<upstream,downstream 70 35 10 DNA Direction of transcription 16
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大肠杆菌RNA聚合酶的组成分析 亚基 基因 相对分 亚基 组分 功能 子量 数 IPoA 3.65×10 2 核心酶 核心酶组装，启动子识别。 4 B poB 1.51×10 核心酶 B和B共同形成RNA合成 的活性中心。 rpoC 1.55×10 核心酶 5 11×104 核心酶 未知 rpoD 7.0×104 0因子 存在多种o因子，用于识别 不同的启动子 1
17 大肠杆菌RNA聚合酶的组成分析
◆α亚基可能与核心酶的组装及启动子识别 (recogonit ion)有关，并参与RNA聚合酶和部分调 节因子的相互作用。 ◆T4噬菌体感染大肠杆菌后对α亚基的一个精氨酸残基进行 ADP糖基化修饰，造成RNA聚合酶全酶对启动子亲和力降低。 ◆由B和B'亚基组成了聚合酶的催化中心 (catalytic center),它们在序列上与真核生物 RNA聚合酶的两个大亚基有同源性。B亚基能与模 板DNA、新生RNA链及核苷酸底物相结合。 18
18 ◆ α亚基可能与核心酶的组装及启动子识别 (recogonition)有关，并参与RNA聚合酶和部分调 节因子的相互作用。 ◆ T4噬菌体感染大肠杆菌后对α亚基的一个精氨酸残基进行 ADP糖基化修饰，造成RNA聚合酶全酶对启动子亲和力降低。 ◆ 由β和β'亚基组成了聚合酶的催化中心 (catalytic center)，它们在序列上与真核生物 RNA聚合酶的两个大亚基有同源性。β亚基能与模 板DNA、新生RNA链及核苷酸底物相结合
◆σ因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始 (inition).,它是酶的别构效应物，使酶专一性识 别模板上的启动子。核心酶在T7噬菌体DNA上约有 1300个结合位点，平均结合常数为2×1011。 ◆o因子可以极大地提高RNA聚合酶对启动子区DNA序 列的亲和力，酶底结合常数提高103倍，酶底复合 物的半衰期可达数小时甚至数十小时。 ◆σ因子还能使RNA聚合酶与模板DNA上非特异性位点 的结合常数降低104倍，使酶底复合物的半衰期小 于1秒。 19
19 ◆ σ因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始 (inition)，它是酶的别构效应物，使酶专一性识 别模板上的启动子。核心酶在T7噬菌体DNA上约有 1300个结合位点，平均结合常数为2×1011 。 ◆ σ因子可以极大地提高RNA聚合酶对启动子区DNA序 列的亲和力，酶底结合常数提高103倍，酶底复合 物的半衰期可达数小时甚至数十小时。 ◆ σ因子还能使RNA聚合酶与模板DNA上非特异性位点 的结合常数降低104倍，使酶底复合物的半衰期小 于1秒
大肠杆菌中的σ因子能识别并与启动子区的特异 性序列相结合 因子 基因 功能 -35区 间隔 -10☒ (bp) 070 rpoD 广泛 TTGACA 16-18 TATAAT 032 rpoH 热休克 TCTCNC 13-15 CCCCAT CCTTGA NTA A 054 rpoN 氮代谢 CTGGNA 6 TTGCA ◆ 在大肠杆菌中，最常见的调控因子是由rpoD基因所编码的σ0。 ◆由rpoH编码的σ32是与热休克启动子所控制的基因转录密切相关。 ◆由rpoN编码的σ54则参与细胞的氮代谢。 20
20 大肠杆菌中的σ因子能识别并与启动子区的特异 性序列相结合 ◆ 在大肠杆菌中，最常见的调控因子是由rpoD基因所编码的σ70 。 ◆ 由rpoH编码的σ32是与热休克启动子所控制的基因转录密切相关。 ◆ 由rpoN编码的σ54则参与细胞的氮代谢