个经典实验 (一)经典转化实验( transformation): F Griffith, 令研究对象: Streptococcus pneumoniae(肺炎双球菌) ☆S型菌株:有致病性,菌落表面光滑,有荚膜 ☆R型菌株:无致病性,菌落表面粗糙,无荚膜 1928年, Griffith进行了以下几组实验: 对小鼠注射活R菌或死S菌 小鼠存活 对小鼠注射活S菌- 小鼠死亡 对小鼠注射活R菌和热死S菌 鼠死亡 抽取心血分离活的S菌
1928年，Griffith进行了以下几组实验： （1）动物实验 对小鼠注射活R菌或死S菌 ————小鼠存活 对小鼠注射活S菌————————小鼠死亡 对小鼠注射活R菌和热死S菌 ———小鼠死亡 抽取心血分离活的S菌 一、三个经典实验 ❖（一）经典转化实验（transformation）：F.Griffith， ❖研究对象：Streptococcus pneumoniae（肺炎双球菌） ❖S型菌株：有致病性，菌落表面光滑，有荚膜 ❖R型菌株：无致病性，菌落表面粗糙，无荚膜
(2)细菌培养实验 热死S菌 不生长 活R菌- 长出R菌 热死S菌+活R菌 长出大量R菌和10°菌 (3)S型菌的无细胞抽提液试验 活R菌+S菌无细胞抽提液- 长出大量R菌和少量 S菌 以上实验说明:加热杀死的型细菌细胞內可能存在 一种转化物质,它能通过某种方式进入R型细胞并 使R塑细疱获得稳定的遗传性状
（2）细菌培养实验 热死S菌—————不生长 活R 菌—————长出R菌 热死S菌+活R 菌—————长出大量R菌和10-6S菌 （3）S型菌的无细胞抽提液试验 活R菌+S菌无细胞抽提液————长出大量R菌和少量 S菌 以上实验说明：加热杀死的S型细菌细胞内可能存在 一种转化物质，它能通过某种方式进入R型细胞并 使R型细胞获得稳定的遗传性状
1944年 OT.Avery、 C.M. MacLeod和M。 McCarty从 热死S型S. pneumoniae中提纯了可能作为转化因子 的各种成分,在离体条件下进行了转化试验 ◆①加S菌DNA 长出S菌 今②加S菌DNA及DNA酶以 活R菌 外的酶 ③加S菌的DNA和DNA酶 只有R菌 ④加S菌的RNA ◆⑤加S菌的蛋白质 ⑥加S菌的荚膜多糖 只有S型细菌的DNA才能将S. Pneumoniae的R型转 化为S型。且DNA纯度越高,转化效率也越高。说 明S型菌株转移给R型菌株的,是遗传因子
❖①加S菌DNA ❖②加S菌DNA及DNA酶以 外的酶 ❖③加S菌的DNA和DNA酶 ❖④加S菌的RNA ❖⑤加S菌的蛋白质 ❖⑥加S菌的荚膜多糖 活R菌 长出S菌 只有R菌 1944年O.T.Avery、C.M.MacLeod和M。McCarty从 热死S型S. pneumoniae中提纯了可能作为转化因子 的各种成分，在离体条件下进行了转化试验： 只有S型细菌的DNA才能将S. Pneumoniae的R型转 化为S型。且DNA纯度越高，转化效率也越高。说 明S型菌株转移给R型菌株的，是遗传因子
(二)噬菌体感染实验 A.D. Hershey和 M. Chase,1952年 上清液中含 5%放射性 吸附 10分钟后 用捣碎器 使空壳脱离 沉淀中含 85%放射性 沉淀细胞进一步 培养后,可产生大 量完整的子代噬菌体 用含32P-DNA(核心)的噬菌体作感染试验 (1)含PDNA的一组:放射性85%在沉淀中 (2)含3S-蛋白质的一组:放射性75%在上清液中 所以,进入细胞的是噬菌体的核酸而不是蛋白质
（二）噬菌体感染实验 A. D. Hershey和M. Chase， 1952年 （1）含32P-DNA的一组：放射性85%在沉淀中 （2）含35S-蛋白质的一组：放射性75%在上清液中 所以，进入细胞的是噬菌体的核酸而不是蛋白质
(三)植物病毒的重建实验 ☆为了证明核酸是遗传物质,H. Fraenkel Concat(1956)用含RNA的烟草花叶病毒 (TMV)进行了著名的植物病毒重建实验 将TMV在一定浓度的苯酚溶液中振荡,就 能将其蛋白质外壳与RNA核心相分离。分 离后的RNA在没有蛋白质包裹的情况下 也能感染烟草并使其患典型症状,而且在 病斑中还能分离出正常病毒粒子
（三）植物病毒的重建实验 ❖为了证明核酸是遗传物质，H. FraenkelConrat（1956）用含RNA的烟草花叶病毒 （TMV）进行了著名的植物病毒重建实验。 ❖将TMV在一定浓度的苯酚溶液中振荡，就 能将其蛋白质外壳与RNA核心相分离。分 离后的RNA在没有蛋白质包裹的情况下， 也能感染烟草并使其患典型症状，而且在 病斑中还能分离出正常病毒粒子