 一个基因组DNA片段与载体连接的重组DNA分子，而且可以繁殖 扩增，许多细胞一起组成一个含有基因组各DNA片段克隆的集合 体，就称为基因组DNA文库。 ▪ 基因组文库本质是基因组DNA分割为一个个小片段与载体连接后 所构成的重组分子。完整的基因组文库包含该生物基因组DNA全 部的序列，能从这文库中钓取该生物的全部基因或DNA序列
基因组DNA 限制性 内切酶 克隆、转化、培养、鉴定 ↓ 基因文库
限制性 内切酶 . 克隆、转化、培养、鉴定 基因组DNA 基因文库
cDNA文库：提取出组织细胞的全部mRNA,在体外反转 录成cDNA,与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后 转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增， 这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该 组织细胞的cDNA文库。 cDNA文库实际上是一定生长阶段或条件的某种细胞所表 达的基因，是没有内含子的基因文库。 冠 超 9
9 ▪ cDNA文库：提取出组织细胞的全部mRNA，在体外反转 录成cDNA，与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后 转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增， 这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该 组织细胞的cDNA文库。 ▪ cDNA文库实际上是一定生长阶段或条件的某种细胞所表 达的基因，是没有内含子的基因文库
外显子 结构基因 内含子 转录、如工修饰 mRNA
结构基因 外显子 内含子 转录、加工修饰 mRNA
两种文库最大的区别就在cDNA文库有时空特异性，只 含部分基因的编码框；而基因组文库包含了编码区、 非编码区、内含子、表达调控序列等。 用于基因克隆的DNA材料的选择： ·如果研究的目标是弄清一种蛋白质的氨基酸顺序，可 以根据克隆的cDNA分子的核苷酸序列的结构直接推 导出来； 如果要研究的是控制基因表达活动的调控序列，或 是在mRNA中不存在的某种特定序列，有关这类的信 息就只能从基因组DNA中获得。 11
11 两种文库最大的区别就在cDNA文库有时空特异性，只 含部分基因的编码框；而基因组文库包含了编码区、 非编码区、内含子、表达调控序列等。 用于基因克隆的DNA材料的选择： ▪ 如果研究的目标是弄清一种蛋白质的氨基酸顺序，可 以根据克隆的cDNA分子的核苷酸序列的结构直接推 导出来； ▪ 如果要研究的是控制基因表达活动的调控序列，或 是在mRNA中不存在的某种特定序列，有关这类的信 息就只能从基因组DNA中获得