实验二上皮组织 一、目的与要求 1.掌握各种类型被覆上皮的形态结构。 2.了解外分泌腺中几种腺上皮细胞的形态结构特点。 3.了解上皮细胞各个面的特化结构。 二、材料 LEICA生物显微镜、小肠横切片、气管横切片、食管横切片。 三、内容和方法 1.学生观察切片 (1)单层柱状上皮小肠横切片HE染色 肉眼观察:小肠横切面一般呈圆形或椭圆形,中央的空腔为肠腔,周围紫红色的部分为 肠壁。 低倍镜观察:可见肠壁腔面有许多突起的小肠绒毛,选择一个结构清晰的小肠绒毛进一 步详细观察。 高倍镜观察:小肠绒毛表面由单层柱状上皮构成。上皮细胞的胞质嗜酸性,细胞核椭圆 形,嗜碱性且着色较深,位于细胞近基部。转动细调节螺旋可见上皮的游离面有一条亮红色 粗线样的结构即纹状缘,它是由微绒毛密集而成的。上皮的基底面与结缔组织交界处有着色 较深的基膜,在局部的上皮细胞之间,夹有单个呈空泡样的杯状细胞,属于单细胞腺,分泌 粘液。杯状细胞的顶部因含大量粘原颗粒而膨大成杯状,由于粘原颗粒不着色(或着淡蓝色) 而呈空泡状。细胞的基部较小,内含不规则或新月状的细胞核(图8)。 (2)假复层柱状纤毛上皮气管横切片HE染色 肉眼观察:气管横切面呈圆形,管腔较大,腔面平整,管壁中有染成蓝紫色形如“C”字 的透明软骨。 低倍镜观察:气管的粘膜层较薄,被覆的是假复层柱状纤毛上皮,选择其中较清晰的部 分换高倍镜观察, 高倍镜观察:由于构成上皮的三种细胞高低不一,故上皮中细胞核的位置亦高低不平。 大致可排成三层。表层的细胞核呈椭圆形,较大,着色较淡的是高柱状细胞的核,中间层细 胞的核呈较小的椭圆形,着色较深,是梭形细胞的核:最深层的核呈圆形,着色最深,是锥 形细胞的核。三种细胞同位于基膜上,实属单层上皮。注意高柱状细胞的游离面有纤毛。在 有的部位上皮细胞间也见到空泡样的杯状细胞。上皮的基底面与结缔组织之间有较明显的基 膜(图9)。 -8-
- 8 - 实验二 上皮组织 一、目的与要求 1.掌握各种类型被覆上皮的形态结构。 2.了解外分泌腺中几种腺上皮细胞的形态结构特点。 3.了解上皮细胞各个面的特化结构。 二、材料 LEICA 生物显微镜、小肠横切片、气管横切片、食管横切片。 三、内容和方法 1.学生观察切片 (1)单层柱状上皮 小肠横切片 H.E 染色 肉眼观察:小肠横切面一般呈圆形或椭圆形,中央的空腔为肠腔,周围紫红色的部分为 肠壁。 低倍镜观察:可见肠壁腔面有许多突起的小肠绒毛,选择一个结构清晰的小肠绒毛进一 步详细观察。 高倍镜观察:小肠绒毛表面由单层柱状上皮构成。上皮细胞的胞质嗜酸性,细胞核椭圆 形,嗜碱性且着色较深,位于细胞近基部。转动细调节螺旋可见上皮的游离面有一条亮红色 粗线样的结构即纹状缘,它是由微绒毛密集而成的。上皮的基底面与结缔组织交界处有着色 较深的基膜,在局部的上皮细胞之间,夹有单个呈空泡样的杯状细胞,属于单细胞腺,分泌 粘液。杯状细胞的顶部因含大量粘原颗粒而膨大成杯状,由于粘原颗粒不着色(或着淡蓝色) 而呈空泡状。细胞的基部较小,内含不规则或新月状的细胞核(图 8)。 (2)假复层柱状纤毛上皮 气管横切片 H.E 染色 肉眼观察:气管横切面呈圆形,管腔较大,腔面平整,管壁中有染成蓝紫色形如“C”字 的透明软骨。 低倍镜观察:气管的粘膜层较薄,被覆的是假复层柱状纤毛上皮,选择其中较清晰的部 分换高倍镜观察, 高倍镜观察:由于构成上皮的三种细胞高低不一,故上皮中细胞核的位置亦高低不平。 大致可排成三层。表层的细胞核呈椭圆形,较大,着色较淡的是高柱状细胞的核,中间层细 胞的核呈较小的椭圆形,着色较深,是梭形细胞的核;最深层的核呈圆形,着色最深,是锥 形细胞的核。三种细胞同位于基膜上,实属单层上皮。注意高柱状细胞的游离面有纤毛。在 有的部位上皮细胞间也见到空泡样的杯状细胞。上皮的基底面与结缔组织之间有较明显的基 膜(图 9)
图8小肠肠绒毛切片 图9气管横切片 (3)复层扁平上皮食管横切片HE染色 肉眼观察:食管横切面呈椭圆形,粘膜向管腔突出形成数个皱襞,故管壁面凹凸不平。 低倍镜观察:找到紧靠腔面的复层扁平上皮,可见到上皮厚,层数多,选择一清晰部位 换高倍镜观察。 高倍镜观察:从腔面向外观察,上皮细胞可分三个层次:表层由数层扁平状的细胞构成, 胞质弱嗜酸性,由于不同程度的角化,细胞核可固缩而浓染变小以至消失,最后呈鳞片状脱 落。中间层细胞大,层数多,由多边形或梭形的细胞构成,细胞核圆或椭圆,着色较浅,细 胞质亦弱嗜酸性。基底层细胞呈立方形或矮柱状,位于基膜上,排列紧密,胞核椭圆着色深, 胞质弱嗜碱性。因此,易与基膜下淡红色的结缔组织相区别(图10)。 FEC 图10食管横切片 图11甲状腺切片 2.教师示教切片 (1)立方上皮甲状腺切片HE染色 高倍镜下甲状腺滤泡壁的单层立方上皮。可见细胞的高度和宽度大致相等,细胞核圆, 位于中央(图11)。 (2)变移上皮(高倍) 膀胱HE染色 当膀胱收缩时,膀胱壁的变移上皮增厚,由不同形态的4~6层细胞组成,表层细胞体积 -9
- 9 - 图 8 小肠肠绒毛切片 图 9 气管横切片 (3)复层扁平上皮 食管横切片 H.E 染色 肉眼观察:食管横切面呈椭圆形,粘膜向管腔突出形成数个皱襞,故管壁面凹凸不平。 低倍镜观察:找到紧靠腔面的复层扁平上皮,可见到上皮厚,层数多,选择一清晰部位 换高倍镜观察。 高倍镜观察:从腔面向外观察,上皮细胞可分三个层次:表层由数层扁平状的细胞构成, 胞质弱嗜酸性,由于不同程度的角化,细胞核可固缩而浓染变小以至消失,最后呈鳞片状脱 落。中间层细胞大,层数多,由多边形或梭形的细胞构成,细胞核圆或椭圆,着色较浅,细 胞质亦弱嗜酸性。基底层细胞呈立方形或矮柱状,位于基膜上,排列紧密,胞核椭圆着色深, 胞质弱嗜碱性。因此,易与基膜下淡红色的结缔组织相区别(图 10)。 图 10 食管横切片 图 11 甲状腺切片 2.教师示教切片 (1)立方上皮甲状腺切片 H.E 染色 高倍镜下甲状腺滤泡壁的单层立方上皮。可见细胞的高度和宽度大致相等,细胞核圆, 位于中央(图 11)。 (2)变移上皮(高倍) 膀胱 H.E 染色 当膀胱收缩时,膀胱壁的变移上皮增厚,由不同形态的 4~6 层细胞组成,表层细胞体积
大,核圆呈双核,该细胞顶端的胞质浓缩而呈深红色,称壳层,中间层细胞稍小,多为梭形 或倒梨形,有一个位于中央的圆形核,胞质染色淡而清亮,基底层细胞小,呈不规则立方形, 排列较密,核圆色深。当膀胱充盈扩张时,上皮变薄,数减少至1~3层,细胞变成扁平形(图 12)。 (4)腺上皮颌下腺切片HE染色 在颌下腺中,可以见到由浆液性细胞和粘液性细胞组成的不同形态的腺泡。 A浆液性腺泡呈圆形或椭圆形,由数个锥形的浆液性细胞围成,腺细胞基部胞质嗜碱性,细 胞顶部含大量嗜酸性分泌颗粒而呈红色,核圆,位于细胞基部。 B粘液性腺泡由锥形的粘液性细胞组成,胞质内含大量的粘原颗粒,着色很淡,呈淡蓝色, 核被挤向基底部,呈扁平月牙形。 C混合性腺泡是在粘液性腺泡的一侧有几个浆液性的细胞附着,呈半月状排列,色红,又称 浆半月(图13)。 图12膀胱 图13颌下腺切片 (5)细胞的特化结构通过观察电镜图片和幻灯片,了解上皮细胞游离面的微绒毛,纤毛, 侧面的连接复合体、缝管连接、镶嵌连接,基底面的基膜、质膜内褶、半桥粒等的亚微结构。 四、作业 1绘制部分单层柱状上皮细胞(含杯状细胞)的高倍镜图。 2.绘制高倍镜下的部分复层扁平上皮。 五、思考题 1.总结各种被覆上皮的结构特点及分布。 2在组织切片上,可以根据那些形态结构特征确认上皮组织? 3.复层扁平上皮和变移上皮在形态结构和功能上有什么不同? -10-
- 10 - 大,核圆呈双核,该细胞顶端的胞质浓缩而呈深红色,称壳层,中间层细胞稍小,多为梭形 或倒梨形,有一个位于中央的圆形核,胞质染色淡而清亮,基底层细胞小,呈不规则立方形, 排列较密,核圆色深。当膀胱充盈扩张时,上皮变薄,数减少至 1~3 层,细胞变成扁平形(图 12)。 (4)腺上皮 颌下腺切片 H.E 染色 在颌下腺中,可以见到由浆液性细胞和粘液性细胞组成的不同形态的腺泡。 A 浆液性腺泡呈圆形或椭圆形,由数个锥形的浆液性细胞围成,腺细胞基部胞质嗜碱性,细 胞顶部含大量嗜酸性分泌颗粒而呈红色,核圆,位于细胞基部。 B 粘液性腺泡由锥形的粘液性细胞组成,胞质内含大量的粘原颗粒,着色很淡,呈淡蓝色, 核被挤向基底部,呈扁平月牙形。 C 混合性腺泡是在粘液性腺泡的一侧有几个浆液性的细胞附着,呈半月状排列,色红,又称 浆半月(图 13)。 图 12 膀胱 图 13 颌下腺切片 (5)细胞的特化结构 通过观察电镜图片和幻灯片,了解上皮细胞游离面的微绒毛,纤毛, 侧面的连接复合体、缝管连接、镶嵌连接,基底面的基膜、质膜内褶、半桥粒等的亚微结构。 四、作业 1.绘制部分单层柱状上皮细胞(含杯状细胞)的高倍镜图。 2.绘制高倍镜下的部分复层扁平上皮。 五、思考题 1.总结各种被覆上皮的结构特点及分布。 2.在组织切片上,可以根据那些形态结构特征确认上皮组织? 3.复层扁平上皮和变移上皮在形态结构和功能上有什么不同?
实验三: 结缔组织 一、目的与要求 1掌握固有结缔组织中特别是疏松结缔组织和网状组织的形态特点。 2.掌握软骨的一般结构和三种软骨的特点,并了解骨组织的结构特征。 二、材料 Lica生物显微镜、结缔组织铺片、淋巴结切片(镀银法)、淋巴结切片(H.E)、气管横切片、 骨干横磨片。 三、内容和方法 1.学生观察切片 (1)疏松结缔组织铺片 结缔组织铺片(活体注射台盼蓝)HE及特殊的弹性纤维染色法 复染 肉眼观察:铺片染成蓝紫色,形态不规则且厚薄不均匀。 低倍镜观察:可见纵横交错呈淡红色的胶原纤维和深紫色单根的弹性纤维,纤维间有许 多散在的细胞。选择一薄而清晰的部位换高倍镜观察, 高倍镜观察:可以辨认以下几种纤维和两种细胞成分: A胶原纤维染成淡红色,数量多,为长短粗细均不等的纤维束,呈现波浪状且有分支, 相互交织成网。 B弹性纤维数量少,呈深紫色的发丝状,长而比较直,断端有卷曲。 C成纤维细胞数量最多,胞体大,具有多个突起的星形或多角形的细胞。由于胞质染 色极浅而细胞轮廓不清,只能根据细胞核较大,椭圆形,有1~2个明显的核仁等特点来判断。 这些细胞多沿胶原纤维分布。另外还可见到一些椭圆形、较小且深染,核仁不明显的细胞核, 此系功能不活跃的纤维细胞的细胞核。 D巨噬细胞又称组织细胞,一般呈梭形或星形,最大的特征是胞质内有许多被吞噬的 台盼蓝颗粒。细胞核较小,椭圆形且染色较深,见不到核仁,可借助于胞质中吞噬颗粒的存 在来判断它的形状和大小(图14)。 (2)网状细胞淋巴结切片HE染色 肉眼观察:淋巴结切面,周围色深的部分是淋巴结的皮质,中央色较浅的部分是淋巴结 的髓质。 低倍镜观察:找到淋巴结髓质,把细胞分布比较稀疏的部分(髓窦)置高倍镜下观察。 高倍镜观察:可见网状细胞较大,有数目不等的胞质突起,相邻网状细胞的突起可互相 连接成网,胞质和突起呈弱嗜碱性,胞核圆形或椭圆形,着色浅(图15)。 -11-
- 11 - 实验三 结缔组织 一、目的与要求 l.掌握固有结缔组织中特别是疏松结缔组织和网状组织的形态特点。 2.掌握软骨的一般结构和三种软骨的特点,并了解骨组织的结构特征。 二、材料 Leica 生物显微镜、结缔组织铺片、淋巴结切片(镀银法)、淋巴结切片(H.E)、气管横切片、 骨干横磨片。 三、内容和方法 1. 学生观察切片 (1)疏松结缔组织铺片 结缔组织铺片(活体注射台盼蓝) H.E 及特殊的弹性纤维染色法 复染 肉眼观察:铺片染成蓝紫色,形态不规则且厚薄不均匀。 低倍镜观察:可见纵横交错呈淡红色的胶原纤维和深紫色单根的弹性纤维,纤维间有许 多散在的细胞。选择一薄而清晰的部位换高倍镜观察, 高倍镜观察:可以辨认以下几种纤维和两种细胞成分: A 胶原纤维 染成淡红色,数量多,为长短粗细均不等的纤维束,呈现波浪状且有分支, 相互交织成网。 B 弹性纤维 数量少,呈深紫色的发丝状,长而比较直,断端有卷曲。 C 成纤维细胞 数量最多,胞体大,具有多个突起的星形或多角形的细胞。由于胞质染 色极浅而细胞轮廓不清,只能根据细胞核较大,椭圆形,有 1~2 个明显的核仁等特点来判断。 这些细胞多沿胶原纤维分布。另外还可见到一些椭圆形、较小且深染,核仁不明显的细胞核, 此系功能不活跃的纤维细胞的细胞核。 D 巨噬细胞 又称组织细胞,一般呈梭形或星形,最大的特征是胞质内有许多被吞噬的 台盼蓝颗粒。细胞核较小,椭圆形且染色较深,见不到核仁,可借助于胞质中吞噬颗粒的存 在来判断它的形状和大小(图 14)。 (2)网状细胞 淋巴结切片 H.E 染色 肉眼观察:淋巴结切面,周围色深的部分是淋巴结的皮质,中央色较浅的部分是淋巴结 的髓质。 低倍镜观察:找到淋巴结髓质,把细胞分布比较稀疏的部分(髓窦)置高倍镜下观察。 高倍镜观察:可见网状细胞较大,有数目不等的胞质突起,相邻网状细胞的突起可互相 连接成网,胞质和突起呈弱嗜碱性,胞核圆形或椭圆形,着色浅(图 15)
图14疏松结缔组织 图15淋巴结髓质 (3)网状纤维淋巴结切片镀银法 肉眼观察:淋巴结的切面被染成棕黑色。 低倍镜观察:找到粗细不等交织成网的黑色纤维,换高倍镜观察。 高倍镜观察:可见纤维着色深浅不同,其中较细呈黑色的是网状纤维,较粗呈棕色或灰 黑色的是胶原纤维。因镀银时两种纤维都着色,只是着色深浅程度不同而已(图16)。 (4)透明软骨气管横切片H.E染色 肉眼观察:在气管壁中有一条染成深蓝紫色的“C”形软骨环,即透明软骨。 低倍镜观察:找到透明软骨后,即可见到表面有嗜酸性的软骨膜,中央的基质着浅蓝紫 色,其中散布着许多软骨细胞。 高倍镜观察:软骨膜由致密结缔组织构成,可见嗜酸性平行排列的胶原纤维束,束间夹 有扁平的成纤维细胞。软骨细胞位于软骨陷窝内,边缘的软骨细胞小,呈扁平形或椭圆形, 越靠近中央,细胞体积渐大变成卵圆形或圆形。生活状态下软骨细胞充满软骨陷窝,制片后 因胞质收缩,软骨细胞与陷窝壁之间出现空隙。由于软骨细胞分裂增值,一个陷窝内常可见 到2~4个软骨细胞,称同源细胞群。软骨基质呈均质凝胶状,埋于其中的胶原纤维不能分辨。 在软骨陷窝周围的基质中含有较多的硫酸软骨素而显强嗜碱性,称软骨囊(图17)。 图16网状纤维 图17透明软骨 -12-
- 12 - 图 14 疏松结缔组织 图 15 淋巴结髓质 (3)网状纤维 淋巴结切片 镀银法 肉眼观察:淋巴结的切面被染成棕黑色。 低倍镜观察:找到粗细不等交织成网的黑色纤维,换高倍镜观察。 高倍镜观察:可见纤维着色深浅不同,其中较细呈黑色的是网状纤维,较粗呈棕色或灰 黑色的是胶原纤维。因镀银时两种纤维都着色,只是着色深浅程度不同而已(图 16)。 (4)透明软骨 气管横切片 H.E 染色 肉眼观察:在气管壁中有一条染成深蓝紫色的“C”形软骨环,即透明软骨。 低倍镜观察:找到透明软骨后,即可见到表面有嗜酸性的软骨膜,中央的基质着浅蓝紫 色,其中散布着许多软骨细胞。 高倍镜观察:软骨膜由致密结缔组织构成,可见嗜酸性平行排列的胶原纤维束,束间夹 有扁平的成纤维细胞。软骨细胞位于软骨陷窝内,边缘的软骨细胞小,呈扁平形或椭圆形, 越靠近中央,细胞体积渐大变成卵圆形或圆形。生活状态下软骨细胞充满软骨陷窝,制片后 因胞质收缩,软骨细胞与陷窝壁之间出现空隙。由于软骨细胞分裂增值,一个陷窝内常可见 到 2~4 个软骨细胞,称同源细胞群。软骨基质呈均质凝胶状,埋于其中的胶原纤维不能分辨。 在软骨陷窝周围的基质中含有较多的硫酸软骨素而显强嗜碱性,称软骨囊(图 17)。 图 16 网状纤维 图 17 透明软骨