1.绝对定量:ct=- klogX0+b 各核酸的ct值与该核酸的起始拷贝数的对数存在线性关系,起始拷贝数 越多,Ct值越小。用已知拷贝数的标准品作出标难曲线,纵坐标代表起 始拷贝数的对数,横坐标代表ct值。未知样品测得其ct值,即可从标准 曲线上计算出该样品的起始拷贝数。 彐0.1 20 40 25 35 C(T)Cycle
1. 绝对定量: Ct=-klogX0+b 各核酸的Ct值与该核酸的起始拷贝数的对数存在线性关系，起始拷贝数 越多，Ct值越小。用已知拷贝数的标准品作出标难曲线，纵坐标代表起 始拷贝数的对数，横坐标代表Ct值。未知样品测得其Ct值，即可从标准 曲线上计算出该样品的起始拷贝数
2.基因表达水平相对定量 内参基因( reference gene),对照基因 一般会选择看家基因,在不同细胞、组织中常量表达。没有 组织特异性,或者对外界环境刺激反应不敏感。微管蛋白、 微丝蛋白、重要代谢酶或者rRNA应该都可以作为内参。这类 基因是生物体或者细胞中稳定表达的基因,表达量几乎不变 常用的内参基因如β- actin, GAPDH,18s-rRNA等
内参基因（reference gene)，对照基因 • 一般会选择看家基因，在不同细胞、组织中常量表达。没有 组织特异性，或者对外界环境刺激反应不敏感。微管蛋白、 微丝蛋白、重要代谢酶或者rRNA应该都可以作为内参。这类 基因是生物体或者细胞中稳定表达的基因，表达量几乎不变。 • 常用的内参基因如 β-actin,GAPDH,18s-rRNA等 2. 基因表达水平相对定量