e双向凝胶电泳(two- dimens iona gel electrophoresis, 2-D) IEFSDS-PAGE IEFPG-PAGE 图824上端包埋有凝胶柱的 凝胶板侧面示意图 1.第一向电泳后的凝胶柱 2第二向电泳的凝胶板 3.制备板状凝胶的两块玻璃板 琼脂糖凝胶盐桥
16 双向凝胶电泳 ( two-dimensional gel electrophoresis, 2-D ) IEF/SDS-PAGE IEF/PG-PAGE
2-D之|EF
2 - D 之IEF 17
·▲口·4· 。▲口·▲●●G 平衡 第一向 EF pl3~10 pl4~7 pl3.5~4.5 第二向 pl4~5 SDS-PAGE pl5~6 7% 10% 12 14%
18 第一向 IEF pI3 ～10 pI4 ～ 7 pI3.5 ～4.5 pI4 ～ 5 pI5 ～ 6 …… 第二向 SDS -PAGE 7% 10% 12% 14% …… 平衡
IEF/ SDS-PAGE2 D Images(银染) p3~10 分子量 97 ;:: KD
19 IEF/SDS-PAGE 2D Images(银染） pI3~10 分 子 量 97 ~ 14 kD
免疫印迹法( Western blot) *原理 将蛋白质混合物电泳分离、转移并固定 在化学合成膜之类的固相支持物上,然后以 特定的免疫反应、亲和反应或结合反应以及 显色系统分析此印迹。可以对混合物中一种 或多种特异蛋白进行定性和半定量检测
20 三. 免疫印迹法(Western blot) * 原理 将蛋白质混合物电泳分离、转移并固定 在化学合成膜之类的固相支持物上，然后以 特定的免疫反应、亲和反应或结合反应以及 显色系统分析此印迹。可以对混合物中一种 或多种特异蛋白进行定性和半定量检测