转录泡 非模饭链 EN 重新形成螺旋 模板链 AD然A活性位点 杂合物，hp 转承方向 负超螺炭 正超螺旋 转方向 大肠杆菌中依赖于DNA的RNA转录过程图示 转录泡中单链DNA的长度约在17bp左右，被聚合酶复合物所保护的DNA序列 约为35bp左右 11
11 大肠杆菌中依赖于DNA的RNA转录过程图示 转录泡中单链DNA的长度约在17bp左右，被聚合酶复合物所保护的DNA序列 约为35bp左右
◆模板识别阶段主要指RNA聚合酶与启动子DNA双链 相互作用并与之相结合的过程。转录起始前，启 动子附近的DNA双链分开形成转录泡以促使底物核 糖核苷酸与模板DNA的碱基配对。 ◆转录起始就是RNA链上第一个核苷酸键的产生。 ◆真核生物RNA聚合酶不能直接识别基因的启动子区，需要一 些被称为转录调控因子的辅助蛋白质按特定顺序结合于启动 子上，RNA聚合酶才能与之相结合并形成复杂的前起始复合 物(preinitiation transcription complex,PIC),以保证有 效地起始转录。 12
12 ◆ 模板识别阶段主要指RNA聚合酶与启动子DNA双链 相互作用并与之相结合的过程。转录起始前，启 动子附近的DNA双链分开形成转录泡以促使底物核 糖核苷酸与模板DNA的碱基配对。 ◆ 转录起始就是RNA链上第一个核苷酸键的产生。 ◆ 真核生物RNA聚合酶不能直接识别基因的启动子区，需要一 些被称为转录调控因子的辅助蛋白质按特定顺序结合于启动 子上，RNA聚合酶才能与之相结合并形成复杂的前起始复合 物（preinitiation transcription complex, PIC），以保证有 效地起始转录
◆转录起始后直到形成9个核苷酸短链是通过启动 子阶段，此时RNA聚合酶一直处于启动子区，新 生的RNA链与DNA模板链的结合不够牢固，很容易 从DNA链上掉下来并导致转录重新开始。 ◆一旦RNA聚合酶成功地合成9个以上核苷酸并离开 启动子区，转录就进入正常的延伸阶段。 ◆RNA聚合酶离开启动子，沿DNA链移动并使新生RNA 链不断伸长的过程就是转录的延伸。 13
13 ◆ 转录起始后直到形成9个核苷酸短链是通过启动 子阶段，此时RNA聚合酶一直处于启动子区，新 生的RNA链与DNA模板链的结合不够牢固，很容易 从DNA链上掉下来并导致转录重新开始。 ◆ 一旦RNA聚合酶成功地合成9个以上核苷酸并离开 启动子区，转录就进入正常的延伸阶段。 ◆ RNA聚合酶离开启动子，沿DNA链移动并使新生RNA 链不断伸长的过程就是转录的延伸
3.1.2 转录机器的主要成分 ◆1.RNA聚合酶 ◆RNA聚合酶是转录过程中最关键的酶，主要 以双链DNA为模板，以4种核苷三磷酸作为 活性前体，并以Mg2+/M2+为铺助因子，催化 RNA链的起始、延伸和终止，它不需要任何 引物，催化生成的产物是与DNA模板链相互 补的RNA。 14
14 3.1.2 转录机器的主要成分 ◆1. RNA聚合酶 ◆RNA聚合酶是转录过程中最关键的酶，主要 以双链DNA为模板，以4种核苷三磷酸作为 活性前体，并以Mg2+/Mn2+为辅助因子，催化 RNA链的起始、延伸和终止，它不需要任何 引物，催化生成的产物是与DNA模板链相互 补的RNA
大多数原核生物RNA聚合酶的组成是相同的，大肠杆菌RNA 聚合酶由2个a亚基、一个B亚基、一个B'亚基和一个ω亚 基组成，称为核心酶(core enzyme)。加上一个o亚基后则 成为聚合酶全酶(ho l oenzyme).,相对分子质量为 4.65×105。 a BB'ω a 大肠杆菌RNA聚合酶 U 15
15 ◆ 大多数原核生物RNA聚合酶的组成是相同的，大肠杆菌RNA 聚合酶由2个α亚基、一个β亚基、一个β'亚基和一个ω亚 基组成，称为核心酶(core enzyme)。加上一个σ亚基后则 成为聚合酶全酶（holoenzyme），相对分子质量为 4.65×105 。 大肠杆菌RNA聚合酶