DNA的半保留复制的 兼代DNA分子 概念 DNA在复制时，两条 链解开分别作为模板，在 DNA聚合酶的催化下按碱 基互补的原则合成两条与 模板链互补的新链，以组 成新的DNA分子。这样新 -0 形成的两个DNA分子与亲 G 代DNA分子的碱基顺序完 全一样。由于子代DNA分 子中一条链来自亲代，另 一条链是新合成的，这种 复制 复制链 复制方式称为半保留复制。 Watson和Criok提出的DNA 双螺旋复刺模型
DNA的半保留复制的 概念 DNA在复制时，两条 链解开分别作为模板，在 DNA聚合酶的催化下按碱 基互补的原则合成两条与 模板链互补的新链，以组 成新的DNA分子。这样新 形成的两个DNA分子与亲 代DNA分子的碱基顺序完 全一样。由于子代DNA分 子中一条链来自亲代，另 一条链是新合成的，这种 复制方式称为半保留复制
原核生物DNA聚合反应有关的酶类 (1)DNA聚合酶DNA 5 polymetases) (2)引物酶(peimase)和引发体 解旋酶 (primosome):启动RNA引物链 解链酶 的合成。 ·一 引物酶和 SSB-· 引发体 (3)DNA连接酶(DNA ligase) (4)DNA解链酶(DNA helicase) RNA引物 (5)单链结合蛋白(single- DNA聚 strand binding protein,SSB): 合酶川 结合在解开的DNA单链上，防止 重新形成双螺旋。 DNA聚● 合酶I (6)拓扑异构酶 (topoisomerase):兼具内切酶和 连接酶活力，能迅速将DNA超螺 旋或双螺旋紧张状态变成松驰状 态，便于解链。 RNA 引物
原核生物DNA聚合反应有关的酶类 （1）DNA聚合酶(DNA polymetases) （2）引物酶(peimase)和引发体 (primosome) ：启动RNA引物链 的合成。 (3） DNA连接酶（DNA ligase） （4）DNA解链酶(DNA helicase) (5）单链结合蛋白(singlestrand binding protein,SSB)： 结合在解开的DNA单链上，防止 重新形成双螺旋。 (6）拓扑异构酶 (topoisomerase):兼具内切酶和 连接酶活力，能迅速将DNA超螺 旋或双螺旋紧张状态变成松驰状 态，便于解链。 解旋酶 DNA聚 合酶III 解链酶 RNA引物 引物酶和 引发体 DNA聚 合酶I SSB 3´ 3´ 5´ 5´ 3´ 5´ RNA 引物
复制的忠实性 DNA复制过程是一个高度精确的过程， 据估计，大肠杆菌DNA复制10-101碱基对 仅出现一个误差，保证复制忠实性的原因主 要有以下三点： a、DNA聚合酶的高度专一性（严格遵循 碱基配对原则) b、DNA聚合酶的校对功能（错配碱基被3'-5 外切酶切除) C、起始时以RNA作为引物
复制的忠实性 DNA复制过程是一个高度精确的过程， 据估计，大肠杆菌DNA复制109 -1010碱基对 仅出现一个误差，保证复制忠实性的原因主 要有以下三点: a、DNA聚合酶的高度专一性（严格遵循 碱基配对原则） b、DNA聚合酶的校对功能（错配碱基被3’-5’ 外切酶切除） c、起始时以RNA作为引物
DNA [I5N]DNA 的半 保留 复制 实验 [IAN-I5N]DNA 依据 1958年Mese1son &stahl用同位素 First goneration daughter molecule 示踪标记加密度 [4N-I5N]DNA 梯度离心技术实 验，证明了DNA是 采取半保留的方 式进行复制： 4N]DNA
DNA 的半 保留 复制 实验 依据 1958年Meselson & stahl用同位素 示踪标记加密度 梯度离心技术实 验,证明了DNA是 采取半保留的方 式进行复制. [ 15N] DNA [ 14N- 15N] DNA [ 14N] DNA [ 14N- 15N] DNA
3' 模板链 AGAACCT TG S'RR R RAR P P 缺口 接酶连接切口 连接酶 ATP或NAD+ Mg2+ PPi或NMN 模板链 A G AA CC TT G T ST T G GAA C PPP R RPPR P 3
连 接 酶 连 接 切 口 Mg2+ 连接酶 ATP或NAD＋ PPi或NMN A T C G P T T P P P A A C C T G A P A C P P P P OH T G G A T C G P T T P P P A A C C T G A P A C P P P T G G P 缺口 3' 3' 5' 5' 5' 5' 3' 3' 模板链 模板链