必须具备的基本条件 ∥模板:母链DNA 原料:dNTP(包括dATP、dGTP、dCTP dTTP) M酶和蛋白质因子: M引物:一小段RNA 能量(ATP)及某些无机离子
必须具备的基本条件 模板:母链DNA 原料:dNTP(包括dATP、dGTP、dCTP 、dTTP) 酶和蛋白质因子: 引物:一小段RNA 能量(ATP)及某些无机离子
参与DNA复制的酶类与蛋白质因子 及其主要作用 1.拓扑异构酶( topoisomerase,po) IopI的作用不松解螺课旋封闭级 链DNA中的一链 称切割封口酶 TopoⅡ(又称旋转酶)的作用 无ATP时:作用相当于 Topo I,但切割的 是双链DNA某一部位断双链) 有ATP时:使带断口、松弛状的DNA分 子旋紧转变成负超螺旋结构,再连接断端
参与DNA复制的酶类与蛋白质因子 及其主要作用 1. 拓扑异构酶(topoisomerase,Topo) 无ATP时:作用相当于TopoⅠ,但切割的 是双链DNA某一部位(断双链)。 有ATP时:使带断口、松弛状的DNA分 子旋紧转变成负超螺旋结构,再连接断端。 不需耗能(ATP),切割(断) 双链DNA中的一链,松解螺旋, 封闭切口。 又称切割封口酶。 TopoⅠ 的作用 TopoⅡ(又称旋转酶)的作用
2.解链酶(又称解螺旋酶或螺旋酶, helicase) 作用:断裂互补碱基间的氢键使DNA双链分离形 成“复制叉”。 oooo 解链酶
2. 解链酶(又称解螺旋酶或螺旋酶,helicase) 解链酶 作用:断裂互补碱基间的氢键,使DNA双链分离形 成“复制叉”
A 拓扑异构酶I+ATP s 拓扑异构酶I DNA的松弛状态与超螺旋
A B C 拓扑异 构酶II+ATP 拓扑异 构酶I DNA的松弛状态与超螺旋
3.单链DNA结合蛋白(DNA结合蛋白) (single stranded DNA-binding protein, SSB 作用:防止重新形成双链和防止单链模板 被核酸酶水解,维持DNA单链状态和完整性 SB 领义3 IIIIIIMIII rep蛋白 解链Ⅱ 从继5 图13-4复制时解链酶和单链DNA结合蛋白的作用
3. 单链DNA结合蛋白(DNA结合蛋白) (single stranded DNA-binding protein,SSB) 作用:防止重新形成双 链和防止单链模板 被核酸酶水解,维持DNA单链状态和完整性