(1)镜座一般呈蹄铁状或方形，有稳固和支持镜体的作用。 (2)镜臂是镜座与镜筒的连接部分，呈弓状，便于手握，有的在基部具一关节螺旋，可使 镜简倾斜，便于观察。 (3)载物台（镜台）方形，上有两个金属片夹，供固定标本用，或安装标本推进器。载物 台中央有一通光孔。 (4)标本推进器安放在载物台上，除固定切片外，还通过转轴连接接两个调节螺旋，这两 个调节螺旋可前、后、左、右移动切片。在推进器的纵、横坐标上标有刻度，以便确定某一 结构的方位。 (5)物镜转换器呈圆盘状，上有3~4个物镜螺旋口，供物镜按放大倍数高低顺序嵌入， 以便把物镜根据观察需要推到正确的使用位置上。 (6)调节螺旋分粗调节和细调节两个螺旋。粗调节螺旋用于低倍镜调焦：细调节螺旋用于 高倍镜调焦。两螺旋结合使用，使视野清晰。 (7)眼间距调整使两目镜与两眼间距离一致，不同的人两眼间距离不同，应根据自己的情 况加以调节。 (8)屈光度调节 光学部分 (1)物镜作第一次放大标本用。安装在物镜转换器上，通常有3~4个接物镜，分别是4 ×、10×、40×(50×)和100×，在每个接物镜的镜管上分别标有醒目的红色、黄色、蓝 色和白色线圈。4×和10×称低倍镜，40(50)×称高倍镜，100×是油浸镜，每个接物镜 的镜管上通常标有主要性能参数，如40/0.65,160/0.17,40表示放大倍数，0.65表示镜口率（数 值孔径，NA),160表示机械管长(mm),0.17表示允许盖玻片厚度(mm)。NA值越大， 透镜分辨率越高。 (2)目镜亦有5×，10×，15×和20×等。目镜的作用是将物镜放大的标本像（实像）再放 大成虚像。观察者可根据工作需要和标本的实际情况，恰当选择不同放大倍数的目镜。接目 镜内常安放一指针，便于指示视野中的某一结构。目镜可旋转，目镜底部有相应的刻度，以 供两眼度数不同的人调节。 (3)聚光器位于载物台的下方，起着把光线汇聚成光柱（束），增强照明度之用。聚光器 的一侧有调节螺旋，可以升降，可按需要调节亮度。 (4)光阑在聚光器下方，由许多金属叶片组成。由一光圈调节杆调节光圈大小，以控制聚 光镜的N·A值，以便符合物镜要求。 (5)亮度调节钮用于调整照明亮度。注意每次用完显微镜后应将亮度调节钮置于最暗的位 置，然后关闭电源。 (6)滤光片在光阑下方有一金属圈，可安放滤光片，借以改变光源的色调和强弱，便于观 .3-
- 3 - （1）镜座 一般呈蹄铁状或方形，有稳固和支持镜体的作用。 （2）镜臂 是镜座与镜筒的连接部分，呈弓状，便于手握，有的在基部具一关节螺旋，可使 镜简倾斜，便于观察。 （3）载物台（镜台） 方形，上有两个金属片夹，供固定标本用，或安装标本推进器。载物 台中央有一通光孔。 （4）标本推进器 安放在载物台上，除固定切片外，还通过转轴连接接两个调节螺旋，这两 个调节螺旋可前、后、左、右移动切片。在推进器的纵、横坐标上标有刻度，以便确定某一 结构的方位。 （5）物镜转换器 呈圆盘状，上有 3～4 个物镜螺旋口，供物镜按放大倍数高低顺序嵌入， 以便把物镜根据观察需要推到正确的使用位置上。 （6）调节螺旋 分粗调节和细调节两个螺旋。粗调节螺旋用于低倍镜调焦；细凋节螺旋用于 高倍镜调焦。两螺旋结合使用，使视野清晰。 （7）眼间距调整 使两目镜与两眼间距离一致，不同的人两眼间距离不同，应根据自己的情 况加以调节。 （8）屈光度调节 光学部分 （1）物镜 作第一次放大标本用。安装在物镜转换器上，通常有 3～4 个接物镜，分别是 4 ×、l0×、40× （50×）和 l00×，在每个接物镜的镜管上分别标有醒目的红色、黄色、蓝 色和白色线圈。4×和 l0×称低倍镜，40 （50） ×称高倍镜，l00×是油浸镜，每个接物镜 的镜管上通常标有主要性能参数，如 40/0.65，160/0.17, 40 表示放大倍数，0.65 表示镜口率（数 值孔径，N·A），160 表示机械管长（mm），0.17 表示允许盖玻片厚度（mm）。N·A 值越大， 透镜分辨率越高。 （2）目镜 亦有 5×, 10×, 15×和 20×等。目镜的作用是将物镜放大的标本像（实像）再放 大成虚像。观察者可根据工作需要和标本的实际情况，恰当选择不同放大倍数的目镜。接目 镜内常安放一指针，便于指示视野中的某一结构。目镜可旋转，目镜底部有相应的刻度，以 供两眼度数不同的人调节。 （3）聚光器 位于载物台的下方，起着把光线汇聚成光柱（束），增强照明度之用。聚光器 的一侧有调节螺旋，可以升降，可按需要调节亮度。 （4）光阑 在聚光器下方，由许多金属叶片组成。由一光圈调节杆调节光圈大小，以控制聚 光镜的 N·A 值，以便符合物镜要求。 （5）亮度调节钮 用于调整照明亮度。注意每次用完显微镜后应将亮度调节钮置于最暗的位 置，然后关闭电源。 （6）滤光片 在光阑下方有一金属圈，可安放滤光片，借以改变光源的色调和强弱，便于观
察和摄影。常用滤光片有三种：①毛玻片一减弱光强度、使光漫射而变的柔和：②蓝玻片一 白炽灯光照明时用，将黄色灯光校正成白光：③绿玻片一通常适用于黑白照片，显微摄影用。 (7)光源有自然光源（阳光）和人工光源（灯光）之分，本机采用人工光源。 2.显微镜的使用 (1)显微镜的提取和放置显微镜是精密的光学仪器，从显微镜柜中取出时，一定要按操作 规程进行，即一手握住镜臂，另一手托住镜座，严禁单手握住镜臂走动。显微镜使用前要平 放于使用者前方偏左的位置上。用擦镜纸轻轻擦拭目镜和物镜，若有脏物，则用擦镜纸蘸少 许乙醚与酒精混合液擦拭干净，并用纱布擦拭显微镜的机械部分。 (2)接通电源，打开电源开关，调整光强度，旋转物镜转换器，先把低倍接物镜对准载物台 中央的通光孔（对正光轴），根据标本染色情况选用不同放大倍率的接物镜，灵活应用亮度调 节钮、聚光器和光阑，调节至视野完全照明、亮度均匀，光强适宜。 (3)观察切片观察切片前，先用肉眼分辨切片的正反面，盖玻片朝上为正面，并大致观察 标本的外形、大小和着色。将切片放置于载物台上，置于持片夹内固定，运用推进器将组织 块对准载物台中央的通光孔。在镜臂的两侧有调节螺旋，可调节镜筒和物镜或载物台的升降。 按照低倍镜、高倍镜顺序观察切片，低倍镜观察的范围大，便于观察器官或组织的全貌 或整体结构。高倍镜观察的范围小，放大的倍数高，适用于分辨器官或组织某一局部的微细 结构。两者互相配合，可达到全面了解器官结构的目的。观察标本时，首先在低倍镜下对焦 至观察物象最清晰时为止，观察完切片一般结构后，需要进一步观察某一部分结构时，应将 此部位移至视野中央，转换高倍镜观察，如图像不清晰时，只需稍调节细调节螺旋，即可看 到清晰的物象。必须指出，接物镜放大倍数愈低，其工作距离（即接物镜前镜片与盖玻片上 平面之间的距离)愈长，接物镜放大倍数愈高，其工作距离愈短。所以使用高倍物镜时，应 避免用粗调节器。若必须便用时，则应用眼晴从侧方观看载物台上升，当盖玻片至物镜之间 的距离约为1毫米时，然后用眼观察视野，慢慢转动细调节器，直至看见物象清晰为止。运 用粗调节器时应小心，否则会压碎切片。观察切片时姿势要端正，要做好绘图或记录。 (4)收藏观察完毕后，移开物镜，取下切片，放入切片盒，降下镜筒。注意每次用完显微 镜后应将亮度调节钮置于最暗的位置，然后关闭电源，套上塑料套。 (二)细胞的结构 1.学生观察切片 (1)光镜下圆形细胞的形态结构以初级卵母细胞为例。 A卵巢切片HE染色 肉眼观察：卵巢纵切面呈椭圆形，着紫红色。 低倍镜观察：参考例图，找到卵巢的边缘部分，可见其中有许多小而圆、单个或成群存 在的原始卵泡。选择一个典型而清晰的原始卵泡，转换高倍镜观察。 4-
- 4 - 察和摄影。常用滤光片有三种：①毛玻片—减弱光强度、使光漫射而变的柔和；②蓝玻片— 白炽灯光照明时用，将黄色灯光校正成白光；③绿玻片—通常适用于黑白照片，显微摄影用。 （7）光源 有自然光源（阳光）和人工光源（灯光）之分，本机采用人工光源。 2.显微镜的使用 （1）显微镜的提取和放置 显微镜是精密的光学仪器，从显微镜柜中取出时，一定要按操作 规程进行，即一手握住镜臂，另一手托住镜座，严禁单手握住镜臂走动。显微镜使用前要平 放于使用者前方偏左的位置上。用擦镜纸轻轻擦拭目镜和物镜，若有脏物，则用擦镜纸蘸少 许乙醚与酒精混合液擦拭干净，并用纱布擦拭显微镜的机械部分。 （2）接通电源，打开电源开关，调整光强度，旋转物镜转换器，先把低倍接物镜对准载物台 中央的通光孔（对正光轴），根据标本染色情况选用不同放大倍率的接物镜，灵活应用亮度调 节钮、聚光器和光阑，调节至视野完全照明、亮度均匀，光强适宜。 （3）观察切片 观察切片前，先用肉眼分辨切片的正反面，盖玻片朝上为正面，并大致观察 标本的外形、大小和着色。将切片放置于载物台上，置于持片夹内固定，运用推进器将组织 块对准载物台中央的通光孔。在镜臂的两侧有调节螺旋，可调节镜筒和物镜或载物台的升降。 按照低倍镜、高倍镜顺序观察切片，低倍镜观察的范围大，便于观察器官或组织的全貌 或整体结构。高倍镜观察的范围小，放大的倍数高，适用于分辨器官或组织某一局部的微细 结构。两者互相配合，可达到全面了解器官结构的目的。观察标本时，首先在低倍镜下对焦 至观察物象最清晰时为止，观察完切片一般结构后，需要进一步观察某一部分结构时，应将 此部位移至视野中央，转换高倍镜观察，如图像不清晰时，只需稍调节细调节螺旋，即可看 到清晰的物象。必须指出，接物镜放大倍数愈低，其工作距离（即接物镜前镜片与盖玻片上 平面之间的距离）愈长，接物镜放大倍数愈高，其工作距离愈短。所以使用高倍物镜时，应 避免用粗调节器。若必须便用时，则应用眼睛从侧方观看载物台上升，当盖玻片至物镜之间 的距离约为 1 毫米时，然后用眼观察视野，慢慢转动细调节器，直至看见物象清晰为止。运 用粗调节器时应小心，否则会压碎切片。观察切片时姿势要端正，要做好绘图或记录。 （4）收藏 观察完毕后，移开物镜，取下切片，放入切片盒，降下镜筒。注意每次用完显微 镜后应将亮度调节钮置于最暗的位置，然后关闭电源，套上塑料套。 （二）细胞的结构 1.学生观察切片 （1）光镜下圆形细胞的形态结构 以初级卵母细胞为例。 A 卵巢切片 H.E 染色 肉眼观察：卵巢纵切面呈椭圆形，着紫红色。 低倍镜观察：参考例图，找到卵巢的边缘部分，可见其中有许多小而圆、单个或成群存 在的原始卵泡。选择一个典型而清晰的原始卵泡，转换高倍镜观察
高倍镜观察：高倍镜下可见原始卵泡由位于中央的卵母细胞和其外围呈扁平状的一层卵 泡细胞组成。卵母细胞较大，圆形，中央有一个大而圆、嗜碱性的细胞核，核仁大而明显、 染色质呈小块状。细胞质包绕在核的周围，弱嗜酸性，呈细颗粒状或均质淡红色。细胞质内 未见任何细胞器和包含物，这是由于所有的细胞器和包含物都需要经过特殊的染色才能显示。 胞膜和核膜在光镜下不能分辨。切面如不经过细胞核或核仁，则细胞内无细胞核或缺核仁。 核内的各种结构可能不在同一焦距平面上，观察时必须上下转动细调节螺旋方可获得清晰的 图像（图1）。 图1卵巢切片 图2脊神经节纵切片 B高尔基复合体脊神经节纵切片镀银法 肉眼观察：脊神经节纵切面略呈椭圆形，染成棕黄色。 低倍镜观察：可见脊神经节主要由深色的神经纤维束和纤维束之间呈淡黄色的脊神经 节细胞构成。脊神经节细胞成群分布，切面呈圆形或椭圆形，胞体大小不等。选择一个细 胞质中有黑色网状物的脊神经节细胞，转换高倍镜观察。 高倍镜下观察：脊神经节细胞呈淡黄色，中央或偏心处有一个不着色圆形的细胞核。 核周围的胞质中散布棕黑色的网状物即高尔基复合体。注意胞质中的高尔基复合体数量不 等，形状各异，有的呈网状，有的则被切断而呈粗颗粒状。切面如不经胞核的脊神经节细 胞，高尔基复合体则散布于细胞质中（图2）。 (2)动物细胞有丝分裂马蛔虫子宫切片铁苏木精染色 肉眼观察：切片中有4~6个圆形马蛔虫子宫横切面。 低倍镜观察：一个马蛔虫子宫横切面，可见子宫壁由高柱状细胞构成，子宫腔内有许 多圆形或椭圆形的马蛔虫卵切面。每个虫卵的外表面都包着一层较厚的胶质膜，其内是处 于不同分裂阶段的卵细胞。卵细胞的胞质着淡蓝色，参考例图，找出各分裂期的形态学特 点，找出前期、中期、后期和末期的卵细胞，并依次置于高倍镜下观察。 -5-
- 5 - 高倍镜观察：高倍镜下可见原始卵泡由位于中央的卵母细胞和其外围呈扁平状的一层卵 泡细胞组成。卵母细胞较大，圆形，中央有一个大而圆、嗜碱性的细胞核，核仁大而明显、 染色质呈小块状。细胞质包绕在核的周围，弱嗜酸性，呈细颗粒状或均质淡红色。细胞质内 未见任何细胞器和包含物，这是由于所有的细胞器和包含物都需要经过特殊的染色才能显示。 胞膜和核膜在光镜下不能分辨。切面如不经过细胞核或核仁，则细胞内无细胞核或缺核仁。 核内的各种结构可能不在同一焦距平面上，观察时必须上下转动细调节螺旋方可获得清晰的 图像（图 1）。 图 1 卵巢切片 图 2 脊神经节纵切片 B 高尔基复合体 脊神经节纵切片 镀银法 肉眼观察：脊神经节纵切面略呈椭圆形，染成棕黄色。 低倍镜观察：可见脊神经节主要由深色的神经纤维束和纤维束之间呈淡黄色的脊神经 节细胞构成。脊神经节细胞成群分布，切面呈圆形或椭圆形，胞体大小不等。选择一个细 胞质中有黑色网状物的脊神经节细胞，转换高倍镜观察。 高倍镜下观察：脊神经节细胞呈淡黄色，中央或偏心处有一个不着色圆形的细胞核。 核周围的胞质中散布棕黑色的网状物即高尔基复合体。注意胞质中的高尔基复合体数量不 等，形状各异，有的呈网状，有的则被切断而呈粗颗粒状。切面如不经胞核的脊神经节细 胞，高尔基复合体则散布于细胞质中（图 2）。 （2）动物细胞有丝分裂 马蛔虫子宫切片 铁苏木精染色 肉眼观察：切片中有 4～6 个圆形马蛔虫子宫横切面。 低倍镜观察：一个马蛔虫子宫横切面，可见子宫壁由高柱状细胞构成，子宫腔内有许 多圆形或椭圆形的马蛔虫卵切面。每个虫卵的外表面都包着一层较厚的胶质膜，其内是处 于不同分裂阶段的卵细胞。卵细胞的胞质着淡蓝色，参考例图，找出各分裂期的形态学特 点，找出前期、中期、后期和末期的卵细胞，并依次置于高倍镜下观察
高倍镜下观察： 前期：虫卵的胶质膜内只有一个圆形的卵细胞，胞核中的染色质己形成发夹样的染色 体，并在核仁、核膜消失后群集于细胞质中。纺锤体明显，其两极有深染的中心体。 中期：纺锤体移至细胞中部，染色体排列于纺锤体中部的赤道面上。 后期：染色体分为均等的两半，并分别向两极的中心体集中，中部的胞膜向内缩窄而 呈哑铃状。 末期：胶质膜内的两个子细胞已完全分开，染色体解聚变成小块状的染色质，核仁、 核膜相继出现，注意若在一个马蛔虫的子宫切片中，未能察见各期分裂相时，可从别的子 宫切面中寻找，直至全部察见为止（图3）。 图3马蛔虫子宫内卵细胞切片 2.教师示教切片 A立方形细胞甲状腺切片HE染色 高倍镜下观察甲状腺滤泡，指针所指的是滤泡壁的滤泡上皮细胞，呈立方形，细胞的长、 宽和高几乎相等，细胞核圆形，位于细胞中央，细胞质弱嗜酸性，围绕在核的周围（图4）。 B柱状细胞小肠切片HE染色 高倍镜下观察小肠绒毛，可见绒毛表面整齐地排着一层柱状上皮。指针所指的是一个柱 状细胞，细胞的高度大于宽度，呈柱状，细胞质弱嗜酸性细胞核椭圆形，位于细胞近基部。 由于细胞排列紧密，且细胞膜极薄，细胞界限不清，可从两核之间划一分界线，即可显示细 胞的柱状形态（图5）。 C星状有突起细胞（神经元）脊髓切片硫堇染色 高倍镜下观察脊髓灰质的腹角，指针所指的是脊髓运动神经细胞，细胞呈星状，从胞体 向外周伸出数个突起，胞体中央有一大而圆的细胞核，核内有较大的核仁（图6）。 D梭形的平滑肌细胞平滑肌分离装片 -6-
- 6 - 高倍镜下观察： 前期：虫卵的胶质膜内只有一个圆形的卵细胞，胞核中的染色质已形成发夹样的染色 体，并在核仁、核膜消失后群集于细胞质中。纺锤体明显，其两极有深染的中心体。 中期：纺锤体移至细胞中部，染色体排列于纺锤体中部的赤道面上。 后期：染色体分为均等的两半，并分别向两极的中心体集中，中部的胞膜向内缩窄而 呈哑铃状。 末期：胶质膜内的两个子细胞已完全分开，染色体解聚变成小块状的染色质，核仁、 核膜相继出现，注意若在一个马蛔虫的子宫切片中，未能察见各期分裂相时，可从别的子 宫切面中寻找，直至全部察见为止（图 3）。 图 3 马蛔虫子宫内卵细胞切片 2.教师示教切片 A 立方形细胞 甲状腺切片 H.E 染色 高倍镜下观察甲状腺滤泡，指针所指的是滤泡壁的滤泡上皮细胞，呈立方形，细胞的长、 宽和高几乎相等，细胞核圆形，位于细胞中央，细胞质弱嗜酸性，围绕在核的周围（图 4）。 B 柱状细胞 小肠切片 H.E 染色 高倍镜下观察小肠绒毛，可见绒毛表面整齐地排着一层柱状上皮。指针所指的是一个柱 状细胞，细胞的高度大于宽度，呈柱状，细胞质弱嗜酸性.细胞核椭圆形，位于细胞近基部。 由于细胞排列紧密，且细胞膜极薄，细胞界限不清，可从两核之间划一分界线，即可显示细 胞的柱状形态（图 5）。 C 星状有突起细胞（神经元） 脊髓切片 硫堇染色 高倍镜下观察脊髓灰质的腹角，指针所指的是脊髓运动神经细胞，细胞呈星状，从胞体 向外周伸出数个突起，胞体中央有一大而圆的细胞核，核内有较大的核仁（图 6）。 D 梭形的平滑肌细胞 平滑肌分离装片
高倍镜下观察单个平滑肌细胞，可见平滑肌细胞（肌纤维）呈长梭形，两端尖细，中部 略宽，胞质红染，内有一深蓝色杆状或长椭圆形的细胞核（图7）。 图4甲状腺切片 图5小肠肠绒毛切片 图6神经元 图7平滑肌纵切片 3.观察电镜幻灯片和图片 结合功能，了解细胞膜、各种细胞器和细胞核的亚微结构。 四、作业 1.绘制一个原始卵泡中的卵母细胞的形态结构高倍镜图。 2.绘制一个脊神经节细胞，示高尔基复合体高倍镜图。 五、思考题 1.粗、细调节旋钮使物镜上下移动还是使载物台上下移动？ 2.若用低倍镜能看到切片内容，但用高倍镜看不到，应考虑那些原因？ 3.一般而言，细胞哪些部分嗜碱性，哪些部分嗜酸性？为什么？ -7-
- 7 - 高倍镜下观察单个平滑肌细胞，可见平滑肌细胞（肌纤维）呈长梭形，两端尖细，中部 略宽，胞质红染，内有一深蓝色杆状或长椭圆形的细胞核（图 7）。 图 4 甲状腺切片 图 5 小肠肠绒毛切片 图 6 神经元 图 7 平滑肌纵切片 3.观察电镜幻灯片和图片 结合功能，了解细胞膜、各种细胞器和细胞核的亚微结构。 四、作业 1.绘制一个原始卵泡中的卵母细胞的形态结构高倍镜图。 2.绘制一个脊神经节细胞，示高尔基复合体高倍镜图。 五、思考题 1.粗、细调节旋钮使物镜上下移动还是使载物台上下移动？ 2.若用低倍镜能看到切片内容，但用高倍镜看不到，应考虑那些原因？ 3.一般而言，细胞哪些部分嗜碱性，哪些部分嗜酸性？为什么？