第三节 基因工程 利用转基因手段对生物进行人为改造的技术 一、目的基因的获得 二、工具酶和载体 三、转基因技术的应用
第三节 基因工程 利用转基因手段对生物进行人为改造的技术 一、目的基因的获得 二、工具酶和载体 三、转基因技术的应用
一、目的基因的获得 （一）目的基因的获得 1、从基因文库分离基因 ⚫ 基因（组）文库：某一生物的全部DNA序 列的不同DNA片段所构成的群体，即克隆 某种生物全部基因（99%）的总和。包含 外显子和内含子。 ⚫ cDNA文库：由某一生物特定器官或特定发 育阶段的细胞内总mRNA逆转录成互补 cDNA分子，其所构建的重组DNA克隆群 体，即具有表达功能外显子序列的总和。 2、化学合成基因
一、目的基因的获得 （一）目的基因的获得 1、从基因文库分离基因 ⚫ 基因（组）文库：某一生物的全部DNA序 列的不同DNA片段所构成的群体，即克隆 某种生物全部基因（99%）的总和。包含 外显子和内含子。 ⚫ cDNA文库：由某一生物特定器官或特定发 育阶段的细胞内总mRNA逆转录成互补 cDNA分子，其所构建的重组DNA克隆群 体，即具有表达功能外显子序列的总和。 2、化学合成基因
3、PCR法 ⚫ PCR（polymerase chain reaction,聚合酶 链反应)：体外有引物介导的特定DNA序列 的酶扩增。 ⚫ PCR技术的原理：利用DNA本身的特性，变 性与复性,以达到扩增DNA分子的目的。 ⚫ PCR反应条件（反应体系组成）：模板、引 物、dNTP、Taq DNA聚合酶、缓冲液、灭 菌水、石蜡油
3、PCR法 ⚫ PCR（polymerase chain reaction,聚合酶 链反应)：体外有引物介导的特定DNA序列 的酶扩增。 ⚫ PCR技术的原理：利用DNA本身的特性，变 性与复性,以达到扩增DNA分子的目的。 ⚫ PCR反应条件（反应体系组成）：模板、引 物、dNTP、Taq DNA聚合酶、缓冲液、灭 菌水、石蜡油
PCR原理
PCR原理